鹽水凝聚胺介質(zhì)交叉配血試驗(yàn).doc

《鹽水凝聚胺介質(zhì)交叉配血試驗(yàn).doc》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫(kù)。

1、一鹽水介質(zhì)交叉配血試驗(yàn)1.原理鹽水介質(zhì)配血法是目前最常用的配血方法，可以發(fā)現(xiàn)臨床上最重要的ABO不配合性。本試驗(yàn)主要用以檢測(cè)受血者（獻(xiàn)血者）血清（漿）中有無破壞獻(xiàn)血者（受血者）紅細(xì)胞的抗體。如存在相應(yīng)的抗體，則交叉管中將發(fā)生凝集或溶血現(xiàn)象，此即為交叉不合，反之則交叉相合。2.操作（單位：滴）主側(cè)管次側(cè)管混合管受血者血清（漿）21受血者5%紅細(xì)胞懸液11獻(xiàn)血者血清（漿）21獻(xiàn)血者5%紅細(xì)胞懸液11混勻，1000~2000rpm×1~2分鐘離心，觀察結(jié)果。3．結(jié)果觀察3.1主、次、混合管均無凝集，無溶血

2、現(xiàn)象，示無配血禁忌，繼續(xù)下一步進(jìn)行聚凝胺法或抗人球蛋白法。3.2主、次、混合管均有凝集和/或溶血現(xiàn)象，示有配血禁忌，需進(jìn)一步核查，尋找原因。3.3主、混合管有凝集和/或溶血現(xiàn)象，示有配血禁忌，需進(jìn)一步檢查，尋找原因。次、混合管有凝集和/或溶血現(xiàn)象，示有部分配血禁忌，需進(jìn)一步檢查，尋找原因。4．注意事項(xiàng)4.1結(jié)果觀察時(shí)，除肉眼觀察外，均需顯微鏡觀察。4.2要注意真、假凝集的鑒別。二凝聚胺試驗(yàn)1.原理：凝聚胺(Polybrene)是一種多價(jià)陽(yáng)離子溴化己二甲胺多聚物，具有中和肝素作用：又稱肝素靈，溶解后產(chǎn)

3、生許多正電荷，能中和紅細(xì)胞表面唾液酸所帶的負(fù)電荷，使紅細(xì)胞的Zeta電位降低，誘發(fā)紅細(xì)胞產(chǎn)生可逆的非特異性凝聚。在此過程中，若有IgG分子已直接與紅細(xì)胞搭橋，當(dāng)非特異性的紅細(xì)胞凝聚消散后，只有由抗原抗體引起的搭橋的特異性凝集仍存在。反應(yīng)分三個(gè)步驟：1.1．紅細(xì)胞致敏階段：紅細(xì)胞在低離子培育基中與相應(yīng)抗體致敏。1.2．凝聚階段：聚凝胺使紅細(xì)胞非特異性地緊密接近，誘發(fā)凝聚現(xiàn)象，因而允許抗體與相應(yīng)抗原形成橋連。1.3．再懸階段：再懸液具有中和聚凝胺的作用，使聚凝胺誘發(fā)的非特異性凝聚散開，留下抗原抗體反應(yīng)所

4、致的特異性凝集不能散開，凝集的強(qiáng)度與抗體的濃度、抗原的濃度及反應(yīng)的導(dǎo)熱特性有關(guān)。2、操作步驟：2.1、在鹽水法通過的基礎(chǔ)上，在主、次管均加入低離子介質(zhì)4滴，混合后置于室溫1分鐘。2.2、在主、次管均加入聚凝胺溶液2滴，混合后，室溫15秒。2.3、3500轉(zhuǎn)/分，離心10秒，徹底棄上清液。2.4、輕搖試管，判斷有無凝集。若無凝集，則應(yīng)重復(fù)該試驗(yàn)（或polybrene失效）。2.5、再加入再懸液2滴，輕搖試管，觀察凝集并判讀結(jié)果。2.6、若凝集消散，無凝集，表明配血結(jié)果相合，反之則配血結(jié)果不合，需進(jìn)一步

5、檢查。3、應(yīng)注意的幾個(gè)問題：3.1.加試劑等要按照順序，不能先加聚凝胺，不能有水解蛋白酶污染，否則要抑制細(xì)胞與聚凝胺的反應(yīng)。3.2．本法一般最敏感的是檢定IgG抗體，測(cè)定抗K，要用MPA(聚凝胺抗球蛋白試驗(yàn))法，效果與低離子強(qiáng)度溶液抗人球蛋白試驗(yàn)一樣。3.3．凝聚胺試驗(yàn)的主要缺點(diǎn)是在Kell系統(tǒng)缺乏足夠的敏感性。必要時(shí)用抗人球蛋白法配血以提高Kell系統(tǒng)抗體的敏感性。