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《SiRNA干擾結(jié)腸癌轉(zhuǎn)移相關(guān)基因1表達對卵巢癌順鉑化療耐藥性的影響-論文.pdf》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、腫瘤2014年1月第34卷第1期TUMORVo1．34，January2014WWW．tumorsci．org7DOI：10．3781~．issn．1000—7431．2014．01．002Copyright~2014byTUMOR基礎研究·BasicResearchSiRNA干擾結(jié)腸癌轉(zhuǎn)移相關(guān)基因1表達對卵巢癌順鉑化療耐藥性的影響李霞，史惠蓉，鄧佑興，張瑞濤鄭州大學第一附屬醫(yī)院婦產(chǎn)科，河南鄭州450052【摘要】目的：利用RNA干擾技術(shù)抑制結(jié)腸癌轉(zhuǎn)移相關(guān)基因1(metastasis—associatedincoloncancer1，MACC1
2、)在順鉑(cisplatin，DDP)耐藥的卵巢癌細胞株SKOV-3／DDP中的表達，并探討其對DDP化療耐藥性的影響。方法：RNA干擾分為3組，空白對照組為未經(jīng)處理的SKov-3／DDP細胞，陰性對照組為空質(zhì)粒轉(zhuǎn)染的SKov．3／DDP—shVector細胞，實驗組為MACC1一shRNA重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染的SKov_3／DDP—shMACC1細胞。反轉(zhuǎn)錄PCR法和蛋白質(zhì)印跡法檢測穩(wěn)定轉(zhuǎn)染后SKov_3／DDP細胞中MACC1mRNA和蛋白的表達情況，MTT法檢測細胞對DDP的耐藥性變化，F(xiàn)CM法檢測細胞凋亡變化。結(jié)果：相比于未轉(zhuǎn)染組SKOv_3／
3、DDP細胞，MACC1一shRNA轉(zhuǎn)染組SKOV-3／DDP—shMACC1細胞中MACC1的mRNA及蛋白水平均明顯下調(diào)『下調(diào)百分率分別為(83．39±1．26)％和(82．25±2．94)％，P<0．05]。DDP對SKov_3／DDP—shMACC1細胞的半數(shù)抑制濃度(halfinhibitoryconcentration，IC。)值與未轉(zhuǎn)染組和空質(zhì)粒轉(zhuǎn)染組細胞的IC。值比較，均明顯降低[(26．09±0．91)gmol／Lvs(47．5O±0．40)gmol／L和(47．O8±0．45)gmol／L，P<0．051。SKOV-3／DDP
4、—shMACC1細胞凋亡率明顯提高[(13．77±0．60)％vs(3．63±0．30)％和(4．23±0．30)％，P<0．05]。結(jié)論：RNA干擾抑制MACC1基因表達能增強卵巢癌耐藥細胞SKo3／DDP對DDP的敏感性?！娟P(guān)鍵詞]卵巢腫瘤；RNA干擾；抗藥性，腫瘤；順鉑；結(jié)腸癌轉(zhuǎn)移相關(guān)基因1【中圖分類號】R737．31【文獻標志碼】A【文章編號】1000—7431(2014)01—0007—06EffectofsiRNAtargetingMACClgeneonchemoresistancetocisplatininovariancance
5、rLlXia。SHIHui—rOng，DENGYou—xing，ZHANGRui—taoDepartmentofGynecologyandObstetrics，F(xiàn)irstAffiIiatedHospitalofZhengzhouUniversity，Zhengzhou45O052，HenanProvince，China【ABSTR0～CT]0bjective：Toknockdowntheexpressionofmetastasis—associatedincoloncancer～1(MACC1)geneindrug—resistantovari
6、ancancercelIIineSKOV3／cisplatin(DDP)byRNAinterferencetechnology．a(chǎn)ndtoinvestigateitseffectonchemoresistancetoDDP．Methods：0variancancerSKOV3／DDPcellswerenottransfected(blankgrouP，namedasSKOV3／DDPcells)，ortransfectedwithemptyplasmid(negativecontrolgrouP，namedasSKOV一3／DDP—shVect
7、orceIls)orcombinantPlasmidcontainingMACC1specificsmaIlhairpinRNA(shRNA)(experimentaIgrouP，namedasSKOV一3／DDP—shMACC1cells)．ThemRNAandProteinexPressionsofMACC1weredetectedbyreversetranscription—PCR(RT—PCR)andWesternblotting，respectively．Thehalfinhibitionconcentration(IC50)ofDD
8、PwasdeterminedbyMTTassay．Theapoptosiswasexaminedbyflowcyometry．Results：Afte
