資源描述：
《卡那霉素人工抗原的制備及鑒定-論文.pdf》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、中回摩虧通報(bào)2014，30(17)：26-30ChineseAgriculturalScienceBulletin卡那霉素人工抗原的制備及鑒定王愛萍，栗寧，祁艷華，段倩倩，鄭偉，王新洲，裴艷艷，周景明(鄭州大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，鄭州450001)摘要：為了人工制備卡那霉素完全抗原。將卡那霉素標(biāo)準(zhǔn)品與牛血清白蛋白(BsA)或卵清白蛋白(OVA)4~聯(lián)，制備人工抗原。利用兩種不同的偶聯(lián)方法：碳二亞胺法(EDC)和戊二醛法(GDA)，分別制備出KAN．BSA(作為免疫原)，KAN．GDA．OvA(作為包被原)。利用SDS．PAGE凝膠電泳鑒定和動(dòng)物免疫試驗(yàn)等，鑒定了完全
2、抗原偶聯(lián)情況。結(jié)果顯示：制備的卡那霉素完全抗原能刺激小鼠機(jī)體產(chǎn)生相應(yīng)抗體，且抗血清效價(jià)均達(dá)到1：2．56x10‘，其中一號(hào)小鼠的IC。值為22．28ng／mL，說明完全抗原免疫原性良好?？乖苽涑晒?。關(guān)鍵詞：卡那霉素；人工抗原；碳二亞胺法；戊二醛法中圖分類號(hào)：S8文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A論文編號(hào)：2014．3318SynthesisandIdentificationofKanamycinCompleteAntigenandPreparationofPolyclonalAntibodyAgainstKanamycinWangAiping，LiNing，QiYanhua，D
3、uanQianqian，ZhengWei，WangXinzhou，PeiYanyan，ZhouJingming(ZhengzhouUniversity，Zhengzhou450001)Abstract：Thepurposeofthisexperimentwaspreparingkanamycincompletelyartificialantigens．Firstly，kanamycinstandardwasreactedwitllbovineserHmalbumin(BSA)orovalbumin(OVA)topreparekanamycinartificia
4、lantigens．Twodiferentcouplingmethodscarbodiimide(EDC)andglutaraldehyde(GDA)wererespectivelypreparedKAN—BSA(asanimmunogen)andKAN—GDA—OVA(asthecoatingantigen)．BothoftheSDS-PAGEgelelectrophoresisandtheanimalimmunizationexperimentidentifiedtheantigen—’coupledcase．Theresultsshowedthat，th
5、epreparedkanamycincompleteantigencouldstimulatethebodiestoproduceantibodiesinmice，andtheantiserumtiterreached1：2．56×10，TheIC50ofthemicewas22．28ng／mL．Theresultsillustratedtheimmunogenicityofthecompleteantigensweregoodandthepreparationsoftheantigensweresuccessfu1．Keywords：Kanamycin；ar
6、tificialantigen；carbodiimidemethod；glutaraldehydemethod0引言便和價(jià)格便宜等優(yōu)點(diǎn)【3】。但卡那霉素也具有一定的耳卡那霉素(Kanamycin，KAN)屬于半抗原物質(zhì)不能毒性和腎毒性[41，若人類長期使用含有過量卡那霉素刺激機(jī)體產(chǎn)生相應(yīng)抗體，只有與大分子蛋白偶聯(lián)制備超標(biāo)的動(dòng)物源性食品，可能會(huì)引起中毒反應(yīng)?？敲顾赝耆乖?，才具有免疫原性n1?？敲顾貫榱吮ＷC人類健康，日本和歐盟等國家和地區(qū)均在獸藥領(lǐng)域里被用來治療痢疾、肺炎等疾病口?？菍?duì)豬組織中KAN的最大殘留限量(MRLs)進(jìn)行了規(guī)霉素具有水溶性好、抗菌
7、譜廣、細(xì)菌耐藥性低、用藥方定：肌肉為100~g／kg，肝臟為600~tg&g，腎臟為基金項(xiàng)目：國家科技支撐計(jì)劃子課題項(xiàng)目“食品中重要危害物抗體庫的建立及產(chǎn)品研發(fā)”(20111BAK10B01．17)；河南省重點(diǎn)科技攻關(guān)項(xiàng)目“噬菌體展示技術(shù)淘選赭曲霉毒素模擬表位研究”(122102310629)。第一作者筒介：王愛萍，女，1970年出生，河南唐河人，教授，博士，碩士研究生導(dǎo)師，從事分子免疫學(xué)和免疫學(xué)檢測(cè)技術(shù)研究。E·mail：pingaw@zzu．edu．on。通訊作者：周景明，男，1972年出生，河南南陽人，副教授，博士，碩士研究生導(dǎo)師，從事分子免疫學(xué)和免疫學(xué)
8、檢測(cè)技術(shù)研究。通信地址：450001河
