加校正因子的主成分自身對(duì)照法說(shuō)課講解.doc

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1、加校正因子的主成分自身對(duì)照法一、定義及適用范圍加校正因子的主成分自身對(duì)照法，即以主成分作為對(duì)照的內(nèi)標(biāo)法，校正因子可以在檢測(cè)時(shí)測(cè)定，但需提供雜質(zhì)對(duì)照品，也可在建立方法時(shí)將測(cè)得的校正因子載入質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，供以后常規(guī)檢驗(yàn)使用，無(wú)需長(zhǎng)期提供雜質(zhì)對(duì)照品，但也僅適用于已知雜質(zhì)的控制。建議：校正因子在0.8-1.2時(shí)可不予校正。校正因子計(jì)算公式：f=式中：f—校正因子；As—雜質(zhì)對(duì)照品峰面積或峰高；Cs—雜質(zhì)對(duì)照品濃度；Ar—待測(cè)成分對(duì)照品峰面積或峰高；Cr—待測(cè)成分對(duì)照品濃度。二、校正因子的測(cè)定在校正因子的研究和使用中，標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)、色譜條件、溶劑、檢測(cè)波長(zhǎng)等均是重要的影響因素，研究中需要予以關(guān)注

2、。 2.1?校正因子的測(cè)定需要用到特定雜質(zhì)及主成分的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，這些標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)應(yīng)具備量值準(zhǔn)確的特點(diǎn)，符合標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（對(duì)照品）的相關(guān)要求；其次，確定校正因子的分析方法應(yīng)與最終確定的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)方法一致，色譜條件等需經(jīng)篩選優(yōu)化后確定，如有變更，需考慮對(duì)校正因子的影響，必要時(shí)重新確定；第三，要關(guān)注影響待測(cè)物UV吸收的各種因素，如溶液制備所用溶劑最好與最終確定的流動(dòng)相相同，檢測(cè)波長(zhǎng)最好在特定雜質(zhì)及主成分UV曲線的峰或谷處，避開(kāi)吸收值急劇變化波段，以保證測(cè)定方法具有較好的耐用性，并保持測(cè)定結(jié)果的恒定。 2.2?一般情況下，校正因子可視具體情況通過(guò)如下幾種方法確定： （1）單濃度點(diǎn)測(cè)定：制備適當(dāng)濃度

3、的特定雜質(zhì)對(duì)照品溶液和主成分對(duì)照品溶液，分別進(jìn)樣測(cè)定，照上式計(jì)算，得到校正因子。 （2）多濃度點(diǎn)測(cè)定：制備適當(dāng)?shù)母?、中、低三水平濃度的特定雜質(zhì)對(duì)照品溶液和主成分對(duì)照品溶液（涵蓋定量限、標(biāo)準(zhǔn)限度），分別進(jìn)樣測(cè)定，照上式計(jì)算各校正因子，計(jì)算RSD，求平均值，得到校正因子。 （3）標(biāo)準(zhǔn)曲線法測(cè)定：精密稱取雜質(zhì)對(duì)照品和主成分對(duì)照品，分別制備系列溶液（涵蓋定量限、標(biāo)準(zhǔn)限度），分別進(jìn)樣后，按最小二乘法以進(jìn)樣量對(duì)響應(yīng)值（峰面積等）進(jìn)行線性回歸，求得兩條標(biāo)準(zhǔn)曲線，兩曲線斜率之比即為校正因子。 （4）吸收系數(shù)比值法：對(duì)于UV檢測(cè)器來(lái)講，兩物質(zhì)的相對(duì)校正因子實(shí)際上也是兩物質(zhì)以流動(dòng)相為溶劑，在檢測(cè)波

4、長(zhǎng)處的紫外吸收系數(shù)E1%1cm之比，故可按吸收系數(shù)法測(cè)定法的相關(guān)技術(shù)要求測(cè)定各自吸收系數(shù)，如對(duì)照品級(jí)別的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)、高中低三水平濃度測(cè)定、吸收度介于0.3～0.8之間、至少5臺(tái)不同型號(hào)的UV分光光度計(jì)、2份供試液同時(shí)平行制備測(cè)定、同臺(tái)儀器2份供試液的平行測(cè)定結(jié)果不超過(guò)±0.5%等。測(cè)定兩物質(zhì)的吸收系數(shù)后，經(jīng)統(tǒng)計(jì)分析確定兩物質(zhì)吸收系數(shù)，計(jì)算比值，求得校正因子。 上述各方法中，（1）和（2）法較為簡(jiǎn)捷，可以快捷地量化特定雜質(zhì)與主成分紫外吸收特征的差異，多用于評(píng)估采用主成分自身對(duì)照法定量雜質(zhì)時(shí)是否需要校正。但如采用加校正因子的主成分自身對(duì)照法定量雜質(zhì)，需將標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)賦值信息轉(zhuǎn)化為校正因子

5、固化在質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中，那么校正因子的準(zhǔn)確性非常關(guān)鍵，校正因子的準(zhǔn)確計(jì)算應(yīng)符合更為嚴(yán)格的要求，需要考慮并控制求算校正因子過(guò)程中的各種誤差因素，以及儀器通用性和色譜系統(tǒng)的耐用性等因素，以便使求得的常數(shù)更為準(zhǔn)確并具代表性，此時(shí)采用（3）、（4）法更為適宜，如能考慮到測(cè)定人員、不同試驗(yàn)室因素的影響，會(huì)更加符合常數(shù)求算的基本要求。三、方法驗(yàn)證校正因子的測(cè)定屬于有關(guān)物質(zhì)方法驗(yàn)證中的一個(gè)項(xiàng)目，一般采用有關(guān)物質(zhì)的測(cè)定方法，雜質(zhì)對(duì)照品和主成分對(duì)照品線性濃度從定量限至限度的120%或150%，一般取5-6個(gè)點(diǎn)，使用3臺(tái)不同的儀器測(cè)定，按照上述方法（3），計(jì)算平均校正因子。有關(guān)物質(zhì)方法學(xué)驗(yàn)證主要包括：系

6、統(tǒng)適用性、方法專屬性、精密度（儀器精密度、方法精密度和中間精密度）、線性、準(zhǔn)確度（已知雜質(zhì)的回收試驗(yàn)）、檢測(cè)限和定量限、溶液穩(wěn)定性和耐用性。試驗(yàn)內(nèi)容概念溶液配制份數(shù)進(jìn)樣針數(shù)評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)系統(tǒng)適用性系統(tǒng)適用性是對(duì)分析設(shè)備、電子儀器與實(shí)驗(yàn)操作、測(cè)試樣品等整個(gè)系統(tǒng)進(jìn)行評(píng)估的指標(biāo)空白溶液1份供試液1份進(jìn)1針進(jìn)6針雜質(zhì)峰峰面積RSD≤2.0%，保留時(shí)間RSD≤1.0%；雜質(zhì)峰的拖尾因子≤2.0%，理論塔板數(shù)應(yīng)符合質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的規(guī)定方法專屬性1空白對(duì)照1份輔料溶液（或起始原料、中間體）1份供試液1份每份各1針空白對(duì)照無(wú)干擾；主峰與相鄰雜質(zhì)峰的分離度＞2.0專屬性系指在其他成分（如雜質(zhì)、降解物、輔料等

7、）可能存在下，采用的分析方法能夠正確鑒定檢出被分析物質(zhì)的特性方法專屬性2未破壞樣品、光濕熱10天破壞樣品和酸堿氧化破壞樣品各1份每份供試液進(jìn)1針；空白溶液、酸堿空白及氧化空白各1針降解雜質(zhì)峰與主峰的分離度≥2.0精密度在規(guī)定的測(cè)試條件下，同一均質(zhì)供試品，經(jīng)多次取樣進(jìn)行一系列檢測(cè)所得結(jié)果之間的接近程度（離散程度）儀器精密度在同樣的操作條件下，在較短時(shí)間間隔內(nèi)，由同一分析人員測(cè)定所得結(jié)果的精密度1%對(duì)照液儀器精密度進(jìn)6針?lè)迕娣eRSD≤2.0%供試液儀器精密度進(jìn)6針（同系統(tǒng)適用性）峰面積RSD≤2