低離子聚凝胺技術(shù).ppt

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1、低離子聚凝胺技術(shù)原理聚凝胺（Polybrene），一種高價(jià)離子季胺鹽多聚物，溶解后能產(chǎn)生很多正電荷，可以中和紅細(xì)胞表面的負(fù)電荷，使紅細(xì)胞之間距離減小，能引起正常紅細(xì)胞可逆性的非特異性凝集。如果是抗體致敏的紅細(xì)胞被聚凝胺凝集，則凝集不可逆。LISS(低離子強(qiáng)度溶液)的原理抗原非離子靜電作用力抗體靜電作用力離子抗原抗體當(dāng)溶液中離子增多時(shí)，抗原抗體之間的靜電作用力減弱當(dāng)溶液中缺少離子時(shí)，抗原抗體之間的靜電作用力較強(qiáng)基本操作方法1、試管中加入待檢血清或血漿1滴2、加入用LIM溶液配置的2~3的紅細(xì)胞懸液2~3滴3、搖勻，室溫放置1分鐘（時(shí)間長(zhǎng)

2、，效果好）4、加Polybrene試劑1滴，混勻后3400rpm離心15秒5、輕搖觀察由Polybrene引起的紅細(xì)胞非特異性凝集，若未見(jiàn)紅細(xì)胞凝集則需重做試驗(yàn)6、加入1滴重懸液，輕搖觀察結(jié)果由Polybrene引起的非特異性凝集應(yīng)在1分鐘內(nèi)完全散開(kāi)，若是由免疫抗體引起的凝集反應(yīng)則不會(huì)散開(kāi)聚凝胺(Polybrene)配血方法患者獻(xiàn)血者主側(cè)次側(cè)?室溫放置1分鐘Polybrene上海市血液中心血主次側(cè)均加聚凝胺聚凝胺(Polybrene)配血方法離心聚凝胺引起紅細(xì)胞非特異性凝集陽(yáng)性陰性重懸液上海市血液中心血主次側(cè)均加重懸液看結(jié)果經(jīng)典操作方

3、法1、試管中加2滴待檢血清或血漿，加1滴試劑紅細(xì)胞2、加LIM溶液0.6毫升（或12滴）混勻，室溫放置1分鐘3、加Polybrene試劑2滴，混勻后3400rpm離心15秒4、倒去上清液，輕搖觀察由Polybrene引起的紅細(xì)胞非特異性凝集，若未見(jiàn)紅細(xì)胞凝集則需重做試驗(yàn)4、加入1滴重懸液，輕搖觀察結(jié)果由Polybrene引起的非特異性凝集應(yīng)在1分鐘內(nèi)完全散開(kāi)，若是由免疫抗體引起的凝集反應(yīng)則不會(huì)散開(kāi)結(jié)果判定陰性結(jié)果：紅細(xì)胞迅速散開(kāi)，并在1分鐘內(nèi)完全散開(kāi)陽(yáng)性結(jié)果：紅細(xì)胞不完全散開(kāi)，弱凝集可能在30分鐘內(nèi)明顯減弱或消失，因此，以立刻觀察結(jié)果

4、為準(zhǔn)質(zhì)控試驗(yàn)：可以用陽(yáng)性對(duì)照液代替待檢血清，按同樣步驟進(jìn)行質(zhì)控試驗(yàn)，結(jié)果應(yīng)為“1+”的弱凝集說(shuō)明及注意事項(xiàng)1、配置LIM紅細(xì)胞懸液：取抗凝或不抗凝血樣標(biāo)本的壓積紅細(xì)胞可直接加LIM溶液配置懸液，若紅細(xì)胞中含有較多血清或血漿，則需要用LIM溶液洗滌紅細(xì)胞一次，紅細(xì)胞懸液為2~3%，該懸液可替代鹽水紅細(xì)胞懸液使用2、加入血清量應(yīng)嚴(yán)格按照操作方法，多加血清會(huì)提高離子強(qiáng)度，降低致敏效果。3、使用肝素抗凝的血漿配血需多加1滴Polybrene，以中和肝素