大鼠肢體缺血預(yù)處理對肝臟缺血再灌注損傷保護(hù)作用機(jī)制的初步探討-論文.pdf

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1、2O13年12月中醫(yī)學(xué)報(bào)第28卷December2013J0URNAL0FCHINESEMEDICINEVo1．28大鼠肢體缺血預(yù)處理對肝臟缺血再灌注損傷保護(hù)作用機(jī)制的初步探討張冰】通訊作者譚莉莉2楊永豐張建軍1瞿海龍1田占發(fā)l1河北大學(xué)附屬醫(yī)院急診科河北保定071000；2河北大學(xué)附屬醫(yī)院貴賓病房河北保定071000【摘要】目的觀察大鼠肢體缺血預(yù)處理(1imbischemicpreconditioning，LIPC)對其肝臟缺血再灌注(ischemiareperfusion，iR)損傷的保護(hù)作用及可能的作用機(jī)制方法健

2、康雄性SD大鼠5O只，隨機(jī)分為對照組(control，C)、假手術(shù)組(shamoperation，SO)、缺血再灌注組(IR)、肝臟缺血預(yù)處理組(hepaticischemicprec0nditioning，HIPC)、肢體缺血預(yù)處理組(1imbischemicprec0nditi0ning，LIPC)5組，分別檢測ALT、AST水平；脫氧核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的缺口末端標(biāo)記法(terminal-deoxynucleotidyltransferasemediatedd—UTPnickendlabeling，TUNEL)檢

3、測肝組織凋亡細(xì)胞并計(jì)算凋亡指數(shù)(apoptosisindex，AI)。結(jié)果IR組、HIPC組、LIPC組血清ALT、AsT水平較c組、s0組顯著升高(P<0．05)。其中IR組轉(zhuǎn)氨酶升高最明顯，與HIPC組、LIPC組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0．05)。而HIPC與LIPC兩組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0．05)。凋亡細(xì)胞在s0組罕見，IR組、HIPC組和LIPC組都有明顯增加。其中IR組凋亡指數(shù)增加最明顯，與HIPC組、LIPC組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0．05)。HIPC與LIPC兩組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(

4、P>0．05)。結(jié)論肢體缺血預(yù)處理與肝臟缺血預(yù)處理均可減輕肝臟缺血再灌注損傷，其保護(hù)作用機(jī)制與抑制肝細(xì)胞凋亡有關(guān)?！娟P(guān)鍵詞】缺血再灌注；預(yù)處理；肝臟；肢體；凋亡【中圖分類號]R333．4【文獻(xiàn)標(biāo)識碼IB【文章編號】1674—8999(2O13)12-0188—02缺血預(yù)處理(ischemicpreconditioning，IPC)是組織或器官在經(jīng)過1次或表1各組大鼠血清ALT、AST水平(U／L)多次短暫缺血后，對隨后長時(shí)間的缺血產(chǎn)生耐受的現(xiàn)象。隨著缺血預(yù)處理研究的進(jìn)一步深人，發(fā)現(xiàn)“遠(yuǎn)隔器官缺血預(yù)處理”現(xiàn)象，即通過對遠(yuǎn)

5、離靶器官的組織或器官預(yù)先進(jìn)行缺血預(yù)處理，同樣能夠減輕靶器官的缺血再灌注損傷。本研究預(yù)先對兩組大鼠分別進(jìn)行肝臟原位缺血預(yù)處理和肢體缺血預(yù)處理，隨后對肝臟實(shí)施缺血再灌注，之后對比各組血清轉(zhuǎn)氨酶變化，觀察肢體缺血預(yù)處理這一遠(yuǎn)隔器官預(yù)處理方式對肝臟缺血再灌注損傷的保護(hù)作用；通過計(jì)算肝細(xì)胞凋亡指數(shù)，初步探討遠(yuǎn)隔器官缺血預(yù)處理的保護(hù)作用機(jī)制。與c組比較，(1)P>0．05與sO組比較，(2)P<0．05；與IR組比較，(3)1材料與方法P<0．05；與HIPC組比較，(4)P>0．05。1．1主要試劑AsT、ALT檢測試劑盒購于南

6、京建成生物工程研究2．2細(xì)胞凋亡檢測：凋亡細(xì)胞在S0組罕見，在IR組、HIPC組、LIPC所；TUNEL檢測試劑盒購于Roche公司。組都有明顯增加。IR組、HIPC組、LIPC組凋亡指數(shù)與S0組比較差異均1．2實(shí)驗(yàn)動物及分組清潔級雄性SD大鼠5O只，體重200—250g，由河有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0．05)。其中IR組凋亡指數(shù)為9．64士1．57，與HIPC北大學(xué)實(shí)驗(yàn)動物中心提供，動物合格證號：SCXK(冀)2008-1—0035O只大組、LIPC組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P

7、，編號，隨機(jī)分為5組，每組10只：對照組(control，C)、假手術(shù)組數(shù)分別為4．94士0．42、5．02士0．44，兩組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(shamoperation，SO)、缺血再灌注組(isehemiareperfusion，IR)、肝臟缺血預(yù)(P>0．05)(表Z)。處理組(hepaticischemicpreconditioning，HIPC)、肢體缺血預(yù)處理組(1imbis—表2各組肝細(xì)胞凋亡指數(shù)()chemicpreconditioning，LIPC)。1．3動物模型的制備：5組大鼠術(shù)前12小時(shí)均禁食

8、，可自由飲水。①C組：3戊巴比妥鈉腹腔內(nèi)注射麻醉(40mg／kg)，經(jīng)心臟采集血樣待生化檢測。②SO組：麻醉同C組，上腹正中開腹，向頭側(cè)牽開肝臟，暴露并游離肝十二指腸韌帶，腹腔內(nèi)注射慶大霉素lml、生理鹽水2ml，關(guān)腹。③1R組：麻醉、開腹、游離肝十二指腸韌帶均同SO組，以血管夾夾閉肝十二指腸韌帶，致肝缺血30min，然后松開血管