白藜蘆醇對大鼠腎臟缺血-再灌注損傷保護(hù)作用研究.pdf

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1、安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)ActaUniversitatisMedicinalisAnhui2015Aug;50(8)·1111·◇藥學(xué)研究◇白藜蘆醇對大鼠腎臟缺血-再灌注損傷保護(hù)作用研究121113宋先兵,張寶,黃焱平,安梅,方安寧,陳曉宇摘要目的觀察白藜蘆醇(RES)對大鼠腎臟缺血-再灌存活的患者也會(huì)伴有不同程度的慢性腎功能損注(I/R)保護(hù)作用并初步探討其相關(guān)機(jī)制。方法SD大鼠害[4]。脂質(zhì)過氧化是I/R導(dǎo)致腎臟組織損傷的重隨機(jī)分為4組:空白對照組、I/R模型組、白藜蘆醇(RES)處要機(jī)制,因此尋找積極有效的脂質(zhì)過氧化治療

2、藥物,理組、RES+IR模型組;檢測各組大鼠血清肌酐(Cr)、尿素氮保護(hù)腎臟細(xì)胞免受過度氧化應(yīng)激的損傷,對保護(hù)I/(BUN)及腎臟病理學(xué)改變,使用超氧化物歧化酶(SOD)活[5]R過程產(chǎn)生的腎臟損害具有重要意義。該研究觀力、丙二醛(MDA)和谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)試劑盒察RES治療后腎臟I/R的保護(hù)作用及其可能的分檢測腎臟組織SOD、MDA、GSH-PX產(chǎn)生;Westernblot法檢測子生物學(xué)機(jī)制。腎臟組織p-AKT蛋白水平。結(jié)果與空白對照組相比,I/R模型組Cr、BUN含量均有升高,與I/R模型組相比,

3、RES+I/1材料與方法R模型組Cr、BUN含量均有明顯下降;病理學(xué)檢測顯示RES+I/R模型組腎臟損傷較I/R模型組明顯減輕,腎小球結(jié)構(gòu)1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物健康雄性SD大鼠40只,250~300基本正常,細(xì)胞間質(zhì)有少量炎性細(xì)胞浸潤,基底膜稍有增厚;g,SPF級,購自安徽省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心。與空白對照組相比,I/R模型組SOD、MDA、GSH-PX含量均1.2主要試劑與儀器RES、戊巴比妥鈉(中國醫(yī)有升高,與I/R模型組相比,RES+I/R模型組SOD、GSH-PX藥上?;瘜W(xué)試劑公司);超氧化物歧化酶(superoxide含量均

4、有明顯下降;Westernblot檢測顯示,與空白對照組相dismutase,SOD)活力、丙二醛(malondialdehyde,比,I/R模型組p-AKT表達(dá)水平有所降低,但RES可提高p-MDA)和谷胱甘肽過氧化物酶(glutathioneperoxi-AKT表達(dá)水平,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論RES通過氧化應(yīng)dase,GSH-PX)試劑盒(南京建成生物工程研究所);激保護(hù)I/R腎臟損傷,其作用機(jī)制可能與PI3K/AKT信號通兔抗大鼠p-AKT抗體(美國CST公司)。Universal路活化有關(guān)。320/320R型低

5、溫高速離心機(jī)(德國Hettich公司);關(guān)鍵詞白藜蘆醇;缺血-再灌注;氧化應(yīng)激;AKTμQuant酶標(biāo)儀(美國Bio-Tek公司);AUW220D電中圖分類號R692子分析天平(日本島津公司)。文獻(xiàn)標(biāo)志碼A文章編號1000-1492(2015)08-1111-041.3實(shí)驗(yàn)方法1.3.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組將SD大鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)1白藜蘆醇(resveratol,RES)是植物體內(nèi)一種天周后,隨機(jī)分為空白對照組(10只)、I/R模型組(10然的二苯乙烯類多環(huán)基酚化物質(zhì),化學(xué)名為3,4,5-[1-2]只)、RES預(yù)處理組(10只)、

6、RES+I/R模型組(10三羥基酚,研究表明,RES可對腫瘤、缺血、動(dòng)脈只)。粥樣硬化等多種疾病具有良好的治療作用。其保護(hù)1.3.2大鼠I/R模型制備模型組動(dòng)物以2%戊及治療機(jī)制可能由于RES是一種抗自由基抗氧化[3]巴比妥納(0.25ml/100g)腹腔注射麻醉,腹部正中劑,但其具體的作用機(jī)制尚不清楚。腎臟缺血-切口暴露腹腔,小心分離雙側(cè)腎蒂,以無創(chuàng)動(dòng)脈夾關(guān)再灌注(ischemia-reperfusion,I/R)損傷是臨床上導(dǎo)閉左側(cè)腎動(dòng)脈1h,然后開放動(dòng)脈血流,同時(shí)切除右致缺血性急性腎衰竭的主要原因之一,病死率高,

7、且側(cè)腎臟。開放血流后腎臟由暗紅變?yōu)轷r紅,表明再2015-04-08接收灌注成功,縫合腹腔。并于缺血24h處死動(dòng)物,股基金項(xiàng)目:國家自然科學(xué)基金(編號:81373421)動(dòng)脈取血,留取腎臟標(biāo)本[6-7]。RES治療組于建模作者單位:1安徽醫(yī)學(xué)高等專科學(xué)校人體解剖與組織胚胎教研室,合[8]前1h腹腔注射RES(3mg/kg)進(jìn)行預(yù)處理;空白肥230601對照組不做任何處理;RES預(yù)處理組與RES治療組2安徽醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院臨床營養(yǎng)科,合肥230022處理相同,但不建立I/R模型。于造模24h后麻醉3安徽醫(yī)科大學(xué)組胚教研

8、室,合肥230032處死各組大鼠。作者簡介:宋先兵,男,講師,碩士;陳曉宇,男,博士,教授,責(zé)任作者,E-mail:cxyayd@163.1.4病理學(xué)檢測及評分各組大鼠處死后,取左側(cè)com腎臟組織,將少量組織固定于10%甲醛中,固定48·1112·安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)ActaUniversitatisMedicinalisAnhui2

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