資源描述:
《微柱凝膠間接抗球蛋白法在篩查患者紅細(xì)胞不規(guī)則抗體中的臨床應(yīng)用.pdf》由會員上傳分享,免費(fèi)在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、中外醫(yī)學(xué)研究2009年12月第7卷第13期CHINESEANDFOREIGNMEDICALRESEARCH》
2、毫
3、
4、.一I
5、
6、
7、l
8、一-i
9、
10、
11、lI微柱凝膠間接抗球蛋白法在篩查患者紅細(xì)胞不規(guī)則抗體中的臨床應(yīng)用王維牛新海鎮(zhèn)江市丹徒區(qū)人民醫(yī)院檢驗(yàn)科(江蘇鎮(zhèn)江212003)【摘要】目的探討微柱凝膠間接抗球蛋白法在篩查患者紅細(xì)胞不規(guī)則抗體中的臨床應(yīng)用價(jià)值,進(jìn)一步增強(qiáng)臨床用血安全。方法采用微柱凝膠間接抗球蛋白法對手術(shù)備血或有輸血預(yù)期的住院患者進(jìn)行紅細(xì)胞不規(guī)則抗體篩查,陽性標(biāo)本再用凝聚胺法和試管間接抗球蛋白法做比較。結(jié)果陽性結(jié)果9例,陽性率為0.4%,其中自身冷抗體l例、抗M1例、抗Le1例、
12、抗E4例、抗C1例和抗e1例。凝聚胺法漏檢2例,試管間接抗球蛋白法漏檢1例。結(jié)論微柱凝膠間接抗球蛋白法具有標(biāo)本用量少、操作簡便、靈敏度高、重復(fù)性好、結(jié)果清晰穩(wěn)定以及篩查時(shí)間短,可以替代凝聚胺法和試管間接抗抗球蛋白法,積極推廣其在臨床上使用?!娟P(guān)鍵詞】不規(guī)則抗體;微柱凝膠技術(shù);凝聚胺法;間接抗球蛋白法紅細(xì)胞不規(guī)則抗體是指ABO血型系統(tǒng)抗A、抗B以外的血只試管中,不含抗凝劑試管加入5mL,含EDTA—K2抗凝劑試管型抗體,主要是經(jīng)輸血(常見于反復(fù)輸血)或妊娠等免疫刺激而加入1mL。不抗凝標(biāo)本均經(jīng)恒溫水溫箱37℃孵育1h后3500產(chǎn)生,多為免疫性不完全抗體且多為IgG類抗體,可以引起遲發(fā)
13、r/min離心10min,確保血清中無纖維蛋白凝塊。抗凝標(biāo)本用生型免疫性溶血性輸血反應(yīng)和新生兒溶血病,嚴(yán)重時(shí)可危及患者的理鹽水充分洗滌、離心3次,并用Diamed2號稀釋液配制成1%生命?;颊呷朐汉筮M(jìn)行紅細(xì)胞不規(guī)則抗體篩查具有重要的臨自身對照細(xì)胞。床意義,可以發(fā)現(xiàn)有意義的不規(guī)則抗體,為患者選擇合適血液輸1.3.2不規(guī)則抗體篩選使用前先將微柱凝膠卡在專用卡式離注而提供重要依據(jù),使交叉配血更具有針對性,另外還可以避免心機(jī)內(nèi)1000r/rain離心1min,以防運(yùn)輸過程因倒置顛簸造成凝在短時(shí)間內(nèi)找不到相配合的血液而延誤搶救良機(jī)。紅細(xì)胞規(guī)則膠界面不整齊而影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。按試劑盒操作說明書進(jìn)行
14、實(shí)驗(yàn)抗體篩查的傳統(tǒng)方法有凝聚胺法和試管間接抗球蛋白法,但存在操作:首先在凝膠卡上標(biāo)記,每個(gè)被檢標(biāo)本占用2個(gè)微柱,用微量一些缺點(diǎn),如凝聚胺試驗(yàn)易受抗凝劑、藥物、血清蛋白、溫度等因定量加液器沿著微柱內(nèi)壁向柱內(nèi)分別加入1%的篩選細(xì)胞和自素的影響,而試管間接抗球蛋白法對條件要求很高、操作要求嚴(yán)身對照細(xì)胞各5L,再各加入25L被檢血清;在37℃專用孵育格及操作步驟繁瑣。微柱凝膠間接抗球蛋白法是近年來開展的器內(nèi)孵育15min;移入專用卡式離心機(jī)內(nèi)1000r/min離心l0篩查不規(guī)則抗體的一項(xiàng)新技術(shù),操作簡便、靈敏度高、重復(fù)性好且rain。結(jié)果判定:紅細(xì)胞全部沉積存微柱底部者為陰性,滯留在凝大大
15、縮短了篩查時(shí)間。筆者采用微柱凝膠間接抗球蛋自法,對筆膠表面上或中間者為陽性。者所在醫(yī)院手術(shù)備血或有輸血預(yù)期的2256例患者血樣進(jìn)行紅1.3.3不規(guī)則抗體鑒定操作步驟及結(jié)果判定基本等同于“不細(xì)胞不規(guī)則抗體篩查,同時(shí)對不規(guī)則抗體陽性血樣與凝聚胺法和規(guī)則抗體篩選”步驟,但每個(gè)陽性標(biāo)本占用10個(gè)微柱,且無需自試管間接抗球蛋白法作比較,探討微柱凝膠間接抗球蛋白法在篩身對照細(xì)胞。最后,根據(jù)1—10號細(xì)胞的反應(yīng)結(jié)果與譜細(xì)胞反應(yīng)查紅細(xì)胞不規(guī)則抗體中的臨床應(yīng)用價(jià)值,現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。格局表進(jìn)行比對,得出不規(guī)則抗體的名稱。1資料與方法1.3.4陽性標(biāo)本對比試驗(yàn)①凝聚胺法標(biāo)記試管,依次加患者1.1一般資
16、料2256份不抗凝靜脈血佯全部來自于2005年1血清2滴、5%抗體篩選細(xì)胞1滴、低離子介質(zhì)0.7m1,混合均勻,月~2009年6月之間有手術(shù)備血或輸血預(yù)期的住院患者,其中再加凝聚胺2滴,并混合均勻。3400r/rain離心10S,倒掉上清男性1072例,女1l84例;年齡為3~82歲。液,但不瀝干,讓管底殘留液體約0.1mL。輕輕振搖試管,目測1.2試劑與儀器紅細(xì)胞有無凝集,若無凝集則重復(fù)上述步驟,有凝集則加入懸浮1.2.1試劑微柱凝膠(內(nèi)含凝膠及廣譜抗人球蛋白)、Di一液2滴,輕輕振搖試管并觀察結(jié)果。結(jié)果判定:30S內(nèi)凝集散開,amed2號稀釋液、由瑞tDiamed公司提供;抗體
17、鑒定用譜細(xì)胞表明是由凝聚胺引起的非特異性凝集,結(jié)果為陰性;30s內(nèi)凝集(由1號10號細(xì)胞組成)、廣譜抗人球蛋白試劑由上海輸血技不散開,則為紅細(xì)胞抗原抗體的特異性反應(yīng),結(jié)果為陽性。②試術(shù)有限公司提供;凝聚胺來自(臺灣)珠海貝索生物技術(shù)有限公管間接抗球蛋白法標(biāo)記試管,加入受血者血清2滴和5%篩選細(xì)司;1%和5%抗體篩選細(xì)胞由5份O型健康獻(xiàn)血者紅細(xì)胞(鎮(zhèn)江胞l滴,混勻后靜置于恒溫水溫箱37℃孵育1h。目測有無溶血市中心血站提供)等份混合l并充分洗滌3次后用Diamed2號稀