一種小鼠心臟取血的改良方法.pdf

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1、泰山醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)JOURNALOFTAISHANMEDICALCOLLEGEVo1．35No．52014411一種小鼠心臟取血的改良方法常歡'王云韓繼舉。張慧’夏作理’高允生。趙曉民(1．泰山醫(yī)學(xué)院藥理學(xué)教研室；2．泰山醫(yī)學(xué)院動(dòng)脈粥樣硬化研究所，山東泰安271000)摘要：目的探索一種小鼠心臟取血的改良方法，并分析影響取血量的因素。方法80只昆明種小鼠，隨機(jī)分為傳統(tǒng)取血組、改良取血組，麻醉后剪開(kāi)胸腔，改良取血組自左室快速注入肝素(200U／kg)后，由右室取血，傳統(tǒng)取血組直接自右室取血。結(jié)果與傳統(tǒng)取血組比較，改良取

2、血組雌雄鼠取血量均顯著增加(均P<0．001)，體重、麻醉誘導(dǎo)時(shí)間、開(kāi)胸時(shí)間、取血時(shí)間無(wú)顯著性差異。在改良取血組，雌雄鼠取血量和其他指標(biāo)均無(wú)顯著性差異；回歸分析表明，取血量與體重、麻醉誘導(dǎo)時(shí)間呈顯著正相關(guān)關(guān)系(分別P<0．O1，P<0．05)。結(jié)論小鼠心臟取血的改良方法可以取得較多血量，體重、麻醉誘導(dǎo)時(shí)間為取血量影響因素。關(guān)鍵詞：小鼠；取血；心臟；體重；麻醉中圖分類號(hào)：R965．2文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：B文章編號(hào)：1004-7115(2014)05—0411-02doi：10．3969／j．issn．1004—7l15．2

3、014．05．028在有關(guān)小鼠血小板黏附、聚集和血液多指標(biāo)研注射器針頭(直徑0．6mm，200U／ml肝素生理鹽水究中常需要較多血液才能完成。小鼠麻醉后開(kāi)胸直潤(rùn)洗)直接由右室進(jìn)針抽血，直至無(wú)明顯血液取出。視心臟下取血，具有容易刺人心臟取血的優(yōu)點(diǎn)，可以傳統(tǒng)取血組：只用注射器(肝素生理鹽水潤(rùn)洗)自右獲取一定量的血液?。但抽血后期針頭容易受血室進(jìn)針抽血。記錄針頭進(jìn)人右室至抽血結(jié)束時(shí)間，凝塊堵塞，從而影響取血量。因而本實(shí)驗(yàn)建立一種為取血時(shí)間。小鼠心臟取血的改良方法(全身血液肝素化)，分析1．3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用SPSS13．

4、0統(tǒng)計(jì)軟件，數(shù)據(jù)影響取血量的因素，以期為從小鼠心臟較多取血提以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，兩組間比較采用t檢驗(yàn)。用供一種參考和依據(jù)。Pearson或Spearman相關(guān)以及多元線性回歸法分析取血量與其他因素之間的關(guān)系。P≤O．05為有統(tǒng)計(jì)l材料和方法學(xué)差異。1．1材料實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：80只SPF級(jí)昆明種小白鼠，2結(jié)果雌雄各半，體重19～28g，購(gòu)于山東泰邦生物制品有限公司。主要設(shè)備和藥品試劑：戊巴比妥鈉(Merck2．1改良取血法對(duì)取血量的影響與傳統(tǒng)取血組公司)，肝素鈉注射液(上海第一生化藥業(yè)有限公比較，改良取血組雄鼠和雌鼠的取

5、血量顯著增加司)；O．9％氯化鈉溶液(山東魯抗辰欣藥業(yè)有限公(均P<0．001)，但體重、麻醉誘導(dǎo)時(shí)間、開(kāi)胸時(shí)間、司)。取血時(shí)間無(wú)顯著性差異。在改良取血組，雌雄鼠取1．2方法小鼠隨機(jī)分為傳統(tǒng)心臟取血組(傳統(tǒng)血量、麻醉誘導(dǎo)時(shí)間、開(kāi)胸時(shí)間和取血時(shí)間均無(wú)顯著取血組)、改良心臟取血組(改良取血組)，n=20(雌性差異。見(jiàn)表1。雄各半)。小鼠腹腔注射戊巴比妥鈉(40mg／kg)麻2．2取血量與體重、麻醉誘導(dǎo)時(shí)間、開(kāi)胸時(shí)間和取醉。記錄腹腔注射藥物至深反射消失時(shí)間，作為麻血時(shí)間關(guān)系將改良取血法中雌雄鼠作為整體，相醉誘導(dǎo)時(shí)間。之

6、后迅速仰位固定小鼠，沿劍突至兩關(guān)分析結(jié)果顯示，取血量與體重、麻醉誘導(dǎo)時(shí)間呈顯側(cè)腋窩下剪開(kāi)胸腔，暴露心臟。記錄自開(kāi)胸起始至著正相關(guān)關(guān)系(分別P<0．001，P<0．O1)，與性別、結(jié)束時(shí)間，作為開(kāi)胸時(shí)間。改良取血組：1ml注射開(kāi)胸時(shí)間、取血時(shí)間無(wú)顯著相關(guān)關(guān)系。見(jiàn)表2。以器針頭(直徑0．4mm)由小鼠左室快速注射200U／取血量為因變量，體重和麻醉誘導(dǎo)時(shí)間為自變量，多ml肝素生理鹽水(10ml／kg)，停3～5S后，2．5ml元回歸分析結(jié)果顯示：體重和麻醉誘導(dǎo)時(shí)間均進(jìn)入基金項(xiàng)目：國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(81173061

7、)，山東省優(yōu)秀中青年科學(xué)家科研獎(jiǎng)勵(lì)基金項(xiàng)目(BS2011YY059)。作者簡(jiǎn)介：常歡，(1987一)，男，山東濟(jì)寧人。碩士研究生，研究方向：心血管藥理學(xué)。通訊作者：趙曉民．E—mail：zhaoxiaominty@163．corn。泰山醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)412JOURNALOFTAISHANMEDICALCOI．I．EGEVo1．35No．52014回歸方程(分別P<0．01，P<0．05)，回歸方程式：Y輕，能保證左室注射對(duì)全身肝素化的效果以及較(取血量)=0．440×體重+0．046×麻醉誘導(dǎo)時(shí)間。多血液回流至右心室

8、。麻醉誘導(dǎo)時(shí)間影響取血量可表1兩種取血方法中體重、麻醉誘導(dǎo)時(shí)間、能與當(dāng)麻醉誘導(dǎo)時(shí)間較長(zhǎng)時(shí)，表明小鼠對(duì)戊巴比妥開(kāi)胸時(shí)間、取血時(shí)間、取血量的比較(n=20)鈉較為耐受，相對(duì)出現(xiàn)心臟抑制、血管擴(kuò)張的作用較輕、較慢，因而全身肝素化效果較好、回心血量較多，從而使取血量相應(yīng)增加。②取血量與開(kāi)胸時(shí)間、抽血時(shí)間無(wú)顯著相關(guān)關(guān)系。開(kāi)胸后，本實(shí)驗(yàn)觀察到心臟會(huì)持續(xù)搏動(dòng)5min左右，由于開(kāi)胸時(shí)間不