不同激素對蝴蝶蘭原球莖誘導(dǎo)與增殖的影響.pdf

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1、中國園藝文摘2014年第7期不同激素對蝴蝶蘭原球莖誘導(dǎo)與增殖的影響楊艷梅,李國樹。范樹國,徐成東(1.楚雄師范學(xué)院化學(xué)與生命科學(xué)系,云南楚雄6750002.滇中高原生物資源開發(fā)與利用研究所,云南楚雄675000)摘要:以生長健壯的蝴蝶蘭無茵苗幼葉為外植體,采用正交設(shè)計試驗研究不同激素配比(6-BA、NAA)、培養(yǎng)基蔗糖含量和原球莖大小對蝴蝶蘭愈傷誘導(dǎo)和增殖的影響。結(jié)果表明:適量的6-BA、NAA有利于蝴蝶蘭原球莖誘導(dǎo);培養(yǎng)基中蔗糖含量高及暗處理促進(jìn)愈傷生長與增殖;接種原球莖大小影響蝴蝶蘭繼代增殖;在添加6-BA4.0mg/L+NAA0.5mg

2、/L+蔗糖20g/L+15%椰乳的培養(yǎng)基中蝴蝶蘭原球莖誘導(dǎo)效果最好,誘導(dǎo)率達(dá)4O%。在添加6-BA5.0mg/L+NAA0.2mg/L+15%椰乳的培養(yǎng)基中蝴蝶蘭原球莖增殖最好,增殖系數(shù)達(dá)5.5;原球莖直徑大小在1.0士0.05cm左右對蝴蝶蘭繼代增殖效果較好,可為蝴蝶蘭原球莖誘導(dǎo)與增殖研究提供參考依據(jù)。關(guān)鍵詞:蝴蝶蘭;原球莖;誘導(dǎo);增殖;激素;無茵幼葉蝴蝶蘭(Phalaenopsisamabilis)是蘭科(Orchidaceae)1材料與方法多年生常綠草本,原產(chǎn)于熱帶、亞熱帶地區(qū)。目前主要分1.1材料布在中國、泰國、菲律馬來西亞、印度尼西

3、亞等地,蝴蝶蘭無菌苗幼葉(品種為:Dtps.CoralGleamXP.其株型美觀、姿態(tài)高雅,花大如蝶、形態(tài)美妙,花色艷麗、zumaRose-SamsonDXf001(1296)即:V31巨寶紅玫瑰,色澤豐富,觀賞期長,1朵花可開放4~6個月,享有“洋由楚雄師范學(xué)院李國樹老師提供)。蘭皇后”的美譽(yù)川。既是著名的切花種類,也可用于家庭1.2方法擺設(shè),還可制作花籃、花束、胸花、捧花等,因而深受世1.2.1原球莖誘導(dǎo)(1)原球莖誘導(dǎo)培養(yǎng)基的配制:以界各國人民的喜愛,消費(fèi)量不斷增加。1/2MS為基本培養(yǎng)基,添加瓊脂10g/L、椰乳15%,采國外對蝴蝶蘭

4、的組織快繁研究較早,1949年前后,以用正交試驗設(shè)計添加不同濃度的激素及蔗糖,pH值5.8,花梗休眠芽在無菌條件下發(fā)育成完整的植株為主要繁殖每組10瓶,高壓蒸汽滅菌后備用。培養(yǎng)基設(shè)計情況見表方式,但因限于外植體數(shù)量繁殖系數(shù)難以提高,1974年1。(2)取材及接種:取蝴蝶蘭無菌苗幼嫩葉片將其切成Intuwong等利用蝴蝶蘭莖尖誘導(dǎo)出原球莖狀體后分化成植0.5cmx0.5cm左右的小塊,順著其生長方向?qū)⑵浣臃N株,1975年日本學(xué)者田中以蘭花實(shí)生苗葉片為外植體誘導(dǎo)于培養(yǎng)基中。每瓶接種3塊,葉片背面向上。(3)培養(yǎng)條出原球莖形成再生苗I1992年Kn

5、udson首次使蘭花種子在件:溫度25±2℃l連續(xù)光照時間:12h/d,光照強(qiáng)度為無菌條件下發(fā)芽并良好生長】。20世紀(jì)80年代,國內(nèi)開始2500b【lRH:60%~80%。以蝴蝶蘭的莖尖、花梗、葉片、根尖等外植體進(jìn)行組培快繁[3-51,但快繁過程中還存在一些缺陷。表1蝴蝶蘭原球莖誘導(dǎo)正交試驗設(shè)計方案目前,蝴蝶蘭快繁途徑主要有:一是通過無菌播種蝴蝶蘭種子,人工培養(yǎng)后在短時間內(nèi)獲得大量幼苗,這是現(xiàn)階段經(jīng)濟(jì)有效的快速繁殖方法和工廠化育苗的重要途徑·種子萌發(fā)成原球莖(Proto-CO1T11likebody,簡稱:PLB)后可產(chǎn)生叢生苗,但以種子為外

6、植體獲得的組培苗會發(fā)生性狀分離,且材料來源受限制,不適合商業(yè)化生產(chǎn)。二是利用各種外植體誘導(dǎo)類原球莖,進(jìn)而誘導(dǎo)分生苗實(shí)現(xiàn)快繁【4.,不經(jīng)愈傷組織直接誘導(dǎo)叢生芽。近年來也有通過誘導(dǎo)愈傷組織途徑進(jìn)行植株再生的研究u”,但應(yīng)用正交試驗設(shè)計不同濃度的激素、蔗糖、瓊脂組合對蝴蝶蘭原球莖誘導(dǎo)與增殖研究尚未見報道,希望通過此研究為蝴蝶蘭原球莖再生提供參考依據(jù)。1.2.2原球莖增殖(1)材料:誘導(dǎo)出的原球莖。(2)不同濃度的蔗糖、激素組合對蝴蝶蘭原球莖增殖的影響研究:第一作者簡介:楊艷梅(1992一),女,本科生;就讀于楚雄師范采用正交試驗方法配制培養(yǎng)基,將誘

7、導(dǎo)出來的原球莖切成學(xué)院化學(xué)與生命科學(xué)系生物技術(shù)專業(yè)。大小一致的小塊,接種于以1/2MS培養(yǎng)基為基礎(chǔ)的培養(yǎng)通訊作者:李國樹,高級實(shí)驗師。E-mail:hsxlgs@cxtc.edu.cn基,添加瓊脂10g/L、椰乳15%。每組5瓶,每瓶按種原項目來源:云南省大學(xué)生創(chuàng)新性實(shí)驗項目(資金31260095);云球莖3個。接種后培養(yǎng)于光照強(qiáng)度2500lX、連續(xù)光照時南省植物學(xué)重點(diǎn)學(xué)科項目資助。-29-CHINESEH0RTICULTUREABSTRACTS間12h/d、溫度25士2℃的組培室內(nèi)。接種后每隔1d觀從表3可見,培養(yǎng)基:1/2MS+6-BA4

8、.0mg/L+察1次,30d后統(tǒng)計結(jié)果,統(tǒng)計蝴蝶蘭原球莖增殖系數(shù)指NAA0.5mg/L+蔗糖20g/L誘導(dǎo)原球莖效果最好,誘標(biāo),蝴蝶蘭原球莖增殖培養(yǎng)方案見表2。(3

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