穩(wěn)態(tài)-瞬態(tài)熒光光譜儀操作說明書.doc

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1、穩(wěn)態(tài)/瞬態(tài)熒光光譜儀(FLS920)操作說明書一、儀器測試原理時(shí)間相關(guān)單光子計(jì)數(shù)原理是FS920測量熒光壽命的工作基礎(chǔ)。時(shí)間相關(guān)單光子計(jì)數(shù)法(time-correlatedsinglephotoncounting)簡稱“單光子計(jì)數(shù)(SPC)法”,其基本原理是,脈沖光源激發(fā)樣品后,樣品發(fā)出熒光光子信號(hào),每次脈沖后只記錄某特定波長單個(gè)光子出現(xiàn)的時(shí)間t,經(jīng)過多次計(jì)數(shù),測得熒光光子出現(xiàn)的幾率分布P(t),此P(t)曲線就相當(dāng)于激發(fā)停止后熒光強(qiáng)度隨時(shí)間衰減的I(t)曲線。這好比一束光(許多光子)通過一個(gè)小孔形成的衍射圖與單個(gè)光子一個(gè)一個(gè)地通過小孔長時(shí)間的累計(jì)可得完全相同的衍射圖的原理是

2、一樣的。二、測量之前需要特別注意的事項(xiàng)1.在切換光源、修改設(shè)置或放樣品之前必須把狹縫(Δλ)關(guān)到最?。?.01nm),否則會(huì)損壞光電倍增管!如果打開樣品室蓋子之后,Em1的SignalRate增加,請停止實(shí)驗(yàn)并立即與工作人員聯(lián)系!2.測量樣品的瞬態(tài)性質(zhì)之前,請用先對樣品的穩(wěn)態(tài)性質(zhì)進(jìn)行表征,了解樣品的激發(fā)光譜與發(fā)射光譜及最佳激發(fā)波長和發(fā)射波長;3.用PMT檢測時(shí),必須等穩(wěn)壓電源CO1的溫度示數(shù)在-15oC以下才可以開始采集數(shù)據(jù);4.狹縫范圍0.01~18nm,調(diào)節(jié)時(shí)注意不要超過其上限;(L1:1mm相當(dāng)于1.8nm,200-900nm);(L2:1mm相當(dāng)于5.4nm,900-

3、1900nm)5.每次設(shè)置完參數(shù)后都要點(diǎn)擊Apply或者回車鍵確定;6.文件保存路徑為:C:data導(dǎo)師自己文件夾7.用專用u盤拷貝數(shù)據(jù)并到另一臺(tái)電腦發(fā)送數(shù)據(jù)8.如實(shí)填寫儀器使用記錄,愛護(hù)儀器。三、穩(wěn)態(tài)熒光光譜的測定1.紫外可見區(qū)穩(wěn)態(tài)熒光光譜的測定步驟1)打開Xe900電源,待其穩(wěn)定,穩(wěn)定后電壓約16-17V,電流25A;2)打開CO1電源和FLS920主機(jī)電源;3)打開計(jì)算機(jī),雙擊桌面上F900圖標(biāo),進(jìn)入工作站4)點(diǎn)擊窗口左上角的按鈕,進(jìn)入SignalRate設(shè)置窗口,先將ExcitationWavelength和Em1Wavelength處的Δλ均設(shè)置為0.01nm

4、,按回車鍵(Enter)或者點(diǎn)擊Apply確認(rèn),再將Source設(shè)置為Xe900,Em1Detector設(shè)置為R955,然后點(diǎn)擊Apply;1)打開樣品室的蓋子,放入待測樣品,然后蓋好;2)調(diào)節(jié)slit到合適大?。ㄒ话?.5mm)。注意:對于未知樣品的最大Em的情況下,Em1的slit第一次只能開一點(diǎn)(一般<0.3mm),以避免熒光最強(qiáng)未知的signalrate大于106,破壞PMT。3)點(diǎn)擊按鈕,選擇EmissionScan,進(jìn)入設(shè)置窗口,在General標(biāo)簽內(nèi)選擇L1,在Excitation標(biāo)簽內(nèi),將MonochromatorWavelength設(shè)置為合適的激發(fā)波長,在E

5、mission1標(biāo)簽內(nèi)根據(jù)待檢測波長將Detector設(shè)置為R928-PA,然后在EmissionScanParameters內(nèi)設(shè)置波長掃描范圍、掃描間隔(step)、停留時(shí)間(DwellTime)和掃描次數(shù)(NumberofScans),設(shè)置完畢后點(diǎn)擊Start即開始測量,得到發(fā)射光譜(熒光光譜);4)單擊按鈕,選擇ExcitationScan,進(jìn)入設(shè)置窗口,在General標(biāo)簽內(nèi)選擇L1,在Emission1欄內(nèi),將MonochromatorWavelength設(shè)置為待檢測波長,Detector根據(jù)待檢測波長設(shè)置為R955,然后在ExcitationScanParamet

6、ers內(nèi)設(shè)置波長掃描范圍、掃描間隔(step)、停留時(shí)間(DwellTime)和掃描次數(shù)(NumberofScans),設(shè)置完畢后點(diǎn)擊Start即開始測量,得到激發(fā)光譜;5)在SignalRate設(shè)置窗口內(nèi)輸入相應(yīng)的ExcitationWavelength和Em1Wavelength值,逐漸加大Δλ,使Em1獲得一個(gè)合適的SignalRate(注意:在設(shè)置后需要按下回車或者Apply按鈕設(shè)置才真正生效,Ref的SignalRate不要超過107,Em1的SignalRate最好不要超過105,千萬別超過106);按照步驟7)進(jìn)行測試,得到發(fā)射光譜。注意:對于已知樣品的最佳Ex

7、、Em波長情況下,可以直接跳過7)與8)步驟,直接進(jìn)入9)。1.近紅外區(qū)穩(wěn)態(tài)熒光光譜的測定步驟如果測量范圍在近紅外區(qū)(900-1900nm),需要用到InGaS檢測器,具體操作步驟和設(shè)置如下:1)打開Xe900電源,待其穩(wěn)定,穩(wěn)定后電壓約16-17V,電流25A;2)打開FLS920主機(jī)電源;3)點(diǎn)擊窗口左上角的按鈕,進(jìn)入SignalRate設(shè)置菜單,將ExcitationWavelength和Em2Wavelength處的Δλ均設(shè)置為0.01之后,Source設(shè)置為Xe,Em2Detector設(shè)置為I

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