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《印4圳萬燎杏件j眼豐驚痛價(jià)圳! 的力川》由會員上傳分享,免費(fèi)在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、國際眼科縱覽2006年2月第30卷第I期IntRevOphthalmol,February2006,Vol30,No.I·綜述·印4亦匆晌燎杏件六眼豐驚痛價(jià)中的命田日J(rèn)衛(wèi)塵圳萬}}-了六j土目民}M大夕內(nèi)侈圳!甲rl}力竺川李學(xué)民王薇[摘要」印跡細(xì)胞法是近年來在臨床上應(yīng)用的一種簡單、微創(chuàng)的眼表取材技術(shù),該技術(shù)通過特殊的方式獲取眼球表面的細(xì)胞樣本,進(jìn)行各種病理染色,幫助診斷眼表疾病。該技術(shù)不但可以對結(jié)膜鱗狀上皮化生進(jìn)行分期,而且可以對眼表復(fù)層鱗狀__匕皮新生物、干眼癥、角鞏膜緣干細(xì)胞缺乏、眼表病毒感染、維生素A缺乏癥、眼表過敏
2、性炎癥、結(jié)膜色素痣和結(jié)膜惡性黑色素瘤等眼表疾病進(jìn)行輔助診斷。本文對印跡細(xì)胞法的技術(shù)特點(diǎn)及其在眼科中的應(yīng)用進(jìn)行綜述?!娟P(guān)鍵詞】眼表疾病/診斷;印跡細(xì)胞法印跡細(xì)胞法是臨床上一種簡單、微創(chuàng)的眼表取眼球表面取樣。并且這種生物膜在潮濕的情況下是材技術(shù),該技術(shù)通過特殊的方式獲取眼球表面的細(xì)透明的,更利于進(jìn)行細(xì)胞學(xué)檢查。胞樣本,進(jìn)行各種病理染色,幫助診斷眼表疾病。該二、印跡細(xì)胞檢查法的技術(shù)技術(shù)的早期,主要用于眼表復(fù)層鱗狀上皮新生物和(1)材料的選擇:印跡細(xì)胞是一種取樣的方法,干眼癥的診斷[t,2?。目前印跡細(xì)胞除可以對結(jié)膜鱗所使用的材料可
3、以選擇目前國際上廣泛使用的生物狀上皮化生進(jìn)行分期,用于幫助診斷眼表復(fù)層鱗狀膜和各種特殊處理的濾紙。(2)取樣準(zhǔn)備:在進(jìn)行印上皮新生物和干眼癥以外,還可以對角鞏膜緣干細(xì)跡細(xì)胞檢查之前,取樣用的生物膜和各種特殊處理胞缺乏、眼表病毒感染、維生素A缺乏癥、眼表過敏的濾紙都需要經(jīng)過無菌處理。麻醉:取樣前用普魯性炎癥、結(jié)膜色素痣和結(jié)膜惡性黑色素瘤等眼表疾卡因、丁卡因或利多卡因等麻醉劑對患眼進(jìn)行表面病進(jìn)行輔助診斷,并可以對局部使用藥物如絲裂霉麻醉。(3)取樣方法:將取樣用的生物膜或各種特殊素C(mitomycinC,MMC)引發(fā)的眼表新生
4、物進(jìn)行隨處理的濾紙的豁附面緊緊貼附于取樣處的眼球表訪觀察。面,直到生物膜變?yōu)榘胪该骰驗(yàn)V紙變得潮濕為止。一、印跡細(xì)胞檢查法的發(fā)展這一過程大約需要10-20秒。(4)標(biāo)本的保存和處早在1954年法國人Larmande和Timsitl'j就首理:取下的潮濕的生物膜或?yàn)V紙需即刻放入95%酒次使用印跡細(xì)胞法對眼表復(fù)層鱗狀上皮新生物進(jìn)行精中固定,勿將生物膜自然風(fēng)干。固定后將標(biāo)本送診斷。1977年Egbert等[2丁首次使用醋酸纖維濾紙到實(shí)驗(yàn)室,進(jìn)行各種處理及染色。也可以采取其他對干眼癥患者取樣進(jìn)行印跡細(xì)胞法檢查,自然風(fēng)干特殊的處理方法,
5、如將濾紙的取樣一面緊壓在鍍膠后行PAS染色,了解患者結(jié)膜杯狀細(xì)胞的密度。這的載玻片上[sl或?qū)V紙的取樣一面緊壓在普通的載種取樣方法患者一般沒有痛苦,甚至可以不用麻醉。玻片上,再將二者一起放人甲醇、乙醇或丙酮中浸泡醋酸纖維濾紙取樣一般可以得到角膜和結(jié)膜表面的處理[[6]。然后再對處理過的載玻片進(jìn)行各種染色。1一3層細(xì)胞131。(5)染色方法:所取的樣本可以進(jìn)行H-E,PAS、免疫1992年以前,大多數(shù)印跡細(xì)胞檢查都是使用各組化和免疫熒光等各種染色。對干眼癥患者進(jìn)行杯種特殊處理的醋酸纖維濾紙,使用各種容器送到實(shí)狀細(xì)胞檢查的最佳
6、方式是PAS染色。(6)觀察方驗(yàn)室進(jìn)行病理染色。隨著印跡細(xì)胞檢查法的發(fā)展,法:染色后用顯微鏡觀察,對于使用不透明濾紙取得人們對此方法進(jìn)行了許多改良。如Simon等〔‘〕采用的樣本,可以通過顯微鏡直接觀察或?qū)颖具M(jìn)行特一種新型生物膜代替醋酸纖維濾紙收集眼表細(xì)胞進(jìn)殊處理后再進(jìn)行觀察。行眼表疾病的診斷。這種新型生物膜是由生物膜和三、印跡細(xì)胞檢查法的新進(jìn)展圓筒型支架組成,性能穩(wěn)定,豁附力強(qiáng),可以直接在目前印跡細(xì)胞檢查法采用很多新技術(shù),如免疫組化染色對采集的標(biāo)本進(jìn)行檢查,如對各種抗原的作者單位:100083北京大學(xué)眼科中心北京大學(xué)第三
7、醫(yī)院眼科檢查,包括病毒抗原和凋亡的檢查。同時(shí),印跡細(xì)胞國際眼科縱覽2006年2月第30卷第1期IntRevOphthalmol,February2006,Vol30,No.1還被應(yīng)用于流式細(xì)胞學(xué)、免疫熒光學(xué)等多種檢查。膜上皮細(xì)胞較大,單個(gè)或成簇存在。(1)共聚焦顯微鏡:Pisella等[[71在球結(jié)膜印跡細(xì)胞取當(dāng)OSSN侵犯眼表上皮細(xì)胞時(shí),印跡細(xì)胞檢查材的玻片上使用免疫熒光標(biāo)記的抗體標(biāo)記結(jié)膜的豁表現(xiàn)為細(xì)胞核增大、深染、形狀不規(guī)則,有大量破碎蛋白,通過共聚焦顯微鏡觀察發(fā)現(xiàn)豁蛋白存在于杯的染色質(zhì)。在發(fā)生光損傷時(shí),結(jié)膜和角鞏膜緣上
8、皮狀細(xì)胞的微小囊泡中。(2)流式細(xì)胞學(xué):Baudouin的印跡細(xì)胞檢查同樣會發(fā)現(xiàn)鱗狀上皮化生和眼表細(xì)等[181通過印跡細(xì)胞檢查法取得眼表細(xì)胞,再進(jìn)行轉(zhuǎn)胞損傷的改變。OSSN發(fā)生上皮角化的概率遠(yuǎn)遠(yuǎn)高膜、離心,進(jìn)一步進(jìn)行流式細(xì)胞學(xué)檢查,研究眼表的于子宮頸等處,因此在眼表發(fā)生鱗狀上皮細(xì)胞癌的三種