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1、安徽農(nóng)業(yè)科學,JournalofAnhuiAgri.Sci.2011,39(3):1318-1320,1335責任編輯張楊林責任校對傅真治植物組織培養(yǎng)脫毒技術研究進展許傳俊,黃珺梅,曾碧玉,許文江(福建省植物生理生化重點實驗室,福建省亞熱帶植物研究所,福建廈門361006)摘要從莖尖脫毒法、高溫脫毒及病毒抑制劑處理等方面介紹了植物組織培養(yǎng)脫毒常用的方法,闡述了無病毒植株的檢測方法,并對植物組織培養(yǎng)脫毒技術的研究方向進行了展望。關鍵詞莖尖;高溫處理;抑制劑;玻璃化;超低溫;脫毒中圖分類號S184文獻標識碼A文章編號051
2、7-6611(2011)03-01318-03ResearchProgressonVirus-freeTechnologyinPlantTissueCultureXUChuan-junetal(FujianProvincialKeyLabofSubtropicPlantPhysiologyandBiochemisty,F(xiàn)ujianInstituteofSubtropicBotany,Xia-men,F(xiàn)ujian361006)AbstractThecommonvirus-freetechnologyinplanttiss
3、ueculturewereintroducedfromtheviruseliminationofshoottips,hightemperatureviruseliminationandvirusinhibitortreatment,andthenthemethodstodetectthevirus-freeplantswereexpounded,finallytheresearchorien-tationofthevirus-freetechnologyinplanttissueculturewasforecasted
4、.KeywordsShoottips;Hightemperaturetreatment;Inhibitor;Vitrification;Cryopreservation;Virus-free[3]自1952年法國莫勒爾用生長點培養(yǎng)法獲得無病毒植株毒危害提供了有效途徑,有效地解決了品種退化問題。成功后,研究者開始采用植物組培方法對農(nóng)作物及園林花卉莖尖脫毒的關鍵是莖尖大小和脫毒率,因為脫毒的成功開展脫毒研究。目前,已報道了600種以上病毒可引起植物率與所切下莖尖分生組織的大小成反比,為了提高脫毒率必病害。特別是無性繁殖的植
5、物,很容易受到一種或多種病毒須切下足夠小的莖尖分生組織(0.2~0.5mm)。然而,太小的侵染。隨著種質資源交換范圍的擴大,生態(tài)條件的改變,的莖尖分生組織再生成植株很困難,因為再生能力與分生組[4]各種植物侵染病毒的種類越來越多,侵染范圍日益擴大,侵織的大小成正比。席夢利等對宜興百合脫毒培養(yǎng)得出接染程度日趨嚴重。目前,還沒有什么藥物能夠治愈病毒侵染種0.3~0.5mm莖尖脫毒效果最好,對黃瓜花葉病毒(CMV)[5]植物所引起的病毒性病害。但可以通過植物組培脫毒技術的脫毒率達到40%,小于0.3mm的莖尖不能培養(yǎng)成活。來
6、生產(chǎn)脫毒苗加以防治,因此植物組培脫毒技術顯得非常重陸春霞等以直徑大小為0.2mm帶1~2個葉原基的馬鈴薯要。脫毒技術的利用及脫毒良種的推廣,給農(nóng)業(yè)帶來一場新莖尖為外植體,其成活率與脫毒率較高,分別為68%和[6]的技術革命。通過脫毒,使作物恢復種性,增強抗性,生長健56%。董偉清等選取剝離0.5~0.6mm帶有1~2個葉原壯,光合作用增強,明顯提高了作物的產(chǎn)量和品質。如與相基的大蒜莖尖進行培養(yǎng),試管苗脫毒率達90%以上,脫毒效同品種的普通甘薯相比,脫毒甘薯的增產(chǎn)幅度可達20%~果明顯,雖然0.1~0.2mm莖尖脫毒效果
7、好,但接種后難以200%[1]。尤其是該技術在馬鈴薯和甘薯上的應用,對其種[7]成活。Wang等利用莖尖培養(yǎng)脫除葡萄病毒A時,當莖尖植逐步走向規(guī)模化、標準化、區(qū)域化具有重要意義。筆者介為0.2mm時,存活率為75%,脫毒率為12%;而當莖尖為紹了植物組織培養(yǎng)脫毒技術的常用方法,主要介紹了近年發(fā)0.1mm時,存活率為0;莖尖為0.4mm時,存活率為100%,展玻璃化超低溫保存方法在植物脫毒上的應用,旨在為其科[8]而脫毒率為0。0.3~0.4mm莖尖培養(yǎng)對歐李蘋果褪綠斑學利用提供參考。病毒(ACISV)和李矮縮病毒(PD
8、V)的脫毒率分別為71.6%1植物組織培養(yǎng)常用脫毒技術和73.0%[9]。東方百合組培脫毒時,莖尖小于0.3mm,成活1.1莖尖脫毒法莖尖脫毒法的主要原理是病毒在植株率只有20%;小于0.1mm,全部死亡[10]。體內的分布不均勻,隨植株部位及年齡而異,其中莖尖部分1.2高溫脫毒高溫脫毒原理是高溫可抑制病毒的增殖,尤其生長點(0.