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《bdnf對(duì)aβ致傷大鼠海馬神經(jīng)元突觸功能修復(fù)的影響》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫(kù)。
1、HEILONG~ANGMEDICINEANDPHARMACYDec．2013，Vo1．36No．6·7·BDNF對(duì)Ap致傷大鼠海馬神經(jīng)元突觸功能修復(fù)的影響馮旭．黃昕艷．江清林．趙錦程(佳未斯大學(xué)神經(jīng)科學(xué)研究所，黑龍江佳未斯154oo7)旦璧凳竺犁塑至孝。．塑專壁的期大窒磐倒置相差顯微鏡下觀察，培養(yǎng)至第5天神經(jīng)元胞體進(jìn)一擎突壁暨疃皇。AB窶箜步增大，突起繼續(xù)粗增，l萊分明孟苫菱至．．窒二套觸堡墨墊里孽三在神經(jīng)．覆損傷修墨t乙塑妻摹零展粵童三佳第第79天天神粹經(jīng)經(jīng)元元生發(fā)長(zhǎng)育旺成盛氨，，胞亙體菌大，綦
2、突起：萇不，分枝蓬囊末連,I)2A[31-42聚擎算體夕爹均，神經(jīng)元個(gè)體難以分出。NSE免煮細(xì)益。，觸蛋：白翌神壅經(jīng)攫凰磐蓬，搴．，BDNF對(duì)．A．B致傷筆霆窒鴦及突經(jīng)元胞漿內(nèi)可覓棕簧色陽(yáng)性顆冕(Neuo，g：。、，塑烹(．疫反應(yīng)；經(jīng)陽(yáng)性并藪，芫純N?9o％?~2~～o～一?．modulin,治?療～提?供～N實(shí)m驗(yàn)警依據(jù)影響。為阿爾海默茨病突觸損傷機(jī)制及2．2不同濃度1-?42箍神磊生存率、凋亡率的。髟晌’。?。一’一一?’1．1實(shí)驗(yàn)材料大，突起長(zhǎng)，軸突遠(yuǎn)端生長(zhǎng)錐染色明顯。與正常對(duì)照組相比，新生
3、24h內(nèi)sD大鼠，由佳木斯大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供21．tmol／LAl31—42、5Ixmol／LAIM一42組著色細(xì)胞無(wú)明顯減(動(dòng)物質(zhì)量合格證號(hào)：黑動(dòng)字第99102001)。AIM一42(Sigma少，軸突生長(zhǎng)錐染色少；1Opmol／LAIM一42組著色細(xì)胞減少，公司)；Caspase一3免疫組化試劑盒(武漢博士德公司)；山羊被染色的細(xì)胞多為胞體較小，突起較短；20pmol／LA[31—42抗小鼠IgG(trite)、山羊抗兔Igcl：兀TC)(santaCruz公司)。組細(xì)胞明顯減少，殘存細(xì)胞胞
4、體小，突起斷裂、消失。隨著1．2方法AIM一42濃度的增加，神經(jīng)細(xì)胞生存率逐漸降低，1O、取2Ah內(nèi)新生sD大鼠，暴露大腦半球雙側(cè)海馬，用鑷子201~mol／L，Apl一42孵育24h的神經(jīng)細(xì)胞生存率明顯降低夾取海馬放入預(yù)冷的DMEM／FI2一倍液中漂洗2—3次。胰(P<0。05、P<0．01)。凋亡神經(jīng)元胞體明顯縮小，折光性酶消化，將消化后的組織液用2o0目篩網(wǎng)過(guò)濾去除腦膜及纖下降或消失，突起開始回縮，分枝連接出現(xiàn)大面積回縮斷裂，維組織。離心棄上清，加入DMEM／FI2完全培養(yǎng)液制成單細(xì)胞周圍光
5、暈消失，細(xì)胞呈點(diǎn)狀散在分布。隨著AI31—42濃細(xì)胞懸液，接種于24孔板中置37℃、5％的CO：培養(yǎng)箱中培度的增加，神經(jīng)細(xì)胞凋亡率逐漸上升，凋亡神經(jīng)元胞體明顯養(yǎng)，每3天半量換液一次，每7—8天傳代一次，每天連續(xù)觀縮小，折光性下降或消失，突起開始回縮，分枝連接出現(xiàn)大面察細(xì)胞生長(zhǎng)情況及細(xì)胞形態(tài)。并拍照觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況。海積回縮斷裂。細(xì)胞周圍光暈消失，細(xì)胞呈點(diǎn)狀散在分布，1O、馬神經(jīng)元細(xì)胞鑒定。將培養(yǎng)7d的海馬神經(jīng)細(xì)胞分為5組，20t~mol／LA[31—42孵育24h的神經(jīng)細(xì)胞凋亡率明顯升高加入AB1
6、—42，使其終濃度分別為：A組(對(duì)照組)0t~nol／L；(P<0．05、P<0．01)。見表1，圖1—3。B組2ttmol／L；C組5ttmol／L；D組10~mol／L；E組20~aol／L，繼續(xù)培養(yǎng)，制備Apl-42誘導(dǎo)原代海馬神經(jīng)細(xì)胞建立阿爾茨海默病細(xì)胞模型。MTr法測(cè)細(xì)胞存活率，TUNEL法測(cè)定細(xì)胞凋亡率。正常海馬神經(jīng)細(xì)胞作為正常對(duì)照組，lOpmol／LAIM一42致傷海馬神經(jīng)細(xì)胞作為模型組。模型組分為BDNF低、中、高劑量組和空白對(duì)照組，每組分別加入BDNF至5ng／mL、20ng／m
7、L、lOOn~／mL、0n~／mL終濃度。分別以Ng、Nm為一抗，行免疫熒光細(xì)胞化學(xué)染色，激光共聚焦顯微鏡下，采集圖像，測(cè)定神經(jīng)元樹突Ng和軸突Nm的平均熒光強(qiáng)度值。1．3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用SPSS13．0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行單因素方差分析，各組數(shù)據(jù)均以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示，P<0．05表示差異有統(tǒng)圖l大鼠海馬神經(jīng)細(xì)胞原代培養(yǎng)7dNSE鑒定計(jì)學(xué)意義。(免疫細(xì)胞化學(xué)，DAB顯色，×100)·lO·黑龍江醫(yī)藥科學(xué)2013年12月第36卷第6期28(19)：2859—2860[9]AntonE，Marchion
8、niM，IceK，et丑1．RoleofGGF／neuregulinsigns-￡6]VanDamEJ，RuiterB，x∞l8lA，eta1．N—methy一1D—aspaxtate—lingininteractionsbetWeenmigratingneu_vor~andradial_minthein—ducedIonS—tenndepressionisassociatedwithadecreaseindevelopingcerebralc0懈[J]．Development，1
