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《低磷脅迫下杉木針葉蛋白的提取與表達(dá)差異分析-論文.pdf》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫(kù)。
1、福建林學(xué)院學(xué)報(bào)2014，34(3)：203—207第34卷第3期JournalofFujianCollegeofForestry2014年7月低磷脅迫下杉木針葉蛋白的提取與表達(dá)差異分析趙中華，劉愛(ài)琴，吳鵬飛，劉鑫鼎，何琳琳(福建農(nóng)林大學(xué)林學(xué)院，福建福州1350002)摘要：采用TCA一丙酮沉淀高速離心法，對(duì)杉木針葉蛋白質(zhì)組雙向電泳技術(shù)中全細(xì)胞蛋白的提取、蛋白的裂解、電泳條件等環(huán)節(jié)進(jìn)行了優(yōu)化改良，獲得了高重復(fù)性、高清晰度的杉木針葉響應(yīng)低磷脅迫的差異蛋白圖譜。在此基礎(chǔ)上對(duì)低磷處理5d的杉木進(jìn)行針葉蛋白提取，并使用ImageMaster2D
2、Platinum7．0軟件分析比較杉木針葉在對(duì)照與低磷處理下的蛋白表達(dá)譜。研究表明，圖譜中有59個(gè)蛋白點(diǎn)存在顯著差異，可能與低磷脅迫有關(guān)，其中，上調(diào)表達(dá)點(diǎn)52個(gè)，下調(diào)表達(dá)點(diǎn)7個(gè)。關(guān)鍵詞：杉木；針葉；蛋白；低磷脅迫；雙向電泳中圖分類號(hào)：Q945．78文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A文章編號(hào)：1001—389X(2014)03—0203—05VarianceanalysisofproteinextractionandexpressionforChinesefirneedlesunderlowphosphorusstressZHAOZhong—hua，LIU
3、Ai—qin，WUPeng—fei，LIUXin—ding，HELin—lin(CollegeofForestry，F(xiàn)ujianAgricultureandForestryUniversity，F(xiàn)uzhou，F(xiàn)ujian350002，China)Abstract：InordertoobtaintheproteinprofilewithhJighrepeatabilityandresolutionundertheconditionofphosphorusdeficiency，thehigh—speedcentrifugationofTC
4、A—acetoneprecipitationandtheoptimizedelectrophoresisincludingtheextractionofwhole—cellproteininChinesefirneedles，theproteincleavageandtheconditionofelectrophoresiswereusedinthisstudy．Theproteinextractionoffirneedlesunder5dayslow—phosphorustreatmentwasconducted，andthecom
5、parisonofproteinprofilebetweencontrolandthetreatmentsamplesweremadebyusingImageMaster2DPlatinum7software．Theresultsshowedthattherewere59proteinpointsoflowphosphorustreatmentsignificantlydifferentfromthecontrolsample，whichincluded52upregulatedand7downregulatedpoints．Keyw
6、ords：Chinesefir；needles；protein；low—phosphorusstress；two—dimensionalelectrophoresis近年來(lái)分子生物學(xué)的迅速發(fā)展，顯示出傳統(tǒng)的生理、生態(tài)方法揭示杉木的抗逆性等信息非常有限，且易受其它因素影響，很難滿足現(xiàn)代杉木研究的需要，因此蛋白質(zhì)雙向電泳技術(shù)應(yīng)運(yùn)而生?。它不但能揭示蛋白質(zhì)方面的差異而排除環(huán)境差異所造成的表型變異，還能拓寬研究材料的選擇，雖然所需經(jīng)費(fèi)較多，但是該方法快速可靠。因此，人們?cè)絹?lái)越關(guān)注蛋白質(zhì)組學(xué)在生命科學(xué)研究的重要性。雙向電泳技術(shù)作為蛋白質(zhì)組學(xué)研究
7、平臺(tái)之一_2J，因其快速高效、簡(jiǎn)單易上手的特點(diǎn)，在相關(guān)研究中得到了廣泛應(yīng)用j，尤其在禾本植物方面的研究日益增多。但是，有關(guān)杉木蛋白質(zhì)組學(xué)的研究相對(duì)較少，這與針葉樹(shù)種的研究起步較晚有關(guān)。杉木(Cunninghamialanceolata)是中國(guó)特有的樹(shù)種，也是中國(guó)南方主要的造林樹(shù)種之一，它在中國(guó)森林資源總量中占有極為重要的地位j。長(zhǎng)期以來(lái)，杉木多代連栽導(dǎo)致人工林產(chǎn)量下降日趨明顯，林地養(yǎng)分虧缺一直是限制杉木人工林產(chǎn)量的重要因素。大量研究表明，磷素匱乏是植物生長(zhǎng)主要制約因子之?一。耐低磷性是廣泛存在于自然界中的一種植物的性質(zhì)，關(guān)于植物的耐低
8、磷性以及它在生態(tài)系統(tǒng)中可以提高植物的抗性，提高植物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收等作用已經(jīng)得到普遍認(rèn)同¨。研究表明，磷脅迫會(huì)導(dǎo)致植物干物質(zhì)累積量下降和植物根系參數(shù)減小，根系特異分泌物種類及數(shù)量發(fā)生變化，營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)在根部積累增多¨。但目前
