蔗糖含量測定.doc

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1、蔗糖含量測定1實(shí)驗(yàn)儀器：分光光度計(jì)，恒溫水浴鍋，電子天平，烘箱，刻度離心管，帶塞試管，漏斗。2實(shí)驗(yàn)試劑：2mol/LNaOH(80g/L),30%HCl，蔗糖標(biāo)準(zhǔn)液（取100mg蔗糖用80%乙醇配成500mL溶液，即得200g/mL標(biāo)準(zhǔn)液），間苯二酚溶液（0.1g間苯二酚溶液于100mL95%乙醇溶液，棕色瓶內(nèi)保存）。3實(shí)驗(yàn)材料：各種植物葉片或種子。4實(shí)驗(yàn)步驟：（1）制備提取液：植物葉片或種子，在110℃烘箱烘15min，然后調(diào)制70℃過夜。干葉片磨碎后，秤取50mg樣品倒入10ml刻度離心管內(nèi)加入4ml80%乙醇，至于80℃水浴中不斷攪拌

2、40min，離心，收集上清液，其殘?jiān)?ml80%乙醇重復(fù)提2次，合并上清液。在上清液中加10mg活性炭，80℃脫色30min80%乙醇定容至10ml，過濾后去濾液測定。（2）標(biāo)準(zhǔn)曲線制作：取蔗糖標(biāo)準(zhǔn)液用80%乙醇稀釋成系列（0,10、20、30、40、60、80,100g/ml）濃度的溶液。分別取0.4ml溶液，各自加入200微升2mol/LNaOH，100℃煮沸5min，冷卻，加入2.8ml30%HCl，0.8ml0.1%間苯二酚，搖勻，80℃水浴反映10min，冷卻后再480nm測定OD值，以0濃度管調(diào)零。繪制蔗糖濃度-OD值曲線。（

3、3）測定：取提取液0.4ml，按上述步驟進(jìn)行蔗糖含量的測定，讀取OD值，并從標(biāo)準(zhǔn)曲線得到提取液中的糖含量，然后再進(jìn)行計(jì)算樣品中的蔗糖含量。（4）注意：色素對(duì)本實(shí)驗(yàn)影響較大。