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1、沙門氏菌和志賀菌檢測熊長輝腸道感染細菌是通過糞-口傳播途徑進行傳播的一類細菌。主要包括腸桿菌科細菌、霍亂弧菌、副溶血性弧菌、幽門螺桿菌等。腸桿菌科中與醫(yī)學(xué)有關(guān)的包括:埃希菌屬、志賀菌屬、沙門菌屬、變形桿菌屬等。概述腸道感染細菌腸桿菌科共同特性相似的形態(tài)染色簡單的培養(yǎng)條件活潑的生化反應(yīng)G-小桿菌,有鞭毛(痢疾桿菌外)菌毛,某些有莢膜,無芽胞需氧或兼性厭氧,營養(yǎng)要求不高致病菌非致病菌乳糖發(fā)酵實驗陰性陽性SS瓊脂培養(yǎng)基(含膽鹽、乳糖、中性紅等)4、抗原構(gòu)造復(fù)雜鞭毛抗原(H)IgG菌體抗原(O)IgMK或Vi抗原溶原性轉(zhuǎn)換生化反應(yīng)性變異通過耐藥性變異毒力性變異轉(zhuǎn)導(dǎo)接合5、抵抗力:不強6、易變異
2、:通過引起沙門菌檢測美國細菌學(xué)家Salmon與Smith于1885年分離出豬霍亂沙門菌。1990年為紀念Salmon,定名這類細菌為沙門菌屬。沙門菌是腸桿菌科的重要致病菌。包括傷寒、副傷寒甲、乙、丙型,腸炎,鼠傷寒等沙門菌,現(xiàn)今已發(fā)現(xiàn)2324個血清型。在世界各地的食物中毒中,沙門菌食物中毒常占首位或第二位。規(guī)定在藥品和食品中不得檢出沙門菌。美國每年報道病例45000個左右,實際數(shù)量可能多達200-300萬。傷寒每年400-500例。生物學(xué)特性1.形態(tài)兩端鈍圓的革蘭氏陰性桿菌,(0.4-0.9)μm×(1-3)μm,無芽孢,周生鞭毛,一般無莢膜,少數(shù)有包膜。光滑型的細菌大小均勻,粗糙型則
3、大小不一,長短不一。培養(yǎng)和生化反應(yīng)兼性厭氧,最適生長溫度35~37℃,最適生長PH為6.8~7.8.本菌屬對營養(yǎng)的要求不高,在普通營養(yǎng)瓊脂上生長的菌落為圓形、光滑、濕潤,半透明,邊緣整齊的菌落,有時可出現(xiàn)粗糙型的菌落。在腸道選擇性培養(yǎng)基上菌落小至中等,透明或半透明,乳糖不發(fā)酵,與志賀菌的菌落相似,有些能產(chǎn)生硫化氫的菌株,在SS瓊脂上形成中心黑色的菌落??乖瓨?gòu)造菌體抗原(o):不被乙醇、0.1%石炭酸所破壞。與特異性抗血清呈顆粒狀凝集,形成慢,不易搖散?,F(xiàn)已知有50多種,多數(shù)沙門菌含有兩種以上的O抗原,有的O抗原是一種菌獨有的,有的是幾種菌共有的,凡含有共同特異性抗原成分的血清型歸為一個
4、群,可將沙門菌化分為42群,按A-Z排列,Z以后的順序以O(shè)51-O67表示。引起人類沙門菌病的95%以上都在A-F6個群內(nèi)。H抗原:為不穩(wěn)定的蛋白質(zhì)抗原,加熱或用乙醇處理均被破壞。沙門菌H抗原有兩個相,第一相特異性較高稱特異相,用小寫英文字母a、b、c表示,直至z,z以衙用z加阿拉伯?dāng)?shù)字表示,如z1、z2、z3等,第二相抗原為沙門菌共有,稱非特異相,直接用1、2、3表示。同時有第一相和第二相H抗原的細菌稱為雙相菌,僅有一相者稱單相菌。H抗原是定型的依據(jù),其刺激機體產(chǎn)生的抗體以IgG為主,與相應(yīng)的抗血清呈絮狀反應(yīng)。表面抗原:在沙門菌屬中已被證實的表面抗原有Vi抗原、M抗原、5抗原三種Vi
5、抗原:是一種不耐熱的酸性多糖聚合物,加熱60℃30分鐘或經(jīng)石炭酸處理即被破壞,經(jīng)人工培養(yǎng)基傳代后也易失去。新分離的傷寒及副傷寒沙門菌常帶有此抗原。Vi抗原位于菌體的最表層,有抗吞噬及保護細菌免受相應(yīng)抗體和補體的溶菌作用。Vi抗原存在時可阻止O抗原與相應(yīng)抗體發(fā)生凝集,故在沙門血清學(xué)鑒定時應(yīng)加以注意,需事先加熱破壞Vi抗原之后,O抗原才得以與相應(yīng)的O抗血清發(fā)生凝集。帶Vi抗原的沙門菌亦可用Vi噬菌體進行分型,有助于流行病學(xué)調(diào)查和追蹤傳染源。M抗原:粘液抗原,在菌型鑒定上無特殊意義。5抗原:4.抵抗力不強,加熱60℃1h,或65℃15~20min即被殺死。在水中能存活2~3周,在糞便中可存活
6、1~2月。對膽鹽和煌綠等染料有抵抗力。因此可用于制備沙門菌的選擇培養(yǎng)基。5.變異性S-R變異:自臨床標(biāo)本初次分離的菌株一般都是光滑型,經(jīng)人工培養(yǎng),傳代后可逐漸變民粗糙型菌落。此時菌體表面的特異多糖抗原喪失,在生理鹽水中可出現(xiàn)自凝。H-O變異:是指有鞭毛的沙門菌失去鞭毛的變異位相變異:具有雙相H抗原的沙門菌變成只有其中某一相的單相菌,稱位相變異。在沙門菌血清學(xué)分型時,如遇到單相菌,特別是只有第Ⅱ相(非特異相)抗原時,需反復(fù)分離和誘導(dǎo)出第Ⅰ相(特異相)抗原方可作出鑒定。V-W變異:是指沙門菌失去Vi抗原的變異。初次分離得到的具有Vi抗原、O抗原不凝集的沙門菌稱V型菌;Vi抗原部分喪失,與O
7、抗原血清發(fā)生凝集又可與Vi抗血清凝集者稱VW型菌。Vi抗原完全喪失,與O抗原血清發(fā)生凝集又與Vi抗血清不凝集者稱W型菌。V-W變異的過程是V型菌經(jīng)人工培養(yǎng),逐漸喪失部分Vi抗原而成為VW型,進而喪失全部Vi抗原而成為W型菌。二、致病性與免疫性致病物質(zhì):1.侵襲力:菌毛幫助細菌黏附腸粘膜上皮細胞Vi抗原可阻斷相應(yīng)抗體和補體的作用,抵抗吞噬細胞的吞噬作用。內(nèi)毒素:可激活補體系統(tǒng)、吸引白細胞,引起腸道炎癥,吸收入血可引起全身中毒,發(fā)熱、白細胞減少、中