湖北麥冬莖尖離體培養(yǎng)與植株再生研究.pdf

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1、2004年第9期湖北麥冬莖尖離體培養(yǎng)與植株再生研究別運清,丁芹(襄樊職業(yè)技術(shù)學(xué)院生物工程系,湖北襄樊441021)摘要:研究了湖北麥冬莖尖離體組織培養(yǎng)和植株再生過程,結(jié)果表明:湖北麥冬莖尖在MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.2!0.5mg/L的培養(yǎng)基中能完成愈傷組織的誘導(dǎo)、增殖與分化,分化的小苗在1/2MS+NAA0.5mg/L的培養(yǎng)基中生根而完成植株再生過程。盆栽試驗表明,湖北麥冬莖尖組培苗具有很大的增產(chǎn)潛力。關(guān)鍵詞:湖北麥冬;組織培養(yǎng);盆栽試驗中圖分類號:S567.23+2文獻標識碼:A文章編號:1004-3268(2

2、004)09-0053-03ShootTipiwoitroCultureandplantletRegenerationofLirioPesPicataoar.ProliferaBIEYun-ging,DINGgin(DepartmentofBioengineering,XiangfanvocationalandTechnicalCollege,Xiangfan441021,China)Abstract:Studiesontheprocessofshoottipiwoitrocultureandplantletregenerati

3、onofLirioPesPicataoar.ProliferashoWedthattheprocessofinductionpropagationanddifferentiationofcal-lusfromtheshoottipWasobservedontheMSmediumWith2.0mg/L6-BAand0.2!0.5mg/LNAA.Therootingofdifferentiatedshootsandplantletregenerationcouldbefinishedonthe1/2MSmediumWith0.5mg

4、/LNAA.Thepotbio-controltestresultsshoWedthattheshootsoftissueculturehadgreatpotentialityofincreaseinproduction.Keywords:LirioPesPicataoar.Prolifera;Tissueculture;Thepottest湖北麥冬(LirioPesPicata(Thunb)Lour.1材料與方法oar.ProliferaY.T.Ma)主要栽培于漢水流域的襄陽、谷城、老河口等縣市,是《中國藥典》(19951.1

5、試材來源年版)收載的麥冬類藥用植物之一。它以塊根入供試湖北麥冬植株取于“湖北麥冬GAp試驗藥,具有養(yǎng)陰生津、清心潤肺之功效,《神農(nóng)本草基地”(湖北省襄樊市歐廟鎮(zhèn))。經(jīng)》將其列為上品。由于湖北麥冬歷來都是采用1.2莖尖的剝離和誘導(dǎo)培養(yǎng)基的篩選無性分株繁殖,容易導(dǎo)致種性退化和病毒積累。將湖北麥冬植株洗凈,切去根,去掉葉片,只為了解決這一問題,筆者進行了湖北麥冬的莖尖留包裹莖尖的嫩葉,再用自來水沖洗約30min,離體組織培養(yǎng)研究,成功地完成了植株再生過程,在超凈工作臺上先用75%的酒精處理約30s,再并對組培苗和盆栽苗進行了初步的盆栽

6、對比試轉(zhuǎn)入0.1%~gCl溶液處理8!10min,無菌水洗2驗,現(xiàn)報道如下。5!6次,以無菌濾紙吸干表面水分,在解剖鏡下收稿日期:2004-06-02基金項目:湖北省“十五”重大科技攻關(guān)項目(2001ZZ304Z01Z02Z03)作者簡介:別運清(1969-),男,湖北仙桃人,講師,主要從事植物組織培養(yǎng)教學(xué)與研究工作?!?3·河南農(nóng)業(yè)科學(xué)小心剝出莖尖,用利刀切取0.5~0.7mm大小的10盆,每盆栽1株苗,常規(guī)管理。觀察單苗分蘗莖尖(帶2~3個葉原基),迅速接種于下述4種誘數(shù)和塊根數(shù)。導(dǎo)培養(yǎng)基中,①MS+6-BA2.0mg/L+

7、NAA以上培養(yǎng)基均附加3%蔗糖,0.6%~0.7%2.0mg/L;②MS+6-BA2.0mg/L+NAA1.0瓊脂粉,調(diào)節(jié)p~5.8。在1.1kg/cm2壓力下mg/L;③MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.5(121C)滅菌20~25min。mg/L;④MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.22結(jié)果與分析mg/L。每種培養(yǎng)基接種20個莖尖,每瓶1個,共80瓶,平均分為2組:一組一直光照培養(yǎng),光照強2.1不同培養(yǎng)基愈傷組織誘導(dǎo)效果度2000~2500lx,每天12h光照;另一組暗培試驗只進行了6-BA與NAA的不同濃度配養(yǎng)

8、7d后轉(zhuǎn)入光照培養(yǎng)。培養(yǎng)溫度均為25C左合的研究。接種的莖尖在①~④號培養(yǎng)基中培右。觀察各培養(yǎng)基愈傷組織誘導(dǎo)和分化情況。養(yǎng),20d后均可形成愈傷組織。愈傷組織的誘導(dǎo)1.3愈傷組織的增殖與分化與分化情況見表1。從中可以看出,在①、②號培將在上述培養(yǎng)基上生長良好的愈

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