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《雙酶法酶解制備懷山藥多肽的研究.pdf》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在應(yīng)用文檔-天天文庫。
1、品工素●工藝技術(shù)雙酶法酶解制備懷山藥多肽的研究朱玉端’，李小強，董懷燦’，李敏’，陳茂彬1．焦作市易生元酒業(yè)股份有限公司(焦作454000)：2湖北工業(yè)大學(xué)生物工程學(xué)院，發(fā)酵工程教育部重點實驗室(武漢430068)摘要以懷山藥為原料，選用中性蛋白酶和加鏈霉蛋白酶，研究了雙酶分步酶解和雙酶混合同步酶解制備山藥多肽的效果，對雙酶分步酶解的加酶順序，加酶比例以及在加第二種酶之前是否需要使第一種酶失活進(jìn)行了討論。關(guān)鍵詞懷山藥多肽；雙酶復(fù)合酶解StudyOnPreparationofHuaiChineseYamPeptidesbVCompositeProt
2、easesZhuYu-duan。，LiXiao—Qiang，DongHuai—can‘，LiMin11ChenMao—bin1．JiaoZuoShiYiShengYuanLiquorIndustry．．CoLtd(Jiaozuo454000)；2．KeyLaboratoryofFermentationEngineering(MinistryofEducation)，CollegeofBioengineering，HubeiUniversityofTechnology(Wuhan430068)AbstractTakingHuaiChineseyam
3、，neutralproteaseandpronaseasrawmaterial，thedouble-enzymehydrolyzedinstepsandmixeddouble—enzymehydrolyzedsimultaneouslywerebothstudied．Thesequenceofaddingenzymeintheformer,proportionofenzymesandwhethertodenaturethefirstenzymebeforeaddingthesecondonewerealsodiscussed．KeywordsHH
4、aiChineseyampeptides；double—enzymecompositehydrolysis近年來，多肽在生物體內(nèi)的生理功能受到越來越懷山藥：河南焦作鐵棍山藥；多的重視。大量研究結(jié)果表明，蛋白質(zhì)由于其分子量蛋白酶：加鏈霉蛋白酶40X10U／g、中性蛋白酶大，結(jié)構(gòu)復(fù)雜，攝入人體后不易被消化吸收，從而影120×10U／g，鄭州聚億鑫化工原料有限公司。響了其生理功能和營養(yǎng)價值的有效發(fā)揮?。山藥多肽1．2試劑與儀器是一種新型的比較理想的山藥深加工產(chǎn)品，它是以新1．2．1主要試劑鮮山藥為原料經(jīng)蛋白酶水解而成的蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物，l％酚酞指示劑，l
5、mol／LNaOH標(biāo)準(zhǔn)溶液，甲醛，主要南多種小分子肽組成，另外還含有少量游離氨基中性甲醛，鄰苯二甲酸氫鉀，三氯乙酸。各試劑均為酸成分。山藥多肽的氨基酸組成與山藥蛋白的完全一分析純。樣，并且與山藥蛋白相比它具有更豐富的加工特性、1．2．2主要儀器設(shè)備營養(yǎng)特性和生理活性功能。數(shù)顯恒溫水浴鍋：江蘇省金壇市榮華儀器制造有水解蛋白質(zhì)制備多肽的方法主要包括酸法水解、限公司；磁力加熱攪拌器：江蘇省金壇市榮華儀器制堿法水解和酶法水解，目前酶法生產(chǎn)蛋白多肽的應(yīng)用造有限公司；pH計：Metter—ToledoGroup；高速離心較為普遍，其生產(chǎn)的多肽具有很多優(yōu)點僻]
6、。蛋白酶在機：長沙平凡儀器有限公司；KDN一04型蛋白質(zhì)檢測水解時具有很強的特異性和位點專一性p】，當(dāng)位點全儀：上海纖檢儀器有限公司；攪拌機：BM253C：廣部斷裂以后，即使蛋白酶沒有完全失活，酶解反應(yīng)也東美的精品電器制造有限公司。不會進(jìn)行下去，山藥多肽的得率也難以提高。如果利1_3試驗方法用不同酶的位點專一性，而將兩種或幾種酶結(jié)合起來1．3．1山藥多肽雙酶法水解方案使用，就可以擴大它們的作用范圍，提高酶解效率，通過單酶水解解試驗，篩選出中性蛋白酶、加鏈進(jìn)而提高山藥多肽的得率。霉蛋白酶，作為本試驗用酶。在單酶試驗基礎(chǔ)上，采試驗通過雙酶法對山藥蛋白
7、進(jìn)行酶解，在單酶水用雙酶同步或分步酶解的方法來研究其對山藥多肽解的基礎(chǔ)上，來進(jìn)行雙酶法制備山藥多肽的研究，并得率的影響。根據(jù)單酶試驗條件，確定蛋白酶的最詳細(xì)的分析了雙酶法酶解過程的具體工藝。適酶解條件：加鏈霉蛋白酶酶解溫度40oC，pH5、酶解時問3h、加酶量6％；中性蛋白酶酶解溫度45cC，1材料與方法pH6、酶解時間3h、加酶量3％。1．1材料將新鮮山藥與去離子水以1：5的料液比混合打《食品工業(yè))2012年第33卷第9期+通訊作者。，、●工藝技術(shù)品工素漿，90qC下加熱預(yù)處理20rain，分別同步和分步加人1·4，中性蛋白酶和加鏈霉蛋白酶進(jìn)行
8、酶解，酶解過程中不÷1·21斷用0．1mol／LNaOH調(diào)節(jié)酶解pH不變；反應(yīng)結(jié)束后，o-s置于沸水中滅酶10rain，冷卻，四層紗布過
