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《《診斷學》 第五節(jié) 纖溶活性檢測》由會員上傳分享,免費在線閱讀,更多相關內容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、第五節(jié)纖溶活性檢測纖維蛋白溶酶(纖溶酶)可將已形成的血凝塊加以溶解,產生纖維蛋白(原)的降解產物,從而反映纖溶活性。纖溶活性增強可致出血,纖溶活性減低可致血栓。一、篩檢試驗(一)優(yōu)球蛋白溶解時間【原理】血漿優(yōu)球蛋白(euglobulin)組分中含有纖維蛋白原(Fg)、纖溶酶原(PLG)和組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)等,但不含纖溶酶抑制物(plasmininhibitor)。受檢血漿置于醋酸溶液中,使優(yōu)球蛋白沉淀,經離心除去纖溶抑制物,將沉淀的優(yōu)球蛋白溶于緩沖液中,再加入適量鈣溶液(加鈣法)或凝血酶(加酶
2、法),使Fg轉變?yōu)槔w維蛋白凝塊,觀察凝塊完全溶解所需時間。【參考值】加鈣法:(129.8±41.1)min;加酶法:(157.0±59.1)min。一般認為<70rain為異常。【臨床意義】本試驗敏感性低,特異性高。1.纖維蛋白凝塊在70min內完全溶解表明纖溶活性增強,見于原發(fā)性和繼發(fā)性纖溶亢進,后者常見手術、應激狀態(tài)、創(chuàng)傷、休克、變態(tài)反應、前置胎盤、胎盤早期剝離、羊1水栓塞、惡性腫瘤廣泛轉移、急性白血病、晚期肝硬化、DIC和應用溶血栓藥(rt-PA、UK)。2.纖維蛋白凝塊在超過120min還不溶解表明
3、纖溶活性減低,見于血栓前狀態(tài)、栓性疾病和應用抗纖溶藥等。(二)D-二聚體定性試驗【原理】D-二聚體(D-dirner,D-D)是交聯(lián)纖維蛋白降解產物之一,為繼發(fā)性纖溶特有的代謝物??笵-D單克隆抗體包被于膠乳顆粒上,受體血漿中如果存在D-二聚體,將產生抗原-抗體反應,膠乳顆粒發(fā)生聚集現(xiàn)象?!緟⒖贾怠磕z乳顆粒比陰性對照明顯粗大者為陽性,正常人為陰性?!九R床意義】D-D陰性是排除深靜脈血栓(DVT)和肺血栓栓塞(PE)的重要試驗,陽性也是診斷DIC和觀察溶血栓治療的有用試驗。凡有血塊形成的出血,本試驗均可陽性,
4、故其特異性低,敏感度高;但在陳舊性血塊時,本試驗又呈陰性。(三)血漿纖維蛋白(原)降解產物定性試驗【原理】于受檢血漿中加入血漿纖維蛋白(原)降解產物[fibrin(agen)degradationproduct,F(xiàn)DPs]抗體包被的膠乳顆粒懸液,若血液中FDPs濃度超過或等于5μg/ml,膠乳顆粒發(fā)生凝集。2根據(jù)受檢血漿的稀釋度可以計算出血漿FDPs含量?!緟⒖贾怠磕z乳凝集法:陰性?!九R床意義】FDPs陽性或增高見于原發(fā)性纖溶(primaryfibrinolysis)和繼發(fā)性纖溶(sencondaryfib
5、rinolysis),后者如DIC、惡性腫瘤、急性早幼粒細胞白血病、肺血栓栓塞、深靜脈血栓形成、腎臟疾病、肝臟疾病、器官移植的排斥反應、溶血栓治療等。二、診斷試驗(一)血漿組織型纖溶酶原激活劑測定【原理】血漿優(yōu)球蛋白含有吸附于纖維蛋白上的組織型纖溶酶原激活劑(tissue-typeplasminogenactiVator,t-PA),它使PLG轉變?yōu)槔w溶酶(PL),PL可使發(fā)色底物(S-2251)釋出對硝基苯胺(PNA)而顯色,顯色的深淺與受檢血漿中t-PA含量呈正相關。所測得的A值,可從標準曲線計算受檢血
6、漿中t-PA:A含量?!緟⒖贾怠堪l(fā)色底物法:0.3~0.6活化單位/ml.【臨床意義】1.增高表明纖溶活性亢進,見于原發(fā)性纖溶和繼發(fā)性纖溶(如DIC)等。32.減低表明纖溶活性減弱,見于血栓前狀態(tài)和血栓性疾病,如動脈血栓形成、深靜脈血栓形成、高脂血癥、口服避孕藥、缺血性腦卒中和糖尿病等。(二)血漿纖溶酶原活性測定【原理】受檢血漿中加鏈激酶(SK)和發(fā)色底物(S-2251),受檢血漿中的血漿纖溶酶原活性(plasminogen,PLG)在SK的作用下,轉變成纖溶酶(PL),后者作用于發(fā)色底物,釋出對硝基苯胺(
7、PNA)而顯色。顯色的深淺與纖溶酶的水平呈正相關,通過計算求得血漿中PLG:A的含量?!緟⒖贾怠堪l(fā)色底物法:75%~140%?!九R床意義】1.PLG:A增高表示纖溶活性減低,見于血栓前狀態(tài)和血栓性疾病。2.PLG:A減低表示纖溶活性增高,見于原發(fā)性纖溶、繼發(fā)性纖溶和先天性PLG缺乏癥。(三)血漿纖溶酶原激活抑制物-1活性測定【原理】受檢血漿中加入纖溶酶原激活劑(PA)和PLG,血漿中的PAI-1與PA形成復合物,剩余的PA使PLG轉變成PL,PL作用于發(fā)色底物,釋出PNA而顯色,其顏色的深淺與PL的活性呈4
8、正相關;而血漿中PL與纖溶酶原激活抑制物-1活性(plasmino-genactiVatorinhibitor-l,PAI-1)呈負相關,從所測得的A值,可計算出血漿中PAI-1:A的水平?!緟⒖贾怠堪l(fā)色底物法:0.1~1.0抑制單位/ml?!九R床意義】1.PAI-1增高表示纖溶活性減低,見于血栓前狀態(tài)和血栓性疾病。2.PAI-1減低表示纖溶活性增高,見于原發(fā)性和繼發(fā)性纖溶。(四)血漿硫酸魚精蛋白副凝固試驗(pl