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1、課題：大豆異黃酮的提取一、實驗目的：通過單因素試驗及正交試驗,就大豆異黃酮的提取工藝條件進行優(yōu)化,找出最佳的工藝參數(shù)。二、實驗材料與方法：1.1實驗材料：大豆、正己烷、乙醇、標準大豆異黃酮1.2實驗方法：1.2.1材料預處理：取樣,蒸餾水凈化、吸干,105℃烘箱中殺青15~20min,于80℃烘箱烘干至恒重。粉碎,備用。1.2.2大豆異黃酮的提取流程及方法：（1）準確稱取大豆粉,按W：V=1：1取正己烷脫脂，于65℃恒溫水浴鍋中水浴攪拌15min,布氏漏斗過濾2次,棄濾液,濾渣105℃烘烤2h,室溫稱恒重。脫脂2次,干燥備用。（2）取豆粉,按照一定的料液比加入一定濃度的乙醇醇提,置一定
2、溫度恒溫水浴搖床中振蕩浸提一定時間。2000r/min離心10min,上清液保留,沉淀物置于60℃烘箱干燥至恒重為止。沉淀物按上述方法浸提一定的次數(shù)，合并2次提取液。（3）提取液置于60℃恒溫水浴鍋中蒸發(fā)濃縮,至50mL。1.2.3單因素試驗設計以大豆異黃酮的提取率為評價指標,采用乙醇熱浸提法提取大豆異黃酮。本研究以提取過程中的乙醇濃度、料液比(W：V)、提取溫度、提取時間、提取次數(shù)5個可能影響提取效果的因素展開單因素試驗(見表1),以確定相關影響因素及各因素的水平。在單因素試驗結(jié)果的基礎上,確定正交試驗的因素與水平,優(yōu)化出大豆異黃酮提取的最佳工藝條件。表一大豆異黃酮提取的單因素及水平
3、1.2.4根據(jù)單因素試驗結(jié)果采用L9(34)進行正交試驗,以優(yōu)化提取工藝。1.2.5大豆異黃酮的測定(1)標準曲線的制作：準確稱取標準大豆異黃酮1mg,用95%的乙醇定容至100ml,即標準液。分別準確移取標準液2,3,4,5,6,7ml于10ml具塞比色管中,加95%的乙醇至10ml后在261nm處測定其吸光值，得到的大豆異黃酮標準曲線方程。(2)樣品液中大豆異黃酮含量的測定:取一定量樣品液直接在261nm處測定其吸光值,計算異黃酮濃度，再計算異黃酮的提取率。三、實驗結(jié)果與分析
