DB32∕T 3274-2017 紫甘薯種苗病毒檢測技術(shù)規(guī)程.pdf

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1、ICS65.020.20B23備案號：54543-2017DB32江蘇省地方標準DB32/T3274—2017紫甘薯種苗病毒檢測技術(shù)規(guī)程TechnicalregulationforvirusdetectionofPurple-fleshedsweetpotatoseedlings2017-07-01發(fā)布2017-08-01實施江蘇省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局發(fā)布DB32/T3274—2017前言本標準按GB/T1.1—2009《標準化工作導(dǎo)則第1部分：標準的結(jié)構(gòu)和編寫》的要求編寫。本標準由江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院提出并歸口。本標準起草單位：江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)

2、院糧食作物研究所。本標準主要起草人：邊小峰、馬佩勇、賈趙東、謝一芝、郭小丁、禹陽。IDB32/T3274—2017紫甘薯種苗病毒檢測技術(shù)規(guī)程1范圍本標準規(guī)定了紫甘薯種苗的質(zhì)量要求和檢測方法。本標準適用于紫甘薯種薯（苗）繁育、生產(chǎn)、銷售過程中的質(zhì)量鑒定。2規(guī)范性引用文件下列文件對于本文件的應(yīng)用是必不可少的，凡是注日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB4406-1984種薯GB7413-2009甘薯種苗產(chǎn)地檢疫規(guī)程NY/T402-2016脫毒甘薯種薯（苗）病毒檢

3、測技術(shù)規(guī)程NY/T1200-2006甘薯脫毒種薯3術(shù)語和定義下列術(shù)語和定義適用本文件。3.1甘薯種苗sweetpotatoseedlings從育種家種子開始，經(jīng)逐代繁殖增加種薯（苗）數(shù)量的種薯生產(chǎn)體系生產(chǎn)出來的種薯（苗）。分為育種家種子、原原種、原種、生產(chǎn)用種四個級別。3.2育種家種子breeder’sseed由育種者直接生產(chǎn)和掌握的原始種子，具有該品種的典型性和遺傳穩(wěn)定性，純度100%，不帶病毒和其他病蟲害，產(chǎn)量及其他主要性狀符合推廣時的原有水平。3.3原原種pre-elite用育種家種子或典型品種的脫毒試管苗在防蟲網(wǎng)室、溫室條件下

4、生產(chǎn)的符合質(zhì)量標準的種薯（苗）。3.4原種elite用原原種作種薯，在良好隔離條件下生產(chǎn)的符合質(zhì)量標準的種薯（苗）。1DB32/T3274—20173.5生產(chǎn)用種certifiedseed用原種作種薯，在良好隔離條件下生產(chǎn)的符合質(zhì)量標準的種薯（苗）。4縮略語甘薯羽狀斑駁病毒（sweetpotatofeatherymottlevirus,SPFMV）。甘薯潛隱病毒（sweetpotatolatentvirus,SPLV）甘薯褪綠斑病毒（sweetpotatochloroticfecksvirus,SPCFV）5質(zhì)量要求各級別種薯（苗）繁

5、殖田中帶病植株允許率應(yīng)符合表1的要求。表1各級別種薯（苗）繁殖田中允許病毒檢出率(%)種薯級別育種家種子原原種原種生產(chǎn)用種苗期00≤5.0≤10.0封壟前00≤3.0≤10.0收獲前2周00≤2.0≤10.06檢測方法6.1檢測樣本的選擇6.1.1脫毒試管苗對每個單株進行檢測。淘汰帶毒單株，經(jīng)檢測確定無病毒的才繼續(xù)擴繁。6.1.2育種家種子、原原種和原種于苗期、封壟前和收獲前2周，在目測全田，淘汰顯癥苗的基礎(chǔ)上，采用隨機取樣法，抽樣數(shù)量為：面積小于等于0.1hm2，檢驗2點，每點100株；面積大于0.1hm2小于等于1hm2，檢驗5點

6、，每點100株；超過1hm2面積，劃出另一檢驗區(qū)，按本標準規(guī)定面積取樣。病毒檢測每株取莖蔓上、中、下部葉片各1片，24h內(nèi)檢測（見表2）。6.1.3生產(chǎn)用種于封壟前、收獲前2周，在目測全田，淘汰顯癥苗的基礎(chǔ)上，采用隨機取樣法，面積小于0.1hm2，檢驗2點，每點100株；面積大于0.1hm2小于等于1hm2，檢驗5點，每點100株；面積大于1hm2小于等于5hm2，檢驗10點，每點100株；超過5hm2面積，劃出另一檢驗區(qū)，按本標準規(guī)定面積取樣。取樣方法同原種。見表2。注：在進行病毒檢測時，原原種每5株混樣；原種或生產(chǎn)用種混合后二次抽

7、樣，隨機抽取10%～50%的混合樣品檢測，抽取樣品最低數(shù)量為100株。2DB32/T3274—2017表2各級別種薯（苗）繁殖田中在不同種植面積中的抽樣數(shù)量種薯級別育種家種子原原種原種生產(chǎn)用種面積≤0.1hm22點2點2點2點0.1hm2＜面積≤15點5點5點5點hm21hm2＜面積≤5hm2劃出另一檢驗區(qū)，按本標準規(guī)定面積取樣10點面積＞5hm2劃出另一檢驗區(qū)，按本標準規(guī)定面積取樣注：每點取樣100株6.2酶聯(lián)免疫檢測法當單株苗展開葉達6片以上時進行檢測，按株取其上、中、下部葉片用于酶聯(lián)免疫檢測，剩余植株部分繼續(xù)生長。用酶聯(lián)免疫檢測

8、法初檢后，淘汰顯陽性反應(yīng)的單株。6.2.1樣品制備將待測葉片用清水清洗干凈，從每一樣品葉片上各取一直徑約1cm圓片，放入樣品袋中，加入3mL抽提緩沖液充分研磨，4℃靜置30min～40min，取澄清液點樣。樣品為塊根時，