超凈工作臺的正確使用方法.doc

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1、超凈工作臺的使用方法：1、接通電源2、提前20分鐘開風機。3、提前30分鐘開臺內(nèi)紫外燈殺菌。注意事項：1、新安裝的或長期未使用的超凈工作臺使用前：須對凈化工作臺及周圍環(huán)境用超凈真空吸塵器或無纖維的工具進行清潔；2、工作臺面上，不要存放不必要的物品，以保持工作區(qū)內(nèi)的潔凈氣流正常流動，不受干擾。3、禁止在工作臺面上記錄，工作時應須盡量避免作明顯擾亂氣流的動作無菌操作注意事項體外培養(yǎng)細胞缺乏抗感染能力，所以防止污染是決定培養(yǎng)成功或失敗的首要條件。即便使用設備完善的實驗室。若實驗者粗心大意，技術操作不規(guī)范,也會導致污染。因而．為在一切操作中為最大可能的保證無菌．每一項工作都必須

2、做到有條不紊和完全靠?！九囵B(yǎng)前準備】在開始實驗前要制定好實驗計劃和操作程序。有關數(shù)據(jù)的計算要事先做好。根據(jù)實驗要求，準備各種所需器材和物品、清點無誤后將其放置操作場所(培養(yǎng)室、超凈臺)內(nèi)，然后開始消毒。這可以避免開始實驗后．囚物品不全往返拿取而增加污染機會?！静僮饕跋尽繜o菌培養(yǎng)室每天都要用0.2%的新潔爾滅拖洗地面—次(拖布要專用)．紫外線照射消毒30-50min，超凈工作臺臺面每次實驗前要用75％酒精擦洗。然后紫外線淌毒30min。在工作臺面消毒時切勿將培養(yǎng)細胞和培養(yǎng)用液同時照射紫外線，消毒時工作臺面上用品不要過多或重疊放置．否則會遮擋射線降低消毒效果?！┎僮饔镁?/p>

3、如移液器、廢液缸、污物盒、試管架等用75%酒精擦洗后置于臺內(nèi)同時紫外線消毒?！鞠词趾椭b】原則上和外科手術相同。平時僅做觀察不做培養(yǎng)操作時，可穿裝細胞培養(yǎng)室內(nèi)紫外線照射30min的清潔工作服。在利用超凈臺工作時，因整個前臂要伸入箱內(nèi)，應著長袖的清潔工作服，并于開始操作前要用75％酒精消毒手。如果實驗過程中手觸及可能污染的物品和出入培養(yǎng)室都要重新用消毒液洗手。進入原代培養(yǎng)室需徹底洗手還要戴口罩、著消毒衣帽?！净鹧嫦尽吭跓o菌環(huán)境進行培養(yǎng)或做其它無菌工作時，首先要點燃酒精燈或煤氣燈。以后一切操作，如按裝吸管帽、打開或封閉瓶口等，都需在火焰近處并經(jīng)過燒灼進行。但要注意：金屬器

4、械不能在為焰中燒的時間過長，以防退火，燒過的金屬鑷要待冷卻后才能挾取組織，以免造成組織損傷。吸取過營養(yǎng)液后的吸管不能再用火焰燒灼，因殘留在吸管頭中營養(yǎng)液能燒焦形成炭膜，再用時會把有害物帶入營養(yǎng)液中。開啟、關閉長有細胞的培養(yǎng)瓶時，火焰滅菌時間要短。防止因溫度過高燒死細胞。另外膠塞過火焰時也不能時間長，以免燒焦產(chǎn)生有毒氣體，危害培養(yǎng)細胞?！静僮鳌窟M行培養(yǎng)時，動作要準確敏捷，但又不必太快，以防空氣流動，增加污染機會。不能用手觸及已消毒器皿，如已接觸，要用火焰燒灼消毒或取備品更換。為拿取方便，工作臺面上的用品要有合理的布局，原則上應是右手使用的東西放置在右側，左手用品在左側，酒

5、精燈置于中央。工作由始至終要保持一定順序性，組織或細胞在未做處理之前，勿過早暴露在空氣中。同樣，培養(yǎng)液在未用前，不要過早開瓶；用過之后如不再重復使用，應立即封閉瓶口直立可增加落菌機會。吸取營養(yǎng)液、PBS、細胞懸液及其它各種用液時，均應分別使用吸管，不能混用，以防擴大污染或導致細胞交叉污染。工作中不能面向操作野講話或咳嗽，以免唾沫把細菌或支原體帶入工作臺面發(fā)生污染。操作前用酒精擦拭超凈臺面及雙手。手或相對較臟的物品不能經(jīng)過開放的瓶口上方，瓶口最易污染，加液時如吸管尖碰到瓶口，則應將吸管丟掉。按照培養(yǎng)基用途分培養(yǎng)基按其特殊用途可分為加富培養(yǎng)基、選擇性培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基。(1

6、)加富培養(yǎng)基。是在培養(yǎng)基中加入血、血清、動植物組織提取液，用以培養(yǎng)要求比較苛刻的某些微生物。(2)選擇性培養(yǎng)基。是根據(jù)某一種或某一類微生物的特殊營養(yǎng)要求或對一些物理、化學抗性而設計的培養(yǎng)基。利用這種培養(yǎng)基可以將所需要的微生物從混雜的微生物中分離出來。(3)鑒別培養(yǎng)基。是在培養(yǎng)基中加入某種試劑或化學藥品，使培養(yǎng)后會發(fā)生某種變化，從而區(qū)別不同類型的微生物。