實(shí)驗(yàn)一---徒手切片的制作課件.ppt

《實(shí)驗(yàn)一---徒手切片的制作課件.ppt》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在教育資源-天天文庫(kù)。

1、實(shí)驗(yàn)須知1．遵守實(shí)驗(yàn)室制度，維護(hù)實(shí)驗(yàn)室安全，不違章操作，嚴(yán)防爆炸、著火、中毒、觸電、漏水等事故的發(fā)生。若發(fā)生事故應(yīng)立即報(bào)告指導(dǎo)教師。2．實(shí)驗(yàn)前作好預(yù)習(xí)，明確實(shí)驗(yàn)內(nèi)容，了解實(shí)驗(yàn)的基本原理和方法，安排好當(dāng)天計(jì)劃，爭(zhēng)取準(zhǔn)時(shí)結(jié)束。實(shí)驗(yàn)過程應(yīng)養(yǎng)成及時(shí)記錄的習(xí)慣——實(shí)驗(yàn)中應(yīng)如實(shí)記錄原始數(shù)據(jù)和實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象，并嚴(yán)格遵守實(shí)驗(yàn)規(guī)則。3．實(shí)驗(yàn)室中保持安靜，不許大聲喧嚷，不許抽煙、不遲到、不隨便離開，實(shí)驗(yàn)臺(tái)面應(yīng)保持清潔，使用過的儀器應(yīng)及時(shí)清洗干凈，存放在實(shí)驗(yàn)柜內(nèi)，廢棄的固體和濾紙等丟入廢物缸內(nèi)，絕不能丟入水槽、下水道和窗外，以免堵塞和影響環(huán)境衛(wèi)生。4．公用儀器及藥品用完后

2、立即返還原處，破損儀器應(yīng)填寫破損報(bào)告單，注明原因。節(jié)約用水、用電、藥用試劑。嚴(yán)格藥品用量。5．保持實(shí)驗(yàn)室內(nèi)整潔，學(xué)生采取輪流值日，每次實(shí)驗(yàn)完畢，負(fù)責(zé)整理公用儀器，將實(shí)驗(yàn)臺(tái)、地面打掃干凈，倒清廢物缸，檢查水、電和門窗是否關(guān)閉。實(shí)驗(yàn)分組每個(gè)桌面坐7個(gè)人，2或3個(gè)人為一小組，7個(gè)人為一大組。實(shí)驗(yàn)報(bào)告要求1、實(shí)驗(yàn)前認(rèn)真預(yù)習(xí)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容，毋須寫預(yù)習(xí)報(bào)告，合理安排好實(shí)驗(yàn)時(shí)間。2、實(shí)驗(yàn)完成后，根據(jù)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容寫一份真實(shí)的實(shí)驗(yàn)報(bào)告。下一次實(shí)驗(yàn)時(shí)以班級(jí)為單位上交上一次的實(shí)驗(yàn)報(bào)告。3、請(qǐng)假者，請(qǐng)及時(shí)上交實(shí)驗(yàn)報(bào)告。徒手切片的制作醫(yī)學(xué)與生命科學(xué)學(xué)院徒手切片法用手直接拿刀片把植

3、物新鮮材料切成薄片，所作的切片通常不經(jīng)染色或經(jīng)簡(jiǎn)單染色后，制成臨時(shí)的水裝片用于觀察，亦可以通過脫水與染色制成永久制片。優(yōu)點(diǎn)簡(jiǎn)單、方便；不需要復(fù)雜設(shè)備；不經(jīng)化學(xué)藥物處理，基本上保留了植物活體的狀態(tài)。局限性難以把過硬或者過軟的材料制成薄片，對(duì)需制作連續(xù)切片且厚度要求在幾微米時(shí)該法更無能為力。徒手切片的制作一、實(shí)驗(yàn)材料及器材的準(zhǔn)備二、實(shí)驗(yàn)材料的處理三、握夾持物和持刀四、切片五、制片六、注意事項(xiàng)實(shí)驗(yàn)器材的準(zhǔn)備1、鋒利的刀片2、潔凈的載玻片、蓋玻片3、盛清水的培養(yǎng)皿4、毛筆、鑷子等1、軟硬適中、便于手持的材料，一般截成小塊（長(zhǎng)2～3cm，切片斷面不超過3

4、～5mm2）。2、過于柔嫩的器官，可選用胡蘿卜根或土豆塊莖作為夾持物。夾持物截成規(guī)范的小塊，再用刀從一端的中線縱向劈開（不要劈到底），以?shī)A住材料。如新鮮葉片，切去葉柄、葉尖和葉緣后，切成長(zhǎng)度和寬度都小于夾持物劈縫的長(zhǎng)方塊，再放入夾持物劈縫中。3、有些葉片可以卷成圓筒再進(jìn)行切片。實(shí)驗(yàn)材料的處理用左手的拇指和食指捏緊夾有葉片的夾持物，并使其劈縫與自己本身平行，拇指要稍低于食指，以免被刀割破。夾持物上端要略高于手指，但勿過高，以防切割時(shí)夾持物和刀搖動(dòng)。右手拿刀將刀片平穩(wěn)地放在左手食指上，與材料切面平行。握夾持物和持刀這是切片的關(guān)鍵階段。沾水的刀口保持

5、水平對(duì)著夾持物,自左前方向右后方，以均勻、快捷的動(dòng)作，斜著向后進(jìn)行連續(xù)拉切。切時(shí)用臂力而不用腕力。如此循環(huán)多次，切下許多薄片后，把切下的薄片，迅速用毛筆刷入清水中備用。切片用毛筆挑選透明的薄片，制臨時(shí)裝片。選片臨時(shí)裝片技術(shù)首先將載玻片、蓋玻片用紗布拭擦干凈，拭擦玻片動(dòng)作要輕，手指用力要均勻，否則易拭破。在載玻片中央，滴加一、二滴清水，然后用毛筆取培養(yǎng)皿中切好的材料置于載玻片上，將蓋玻片輕輕蓋上，蓋蓋玻片時(shí)，用鑷子夾起蓋玻片，使載玻片一邊先放下，接觸一邊水，然后再輕輕放平，以免水中產(chǎn)生氣泡，影響觀察。如仍有氣泡，可用鑷子輕輕加壓蓋玻片，將氣泡趕出

6、。如水分過多，可用濾紙條將水吸干，如水分不足，可在蓋玻片邊沿用滴管加水少許。使材料浸沒水中，蓋玻片緊貼載玻片，這樣裝片制成。將切下的薄片放在載玻片上時(shí)，要先在玻片中央加一滴水，把材料放到水滴中，然后用鑷子夾住蓋玻片，將蓋片的一側(cè)先接觸到載玻片中央的水滴，然后用鑷子頂住蓋片的另一側(cè)，慢慢放下，使蓋玻片與載玻片之間充滿水，如有氣泡，要掀起蓋片，重新放置。徒手制作的切片可以直接在光鏡下觀察，也可以經(jīng)過簡(jiǎn)易的組織化學(xué)染色，以使結(jié)構(gòu)看得更清楚，同時(shí)可觀察到細(xì)胞各部分的化學(xué)成分。染色的方法是將切片放在載玻片上后，用吸水紙吸去多余的水分，滴上一滴染料，經(jīng)過1

7、～2min后，用水沖洗一下，蓋上蓋玻片，在顯微鏡下觀察。1.取材選取待觀察的植物材料初步切取大約3cm長(zhǎng)的小塊再依切片的具體要求，將組織塊修整為0.5cm的材料塊。2.切片以左手夾住材料，用右手平穩(wěn)地握住刀片。切片時(shí)，使刀片與材料的斷面保持平行，刀口自左上方斜向右下方，動(dòng)作要均勻有力。材料與刀片須常以水濕潤(rùn)。切下的薄片立即用毛筆蘸水后粘取移入盛有清水的培養(yǎng)皿內(nèi)。3.選片切片完整，在培養(yǎng)皿中選擇薄而均勻且切面完整的組織切片，撈在載玻片上作臨時(shí)水裝片，然后置于顯微鏡下觀察，如結(jié)構(gòu)能被清晰地顯示出來，則可制成永久保存封片。臨時(shí)裝片制作步驟1、在切片前

8、，要不斷地用水濕潤(rùn)材料和刀片。2、夾持物上端要保持表面平整。3、切片時(shí)，雙手應(yīng)該保持活動(dòng)狀態(tài)，不要使它們緊靠身體或?qū)嶒?yàn)臺(tái)。4、用力不要過猛，不能用刀片