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《RNAi cyclin E對(duì)肝癌細(xì)胞生長(zhǎng)的影響-論文.pdf》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在應(yīng)用文檔-天天文庫(kù)。
1、河南醫(yī)學(xué)研究2014年5月第23卷第5期HENANMEDIcALRESEARCHMay2014．Vo1．23。No．5[9]FongCW，ChuaMS，MckieAB，eta1．Sprouty2，aninhibitorofmi-細(xì)胞癌中的表達(dá)及意義[J]．中華實(shí)驗(yàn)外科雜志，2013，30togen·activatedproteinkinasesignalingisdown—regulatedinhepato-(6)：1314．celluarcareinoma[J]．CancerRes，2006，66(4)：2048-205
2、8．[12]BerraE，BenizriE，GinouvesA，eta1．HIFprolyl-hydroxylase2isthe[1O]LeeCC，PutnamAJ，MirantiCK，eta1．Overexpressionofsprout2keyoxygensensorsettinglowsteady-·statelevelsofHIF-·lalphainnor-inhibitsHGF／SF—mediatedcellgrowth，invasion，migration，andcyto-moxia[J]．EmboJ，2003
3、，22(16)：40824090．kinesis[J]．Oncogene，2004，23(30)：5193-5202．(收稿日期：2014-01-29)范正軍，孫濤，彭飛，等．SIAH2與細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶I／2在肝RNAicyclinE對(duì)肝癌細(xì)胞生長(zhǎng)的影響賈海全(安陽(yáng)市腫瘤醫(yī)院胸一科河南安陽(yáng)455000)摘要：目的：探討RNAicyclinE對(duì)肝癌細(xì)胞生長(zhǎng)的影響。方法：肝癌細(xì)胞系HepG2采用體外培養(yǎng)，選取siRNA合成雙鏈發(fā)卡樣DNA；將其重組入pGFP-V-RS得到重組子pGFP．V．RS．siCE951和pGFP．
4、V．RS．siCEl122；兩重組子分別進(jìn)行DNA序列測(cè)定、同源性比較；將兩重組子和pGFP—V-Con分別轉(zhuǎn)入人肝癌HepG2細(xì)胞中，同時(shí)設(shè)空白對(duì)照組(不轉(zhuǎn)染任何質(zhì)粒，僅加轉(zhuǎn)染試劑)。檢測(cè)4組HepG2細(xì)胞cyclinEmRNA表達(dá)情況及細(xì)胞的增殖情況。結(jié)果i經(jīng)過(guò)同源性檢索和優(yōu)選確定cyclinE基因的siRNA載體pGFP．V．RS．siCE951和pGFP-V·RS·siCE1122；干擾1組(轉(zhuǎn)染pGFP-V-RS-siCE951)和干擾2組(轉(zhuǎn)染pGFP—V-RS-siCE1122)細(xì)胞cyclinEmRNA的相
5、對(duì)表達(dá)量顯著低于空白對(duì)照組和無(wú)關(guān)siRNA對(duì)照組(P<0．05)；干擾1組和干擾2組與空白對(duì)照組和無(wú)關(guān)siRNA對(duì)照組比較，在3、4、5d細(xì)胞孔內(nèi)的吸光度值顯著減少，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0．05)。結(jié)論：siRNA載體pGFP—V-RS·siCE951和pGFP—V-Rs—siCE1122轉(zhuǎn)染人肝癌HepG2細(xì)胞能顯著降低細(xì)胞cyclinE基因的表達(dá)，是理想的siRNA靶區(qū)段。抑制肝癌HepG2細(xì)胞cyclinE基因表達(dá)，可以降低肝癌HepG2細(xì)胞的生長(zhǎng)速度。關(guān)鍵詞：周期蛋白E；HepG2；肝癌；增殖中圖分類號(hào)：R365
6、doi：10．3969／j．issn．1004-437X2014．05．004TheefectofRNAicyclinEongrowthoflivercancercellJIAHaiquan(DepartmentofThoracicSurgery，AnyangCityTumorHospital，Anyang455000，China)Abstract：Objective：ToinvestigatetheeffectsofRNAicyclinEOilgrowthoflivercancercells．Methods：HepG2c
7、elllinewasculturedinvitro．TheselectedsiRNAwereformedintodouble—strandedhairpinDNA．TworecombinantsofpGFP—V-RS—siCE951andpGFP—V—RS—siCE1122wereobtainedbyinsertionofhairpinDNAintopGFP—V—RS．DNAsequencesweredeterminedandge—netichomologywerecomparedintworecombinants．The
8、tworecombinantsandpGFP-V-ConweretransfectedintoHepG2cells，theblankcontrolgroup(addedbytransfectionreagentwithoutanytransfectionofplasmid)wassetup．Theexp
