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1、第21卷第4期病毒學(xué)報(bào)Vol.21No.42005年7月CHINESEJOURNALOFVIROLOGYJuly2005宮頸癌患者人乳頭瘤病毒（HPV）主要型別及其感染研究吳玉萍1，陳裕隆1，李隆玉2，梁增文1，張雁玲2（1.中山大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，廣州510275；2.江西省婦幼保健院，南昌330046）摘要：本文探討了江西省和廣東省宮頸癌患者人乳頭瘤病毒（HumanpapillomaVirus，HPV）感染及其型別分布，分析了高危型HPV對(duì)各種宮頸病變的感染情況，為宮頸癌的早期發(fā)現(xiàn)和臨床診治提供科學(xué)依據(jù)。首先采用細(xì)胞學(xué)、HP
2、VDNA檢測(cè)（第二代雜交捕獲法，HC2）、電子陰道鏡和宮頸化學(xué)著色方法篩查宮頸癌患者，經(jīng)病理鏡檢確診，然后用GPPCR-SBT法對(duì)宮頸癌患者進(jìn)行HPV基因分型。江西省溪口鎮(zhèn)、古市鎮(zhèn)及修水縣城宮頸癌癌前病變發(fā)生率為5.7%。HC2方法發(fā)現(xiàn)宮頸癌患者13種高危型HPVDNA陽(yáng)性率為89.9%，宮頸上皮內(nèi)瘤樣病變的為84.8%，對(duì)照組為24.5%。采用GPPCR-SBT方法進(jìn)行基因分型發(fā)現(xiàn)，江西省宮頸癌患者存在HPV16、58、31、33、18、66、6、11、56和81十種型別，其中HPV81型在國(guó)內(nèi)外鮮有報(bào)道。據(jù)此提出生殖道高危
3、型HPV感染是婦女宮頸癌發(fā)病的重要因素，并發(fā)現(xiàn)江西省宮頸癌高發(fā)區(qū)婦女高危型HPV感染率為24.5%。建立了HPV基因分型的方法，對(duì)HPV致宮頸病變的分子機(jī)制進(jìn)行了分析。關(guān)鍵詞：宮頸癌；人乳頭瘤病毒（HPV）；第二代雜交捕獲法；GPPCR-SBT；基因分型中圖分類(lèi)號(hào)：R373.9文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A文章編號(hào)：1000-8721（2005）04-0269-05近年我國(guó)宮頸癌（CerVicalcancer）病人數(shù)目在發(fā)現(xiàn)和早期診斷具有重要價(jià)值。逐漸上升并呈年輕化的趨勢(shì)。對(duì)宮頸癌的病因?qū)W研究可知，人乳頭瘤病毒（HumanpapillomaV
4、irus，材料與方法HPV）是宮頸癌發(fā)生的重要因素。因此研究宮頸癌高發(fā)區(qū)江西省婦女目前生殖道HPV的感染現(xiàn)狀，1研究對(duì)象宮頸脫落細(xì)胞取自江西省婦幼保健院和中山大學(xué)第五附屬醫(yī)院。江西省宮頸脫落細(xì)胞標(biāo)本分類(lèi)情況：宮探索宮頸癌患者感染的主要HPV型別及其主要影頸癌643例，宮頸上皮內(nèi)瘤樣病變（CIN）92例，慢性宮頸炎響因素，為未來(lái)HPV疫苗的研制開(kāi)發(fā)提供依據(jù)，是31例，尖銳濕疣4例，卵巢癌2例，外陰陰道癌7例，子宮內(nèi)宮頸癌防治工作的當(dāng)務(wù)之急。目前世界上已發(fā)現(xiàn)的膜癌21例，合計(jì)800例。江西省另外2460例婦女參加了宮HPV有100
5、余種，共有27種可從宮頸癌組織中發(fā)頸癌篩查。廣東省宮頸脫落細(xì)胞標(biāo)本分類(lèi)情況：宮頸癌10現(xiàn)［1］。在宮頸上皮內(nèi)高度病變（CIN2／3）和宮頸癌例，CIN5例，慢性宮頸炎675例，正常宮頸組織均為隨機(jī)取組織中，90%以上亞型為HPV16、18、31、33、35、自同期手術(shù)經(jīng)鏡檢證實(shí)無(wú)宮頸病變者，1080例，合計(jì)177039、45、51、56、58、59和68型［2］。研究資料表明，例。宮頸癌外周血50例，石蠟包埋宮頸癌組織45例。［3，4］。LeVi等［5］2標(biāo)本采集2000年1月至2005年1月，研究對(duì)象用采樣99.7%宮頸癌患
6、者存在HPV感染刷收集標(biāo)本，收集宮頸脫落細(xì)胞。采樣刷放在樣品輸送介質(zhì)還發(fā)現(xiàn)，高達(dá)64.3%的宮頸癌患者同時(shí)感染有高危（STM）液體里室溫保存，應(yīng)用第二代雜交捕獲法（HC2）檢測(cè)型和低危型HPV，增加了宮頸癌的治療難度。本研高危型HPV的DNA。同時(shí)取宮頸脫落細(xì)胞放于生理鹽水究采用GPPCR-SBT（GeneralprimerPCRseCuence-中，置-20C保存，應(yīng)用GPPCR-SBT方法對(duì)HPV進(jìn)行基因basedtyping）和第二代雜交捕獲法（1ybridcapture分型。2，HC2）分析宮頸癌和癌前病變患者高危型H
7、PV3HPVDNA分析采用HC2（美國(guó)Digene公司）檢測(cè)HPV感染狀況，為臨床防治宮頸癌提供科學(xué)依據(jù)。同時(shí)DNA，它是一種高效的核酸雜交微量反應(yīng)檢測(cè)法，應(yīng)用信號(hào)將HPV基因分型研究用于分子流行病學(xué)和高危型擴(kuò)大技術(shù)捕獲HPVDNA并產(chǎn)生化學(xué)熒光?；旌咸结樋梢詸z測(cè)到13種高危型別HPV，包括16、18、31、33、35、39、45、致癌HPV感染婦女的追蹤觀察，對(duì)宮頸癌的早期51、52、56、58、59和68型。標(biāo)本HPV-DNA!1.0pg／ml判為收稿日期：2004-11-4；修回日期：2005-02-26陽(yáng)性?；痦?xiàng)目：
8、國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目（30160090）資助4HPV基因分型模板DNA制備采用酚-氯仿-異戊醇法。第一作者簡(jiǎn)介：吳玉萍（1963-）：女，博士，副教授，主要研究遺傳學(xué)。宮頸脫落細(xì)胞收集后用PBS洗滌，取沉淀細(xì)胞提取DNA。通訊作者：吳玉萍，E-mail：exwyp!163.c
