木犀草素對肝纖維化進(jìn)程中肝細(xì)胞上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化的抑制作用.pdf

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1、·中藥研究·木犀草素對肝纖維化進(jìn)程中肝細(xì)胞上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化的抑制作用△李星霞,李婕,王紹展。,郭澄l#a,張俊平。舳(1.上海交通大學(xué)附屬第六人民醫(yī)院藥劑科,上海200233;2第二軍醫(yī)大學(xué)藥學(xué)院生化藥學(xué)教研室,上海200433)中圖分類號R285;R965文獻(xiàn)標(biāo)志碼A文章編號1001.0408(2014)19—1729—04DOI10.6039/j.issn.1001—0408.2014.19.01摘要目的:研究木犀草素抑制肝纖維化進(jìn)程中肝細(xì)胞上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化的作用。方法:大鼠腹腔注射50%CC1橄欖油溶液(

2、1ml/kg),每周2次,連續(xù)12周以復(fù)制大鼠肝纖維化模型。3O只sD大鼠隨機(jī)均分為正常對照(等容含5%cMC—Na溶液)組、模型(等容含5%CMC—Na溶液)組、木犀草素(100mg&g)組。第1次腹腔注射CCI后灌胃給藥,每天1次,連續(xù)12周。HE和VG染色檢測大鼠肝組織病理學(xué)變化,免疫組化法檢測肝組織Ⅱ一平滑肌肌動蛋白(oc—SMA)、轉(zhuǎn)化生長因子(TGF)一13、波形蛋白(Vimentin)、上皮型E.鈣黏蛋白(E—cadherin)的表達(dá)。采用門靜脈插管Ⅳ型膠原酶原位灌注法分離大鼠原代肝細(xì)胞。

3、實驗隨機(jī)均分為空白對照(等容含10%FBS的DMEM溶液)組、模型(等容含10%FBS的DMEM溶液)組與木犀草素高、中、低濃度(40、20、10mmol/L)組。采用實時熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)法檢測d—SMA、I型膠原(CollagenI)、Ⅲ型膠原(CollagenⅢ)、E.cadherin、轉(zhuǎn)錄因子Snail、白蛋白(ALB)、糖原合成酶(GS)mRNA的表達(dá);Westernblot法檢測—SMA、Vimentin、E.cadherin蛋白的表達(dá)。結(jié)果:與模型組比較,木犀草素組大鼠肝組織n—SMA、

4、TGF—B。、Vimentin表達(dá)減弱,E—cadherin表達(dá)增強(qiáng),肝臟病理學(xué)程度減輕;木犀草素高、中、低濃度組大鼠肝組織細(xì)胞n—SMA、CollagenI、CollagenIll、SnailmRNA表達(dá)減弱,木犀草素高、中濃度組大鼠肝組織細(xì)胞E—cadherin、ALB、GSmRNA表達(dá)增強(qiáng);木犀草素高、中、低濃度組大鼠肝組織細(xì)胞“一SMA、Vimentin蛋白表達(dá)減弱,E.cadherin蛋白表達(dá)增強(qiáng)。結(jié)論:木犀草素具有明顯抗肝纖維化的作用,其機(jī)制可能與木犀草素抑制肝細(xì)胞上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化作用有關(guān)。關(guān)鍵

5、詞木犀草素;肝纖維化;上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化InhibitoryEffectofLuteolinonEpithelial—mesenchymalTransitionofHepatocytesinHepaticFibrosisProcessLIXing—xia,LIJie,WANGShao-zhan,GUOCheng,ZHANGJtln—ping。(1.Dept.ofPharmacy,TheAfiliatedSixthPeople’sHospitalofShanghaiJiaotongUniversity,Shan

6、ghai200233,China;2.Dept.ofBiochemicalPhar-macy,CollageofPharmacy,SecondMilitaryMedicalUniversity,Shanghai200433,China)ABSTRACT0BJECTIVE:Tbstudyinhibitoryeffbctofluteolinonepithelial—mesenchymaltransition(EMT)ofhepatocytesinratswithhepaticfibrosis.METHODS

7、:Rat1iverfibrosismodelwasinducedbysubcutaneousinjectionof50%CC141ml/kgsctwiceaweekforconsecutive12weeks.Luteolinwasadministeredintragastricallywithdailydoseofl00mg/kgonceadayforcon—secutivel2weeksafterthefirstinJectionofCCl“3OSDratswererandomlydividedint

8、osolventcontro1group(5%CMC—Na),modelgroup(5%CMC—Na)andluteolingroup(100mgg).ThepathologicalchangesoflivertissuewereobservedbyHEandVGstaining.Theexpressionsof0【一SMA,TGF.B1,vimentinandE.cadherininlivertissuesweredetectedwith

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