大黃酸對耐順鉑A549／cDDP細(xì)胞株的耐藥逆轉(zhuǎn)作用及機(jī)制研究-論文.pdf

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1、·12l8·熱帶醫(yī)學(xué)雜志2013年1O月第13卷第10期JTropMed，Oct．2013，Vo1．13，No．10·實驗研究論著·大黃酸對耐順鉑A549／cDDP細(xì)胞株的耐藥逆轉(zhuǎn)作用及機(jī)制研究陳奕芝，劉錦新，譚爍，李鐵鋒工，廖鏡云。，錢有為(1．深圳市龍崗中心醫(yī)院，廣東深圳518116；2．廣東藥學(xué)院藥物制劑系，廣東廣州510006)摘要：目的觀察大黃酸對耐順鉑(cDDP)A549／cDDP細(xì)胞的耐藥逆轉(zhuǎn)作用并探討其可能的作用機(jī)制。方法用不同濃度的大黃酸與耐藥細(xì)胞A549／cDDP共同培養(yǎng)，通過MTT法檢

2、測細(xì)胞增殖抑制率并確定大黃酸逆轉(zhuǎn)耐藥最佳濃度：將對數(shù)生長期的細(xì)胞隨機(jī)分成2組，對照組分別加入不同濃度的cDDP，實驗組在對照組基礎(chǔ)上加入2~g／ml的大黃酸。同時設(shè)空白對照組，采用MTr法測算細(xì)胞增殖抑制率，計算兩組細(xì)胞cDDP的半數(shù)抑制濃度(Ic)及大黃酸的逆轉(zhuǎn)耐藥倍數(shù)；將對數(shù)生長期的細(xì)胞分為2組，對照組加入2~g／mlcDDP，實驗組在對照組的基礎(chǔ)上加入2~g／ml的大黃酸，同時設(shè)空白對照組，流式細(xì)胞儀檢測各組細(xì)胞P蛋白(P—gP)及多藥耐藥相關(guān)蛋白1(MRP一1)的表達(dá)。結(jié)果隨著大黃酸濃度的增加，其細(xì)

3、胞增殖抑制率不斷增加(P<0．05)，大黃酸逆轉(zhuǎn)耐藥的最佳濃度為2~g／ml；對照組IC為31．642~g／ml，實驗組IC為21．412~g／ml，大黃酸的逆轉(zhuǎn)耐藥倍數(shù)為1．48倍；大黃酸能下調(diào)A549／cDDP細(xì)胞P．gP及MRP的表達(dá)。結(jié)論大黃酸可逆轉(zhuǎn)耐cDDP的A549／cDDP細(xì)胞株的耐藥性，其作用機(jī)制可能與下調(diào)P．gP及MRP一1蛋白表達(dá)有關(guān)。關(guān)鍵詞：大黃酸；A549／cDDP細(xì)胞；順鉑；P蛋白；多藥耐藥相關(guān)蛋白．1中圖分類號：R73—36文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A文章編號：1672．3619(2013)1

4、0—1218—03StudyontheeficiencyandmechanismsofrheinonreveringcisplatinresistanceofhumanlungcancercelllineA549／cDDPCHENYi—zhi。，LIUJin—xin，TANShuo，LITie—feng，LIAOJing—yun，QIANYou—wei(．LonggangDistrictCentr01Hospit01ofShenzhen，Guangdong，Shenzhen518116；2．Departme

5、ntofPharmaceuricolPreparations，GuangdongPharmaceuticalUniversity，Guangdong，Guangzhou510006，China)Abstract：ObjectiveToexploretheeffectandmechanismofrheinonreveringcisplatin(cDDP)resistanceofhumanlungcancercelllineA549／cDDP．MethodsA549／cDDPcellswereculturedw

6、ithdifferentconcentrationsofrhein．MqTassaywasusedtodetectthecellproliferationinhibitionrate，andtodeterminetheoptimalconcentrationofrheinforthereversingdrugresistance．A549／cDDPcellsweredividedintotwogroups．CeUsincontrolgroupwereculturedwithdifferentconcentr

7、ationsofcDDP，andcellsinexperimentalgroupweregiven2~g／mlrheinonthebasisofthecontrolgroup．MTrassaywasusedtodetectthecellproliferationinhibitionrate，andIC50andreversingmuhiplewerecalculated．A549／cDDPcellsweredividedintoblankcontrolgroup，positivecontrolgroup(2

8、~g／mlcDDP)andexperimentalgroup(2~g／mlcDDP+2~g／mlrhein)，after24hours，P-glycoprotein(P-gP)andmulti—drugresistanceprotein一1(MRP．1)wereanalyzedbyflowcytometry．ResultsRheincouldinhibitcellproliferationindosedepend