羧基磁珠與氨基磁珠的異同點(diǎn).docx

《羧基磁珠與氨基磁珠的異同點(diǎn).docx》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在教育資源-天天文庫(kù)。

1、常用的氨基磁珠與羧基磁珠的異同點(diǎn)姓名：朱凡軍聯(lián)系方式：摘要：在蛋白的分離純化領(lǐng)域中，傳統(tǒng)的方法有很多，如柱層析分離，膜分離，有機(jī)溶劑提取法，等電點(diǎn)沉淀法，凝膠電泳等方法。在這些方法中都各有優(yōu)缺點(diǎn)，但過(guò)程都比較復(fù)雜，操作步奏比較多，磁珠分離法克服了以上缺點(diǎn)，過(guò)程簡(jiǎn)單，步驟少。常用于蛋白質(zhì)的分離純化的磁珠有氨基磁珠、羧基磁珠、環(huán)氧基磁珠、羥基磁珠等。本文簡(jiǎn)單地?cái)⑹隽税被胖楹汪然胖榈漠愅c(diǎn)關(guān)鍵詞：氨基磁珠、羧基磁珠、蛋白分離純化、一、相同點(diǎn)：1.結(jié)構(gòu)上的相同點(diǎn)：目前所使用的磁珠大多數(shù)都是“核-殼”結(jié)構(gòu)，都是以具有超順磁性的納

2、米微粒作為“核”，再在核的表面包裹上一層高分子有機(jī)化合物和一層功能基層作為“殼”。2.都是納米級(jí)的微球顆粒，在溶液中具有較好的懸浮性，3.在磁場(chǎng)中都會(huì)被磁化，在磁力的作用下聚集，極易與不具有磁性的物質(zhì)分離開來(lái)。4.功能上的相同點(diǎn)：都可以用于蛋白質(zhì)、核酸、寡聚核苷酸等生物物質(zhì)的行分離純化，同時(shí)還可以用于微生物的檢測(cè)，免疫檢測(cè)，靶向給藥等領(lǐng)域。5.在用于提取蛋白過(guò)程中，機(jī)理是相同的，都是利用磁場(chǎng)對(duì)已經(jīng)負(fù)載有目標(biāo)蛋白的超順磁性磁珠的作用進(jìn)行分離。6.具有很好的生物相容性，能夠在體內(nèi)經(jīng)腎臟排出，不參與體內(nèi)的生理反應(yīng)。1.在使用過(guò)程

3、中都不易對(duì)其進(jìn)行離心、過(guò)濾等操作。否則將會(huì)使磁珠失去懸浮性，在每一次使用之前都必須進(jìn)行活化。一、不同點(diǎn)：1.結(jié)構(gòu)上的不同點(diǎn)：在殼層結(jié)構(gòu)中的功能基層所含的官能團(tuán)不一樣，氨基磁珠富含的是氨基（-NH2）,羧基磁珠富含的是羧基（-COOH）2.功能上的不同點(diǎn)：由于富含的功能基團(tuán)不一樣，所以使用的環(huán)境和機(jī)理也不一樣，氨基帶有負(fù)電性，顯堿性，在堿性溶液里能夠穩(wěn)定存在，羧基顯酸性，在酸性溶液里能夠穩(wěn)定存在。在與蛋白質(zhì)偶聯(lián)時(shí)，所使用的有機(jī)試劑也不一樣，機(jī)理如圖氨基磁珠偶聯(lián)過(guò)程中一般使用的是戊二醛，羧基磁珠使用的是EDC，氨基磁珠一般適用

4、于提取偏堿性的蛋白，羧基磁珠適用于提取偏酸性的蛋白。二、需要注意的幾個(gè)環(huán)節(jié)1.使用之前必須進(jìn)行活化，活化試劑必須與磁珠相對(duì)應(yīng)，1.在所使用的溶液或試劑中不能夠帶有具有活性的氨基或羧基，否則會(huì)使磁珠失去結(jié)合位點(diǎn)。2.不能夠?qū)Υ胖檫M(jìn)行離心、過(guò)濾等操作。否則會(huì)使其結(jié)團(tuán)。3.氨基磁珠不適宜在酸性溶液里使用，羧基磁珠不適宜在堿性溶液里使用。