山東省臨床檢驗實驗室血培養(yǎng)操作指南

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1、山東省臨床檢驗實驗室血培養(yǎng)操作指南（征求意見稿）32目錄1.標本的采集和運送1.1總體要求1.1.1血培養(yǎng)的臨床指征1.1.2血培養(yǎng)的采集時機1.1.3血培養(yǎng)的次數(shù)1.1.4血培養(yǎng)的采血量1.1.5血液標本在需氧瓶和厭氧瓶中的分配1.2血培養(yǎng)標本的采集1.2.1皮膚消毒與防止血培養(yǎng)污染1.2.2標本采集部位1.2.3減少血培養(yǎng)污染的注意事項1.3血培養(yǎng)標本的運送1.4血培養(yǎng)標本的拒收標準1.5培養(yǎng)瓶的選擇1.6血培養(yǎng)的培養(yǎng)周期2.幾種特殊要求的血培養(yǎng)2.1分枝桿菌血培養(yǎng)2.2嬰幼兒血培養(yǎng)2.3導(dǎo)管相關(guān)的血流感染（CRB

2、SI）2.3.1短期外周導(dǎo)管2.3.2中心靜脈導(dǎo)管及靜脈留置口（VAP）2.4感染性細菌性心內(nèi)膜炎2.4.1血培養(yǎng)的采集時機2.4.2皮膚消毒2.4.3需要的血培養(yǎng)數(shù)量2.4.4需要的培養(yǎng)瓶2.4.5血培養(yǎng)所需孵育時間323.血培養(yǎng)結(jié)果的報告方式3.1陽性血培養(yǎng)的分級報告制度3.1.1初步報告3.1.2二級報告3.1.3最終（書面）報告3.2其他報告和記錄4.血培養(yǎng)的污染問題及其鑒別5.血培養(yǎng)的質(zhì)量控制5.1血培養(yǎng)分析前質(zhì)量控制5.1.1病人評估5.1.2血培養(yǎng)標準操作規(guī)程(SOP)的制定和培訓(xùn)5.1.3樣本采集5.1

3、.4樣本運送5.1.5樣本接收和處理5.2血培養(yǎng)分析中質(zhì)量控制5.3血培養(yǎng)分析后的質(zhì)量控制5.3.1報告5.3.2記錄管理5.3.3咨詢附錄一：影響血流感染病原微生物分離的關(guān)鍵因素1.采血量2.血-肉湯比例3.培養(yǎng)基的選擇4.血培養(yǎng)的孵育條件4.1溫度4.2氣體環(huán)境4.3搖動4.4檢測頻率與轉(zhuǎn)種32附錄二：其他幾種特殊要求的血培養(yǎng)1真菌血培養(yǎng)1.1發(fā)生真菌血癥的危險因素1.2真菌血癥檢出的關(guān)鍵因素1.3真菌感染性心內(nèi)膜炎診斷2.接受抗菌藥物治療患者的血培養(yǎng)3.罕見的和苛養(yǎng)病原菌3.1營養(yǎng)變異鏈球菌3.2巴通體3.3布魯

4、桿菌3.4彎曲菌3.5弗朗西斯菌3.6HACEK細菌群3.7螺桿菌3.8軍團菌3.9螺旋體和支原體附錄三：血培養(yǎng)的實驗室安全問題參考文獻32當微生物侵入血液迅速繁殖超出機體免疫系統(tǒng)清除這些微生物的能力時形成菌血癥或真菌血癥（統(tǒng)稱血流感染），并可感染血管外組織,屬臨床醫(yī)學(xué)急癥,應(yīng)盡快采集血液進行培養(yǎng)。資料顯示，菌血癥或真菌血癥發(fā)病率近10年來持續(xù)增加，2007年美國共報告菌血癥發(fā)生66萬例[1]，在各種感染中居首位，且死亡率高（20%~50%）。血培養(yǎng)是采集患者血液標本并接種到培養(yǎng)瓶中，用以發(fā)現(xiàn)、識別引起菌血癥或真菌血癥

5、的病原微生物，是診斷菌血癥和真菌血癥的基本而重要的方法。血培養(yǎng)結(jié)果對感染性疾病的診斷、治療和預(yù)后都有極為重要的臨床意義。1.標本的采集和運送1.1總體要求1.1.1血培養(yǎng)的臨床指征：患者出現(xiàn)以下一種或同時具備幾種臨床表現(xiàn)時可作為血培養(yǎng)的重要指征：①發(fā)熱（≥38℃）或低溫（≤36℃），以間歇馳張型多見，革蘭陰性桿菌，如大腸埃希菌引起的感染可見雙峰熱；②寒戰(zhàn)；③白細胞增多（>10.0×109/L，特別是有“核左移”時）；④粒細胞減少（<1.0×109/L）；⑤血小板減少；⑥皮膚、黏膜出血，常見于溶血性鏈球菌感染的菌血癥，傷

6、寒病人第4~10天可出現(xiàn)玫瑰疹，斑疹傷寒第4~6天可出現(xiàn)暗紅色斑丘血疹；⑦昏迷；⑧多器官衰竭；⑨血壓降低；⑩呼吸加快（呼吸率>20/分或CO2分壓<32mmHg）；以及肝脾腫大；關(guān)節(jié)疼痛；C反應(yīng)蛋白、內(nèi)毒素、降鈣素原升高等。對新生兒可疑菌血癥,還應(yīng)同時做尿液和腦脊液培養(yǎng)。老年菌血癥患者可能不發(fā)熱或體溫不低，如伴有身體不適、肌痛或卒中，可能是感染性心內(nèi)膜炎的重要指征。1.1.2血培養(yǎng)的采集時機：只要懷疑患者有血流感染的可能，在考慮使用抗菌藥物之前，都應(yīng)立即采集血培養(yǎng)標本。若患者已行抗菌藥物治療，則應(yīng)選擇含有抗菌藥物吸附物

7、的培養(yǎng)瓶，并在下一次抗菌藥物應(yīng)用前采血培養(yǎng)。細菌通常在寒戰(zhàn)和發(fā)燒前1小時入血，此時為采集血培養(yǎng)標本進行病原菌培養(yǎng)的最佳時機。1.1.3血培養(yǎng)的次數(shù)：要求：對懷疑菌血癥、真菌血癥的成人患者，推薦同時或短時間間隔（30~60分鐘）從不同部位（如雙臂）采集2～3套血培養(yǎng)標本，即“雙瓶雙側(cè)”。32至少做到“雙側(cè)雙瓶”。如有必要，可同時或短時間間隔內(nèi)從下肢靜脈采血接種第三套培養(yǎng)瓶。只有在疑似感染性心內(nèi)膜炎或?qū)Ч芟嚓P(guān)性感染患者的連續(xù)性菌血癥時在不同時間點采血才有必要，除疑似感染性心內(nèi)膜炎或?qū)Ч芟嚓P(guān)性感染患者（詳見3.4、3.5），

8、在采集血培養(yǎng)后的2至5天內(nèi)，不需要重復(fù)采集血培養(yǎng)。嬰幼兒患者，需要同時采集2次(不同部位)血培養(yǎng)標本。說明：以一個需氧瓶和一個厭氧瓶為一套血培養(yǎng)，作為常規(guī)血培養(yǎng)組合。所謂“雙瓶雙側(cè)”，是指從一個部位采血接種一套培養(yǎng)瓶，再從另一部位采血接種另一套培養(yǎng)瓶。所謂“雙側(cè)雙瓶”，是指從一個部位采血接種一個需氧瓶，再從另一部位采血接種另一個厭