奶牛布魯氏菌病檢疫與凝似疾病的診斷.pdf

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1、第1期奶牛布魯氏病襝疫與疑似疾病的診斷方美行(廣東省奶業(yè)協(xié)會(huì)，廣州510500)編者按：隨著各地奶業(yè)的發(fā)展，牛群的交易和移動(dòng)越來(lái)越頻繁，牛群的注苗免疫記錄容易流失．有關(guān)奶牛布氏病的預(yù)防和檢疫中如何鑒別診斷注苗后引起的假陽(yáng)性問(wèn)題正在一些同行人中引起困惑2008年有報(bào)道北京市獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)診斷所技術(shù)人員經(jīng)過(guò)對(duì)1022組奶牛布病自然感染抗體與人工免疫抗體檢測(cè)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析得出，在人工免疫6個(gè)月后．運(yùn)用競(jìng)爭(zhēng)ELISA方法可以準(zhǔn)確鑒別出奶牛布病自然感染抗體與人工免疫抗體。本文作者用幾種基層單位可操作的簡(jiǎn)單常用檢測(cè)方法。詳細(xì)比較了布病檢疫中的問(wèn)題，目前仍然有著指導(dǎo)意義，現(xiàn)特把下文

2、在本期刊出，供大家參考。我國(guó)“動(dòng)物布魯氏菌病診斷技術(shù)”規(guī)定了動(dòng)1A奶牛場(chǎng)布病檢疫結(jié)果及疑似布病牛的流物布病試管凝集試驗(yàn)和動(dòng)物布病補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)適產(chǎn)與病原分離情況用于診斷羊種、牛種和豬種布魯氏菌病(簡(jiǎn)稱布1．1A場(chǎng)奶牛布病試管凝集試驗(yàn)陽(yáng)性率病)感染的家畜。在2002年農(nóng)業(yè)部辦公廳印發(fā)1979、1980年分別高達(dá)35．96％和22．50％。隨后的“布魯氏菌病防治技術(shù)規(guī)范”中也指出“血清逐年下降。1980和1981年分別對(duì)14和28頭試學(xué)正式試驗(yàn)中試管凝集試驗(yàn)陽(yáng)性或補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)管凝集試驗(yàn)陽(yáng)性奶牛及可疑奶牛采用補(bǔ)體結(jié)合試陽(yáng)性，判為陽(yáng)性畜。判定時(shí)應(yīng)注意排除其它疑似驗(yàn)復(fù)檢，結(jié)果

3、均為陰性。1983年8月對(duì)41頭陽(yáng)疾病和菌苗接種引起的血清學(xué)反應(yīng)。作者在多年性和可疑奶牛血清在試驗(yàn)前以56℃30分鐘滅活處的實(shí)踐中，用試管凝集試驗(yàn)對(duì)奶牛進(jìn)行布病的檢理，再用試管凝集試驗(yàn)復(fù)檢．其結(jié)果是：陽(yáng)性2疫，曾碰到其它疑似疾病和菌苗接種引起的非特頭、可疑1頭；這3頭奶牛血清以補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)異性血清學(xué)反應(yīng)。現(xiàn)分別報(bào)道如下：方法再次復(fù)檢，結(jié)果全部陰性(表1)。表1奶牛布病試管凝集試驗(yàn)初檢及補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)復(fù)檢結(jié)果說(shuō)明：以下各表中“+”表示陽(yáng)性：“一”表1979和1980年奶牛流產(chǎn)率分別高達(dá)22．45％和示陰性；“±”表示可疑。27．27％。17頭流產(chǎn)牛布病試管凝集試驗(yàn)檢疫

4、結(jié)1．2A場(chǎng)奶牛1978年流產(chǎn)率只有6．38％，果，陽(yáng)性和可疑牛共占70．59％(表2)。圉纛第1期1．3A場(chǎng)奶牛布魯氏茵分離情況中分別加人以上細(xì)菌培養(yǎng)物懸液各一滴?；靹颍?980年3月布病試管凝集試驗(yàn)檢出的25在1～2分鐘內(nèi)觀察凝集反應(yīng)現(xiàn)象，結(jié)果6頭被檢頭陽(yáng)性奶牛中．采集了9頭奶牛的陰道分泌物和奶牛血清與培養(yǎng)物(菌懸液)出現(xiàn)明顯的凝集反10頭奶牛的乳汁作布魯氏菌培養(yǎng)，均未發(fā)現(xiàn)布魯應(yīng)，而布病標(biāo)準(zhǔn)的陽(yáng)、陰血清與細(xì)菌培養(yǎng)物(菌氏菌。后來(lái)再次采集了表2中的6頭陽(yáng)性并有流懸液)卻不出現(xiàn)凝集反應(yīng)：同時(shí)用這些布病標(biāo)準(zhǔn)產(chǎn)的奶牛的陰道分泌物，并用二氧化碳培養(yǎng)方法陽(yáng)、陰血清與標(biāo)準(zhǔn)

5、的布氏凝集抗原作對(duì)照成立的進(jìn)行布魯氏菌分離培養(yǎng)。其中2頭奶牛的陰道分前提下，用這6頭被檢奶牛血清作虎紅平板凝集泌物在初代分離培養(yǎng)中，分離出革蘭氏陰性的短試驗(yàn)、試管凝集試驗(yàn)均為陽(yáng)性(表3)。通過(guò)用細(xì)小球桿菌，再把這些短小球桿菌的培養(yǎng)物以生理菌培養(yǎng)物(菌懸液)與布病標(biāo)準(zhǔn)陽(yáng)性血清混勻后不鹽水洗下成為菌懸液后，分別在潔凈的玻片上滴出現(xiàn)凝集反應(yīng)的現(xiàn)象，從而可初步排除了該分離的上這6頭陽(yáng)性奶牛的血清與布病標(biāo)準(zhǔn)陽(yáng)、陰血清細(xì)菌并非布魯氏菌。各一滴：在這些被檢血清和布病對(duì)照陽(yáng)、陰血清表3布病陽(yáng)性奶牛布魯氏菌分離情況2B奶牛場(chǎng)注射布病菌苗奶牛的鑒別診斷法，對(duì)該場(chǎng)奶牛血清進(jìn)行檢驗(yàn)。并把

6、試管凝集試B奶牛場(chǎng)的牛群曾于1965年在流產(chǎn)胎兒中分驗(yàn)檢出的陽(yáng)性奶牛血清送省獸醫(yī)防疫檢疫站用補(bǔ)離出羊型布魯氏菌，當(dāng)時(shí)被定為布病感染場(chǎng)。后體結(jié)合試驗(yàn)方法進(jìn)行復(fù)檢，檢驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表4。來(lái)該場(chǎng)牛群經(jīng)多年的檢疫、流產(chǎn)胎兒的細(xì)菌分離2．1B場(chǎng)合計(jì)項(xiàng)中，注苗奶牛的布病虎紅和奶牛場(chǎng)地的嚴(yán)格消毒．對(duì)檢出陰性的牛群采取(三年)共檢41頭、試管(二年)凝集試驗(yàn)共檢分群隔離飼養(yǎng)和每年注射M5菌苗等措施，終于16頭，結(jié)果統(tǒng)計(jì)顯示：注苗奶牛用虎紅和試管試摘除了奶牛布病牛場(chǎng)的帽子，但該奶牛場(chǎng)在每年驗(yàn)陽(yáng)性檢出率[g1]分別為53．66％(22／41)和奶牛布病檢疫中，主要是用虎紅平板凝集試驗(yàn)初50

7、．00％(8／16)：而未注苗奶牛用虎紅和試管試篩、試管凝集試驗(yàn)復(fù)檢，陽(yáng)性檢出率仍較高，所驗(yàn)陽(yáng)性檢出率僅為8．16％(4／49)和0％(0／24)。以常被評(píng)定為布病假定健康場(chǎng)。為弄清該場(chǎng)的布2．2B場(chǎng)二年的布病利凡諾爾凝集試驗(yàn)結(jié)果病檢疫問(wèn)題，摸索一種簡(jiǎn)單易行，并能排除菌苗統(tǒng)計(jì)顯示：注苗奶牛陽(yáng)性率為0(0／16)，可疑奶接種引起的血清學(xué)反應(yīng)，從1990年開(kāi)始，我們牛18．75％(3／16)：未注苗奶牛陽(yáng)性率為0(0／同時(shí)采用了虎紅、試管、利凡諾爾凝集試驗(yàn)等方24)?？梢赡膛?．17％(1／24)圓第1期2．31994年分兩次共送17頭奶牛血清到省次為：100％(17

8、／17)、