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1、植物組織培養(yǎng)學(xué)扦插嫁接壓條植物組織培養(yǎng)是二十世紀(jì)發(fā)展起來的新技術(shù)，近三十年來由于組織培養(yǎng)基礎(chǔ)理論研究的深入，發(fā)展極為迅速，發(fā)表的文獻(xiàn)浩如煙海，幾乎以植物為研究對象的各個分支學(xué)科都在廣泛進(jìn)行組織培養(yǎng)。植物組織培養(yǎng)簡介在人工培養(yǎng)基上，離體培養(yǎng)植物的器官、組織、細(xì)胞和原生質(zhì)體，并使其生長、增殖、分化以及再生植株的技術(shù)。組織培養(yǎng)1、植物組織培養(yǎng)的原理是什么？植物細(xì)胞具有全能性，即生物體的細(xì)胞，具有使后代細(xì)胞形成完整個體的能力。思考：植物組織培養(yǎng)過程示意圖2、上面的示意圖中還有什么地方不夠完善的？沒有進(jìn)行滅菌處理，試管也沒有做密封等。3、結(jié)合錄像外植體滅菌與接種操作，
2、談?wù)勗鯓宇A(yù)防組織 培養(yǎng)污染？（一）防止外植體帶菌（二）保證培養(yǎng)基及接種器具徹底滅菌（三）操作人員嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作規(guī)程（四）保證接種與培養(yǎng)環(huán)境清潔離體的植物器官、組織、細(xì)胞脫分化愈傷組織再分化根芽植物體植物組織培養(yǎng)過程植物組織培養(yǎng)條件含有全部營養(yǎng)成分的培養(yǎng)基、一定的溫度、空氣、無菌環(huán)境、適合的PH、適時光照等。愈傷組織植物細(xì)胞全能性的表達(dá)脫分化：將來自已分化組織的已停止分裂的細(xì)胞從植物體部分的抑制性影響下解脫出來，恢復(fù)細(xì)胞的分裂活性。再分化:經(jīng)脫分化的組織或細(xì)胞在一定的培養(yǎng)條件下可有轉(zhuǎn)變?yōu)楦鞣N不同細(xì)胞類型的能力。MS固體培養(yǎng)基成分及比例一、污染的定義指在組織培
3、養(yǎng)過程中，培養(yǎng)容器內(nèi)滋生菌斑，使培養(yǎng)材料不能正常生長發(fā)育，從而導(dǎo)致培養(yǎng)失敗的現(xiàn)象。1、細(xì)菌污染：菌斑呈粘液狀，界限比較明顯，一般接種后1－2天即能發(fā)現(xiàn)。主要是大腸桿菌和鏈球菌二、污染原因2、真菌污染：菌斑呈絨毛狀、絮狀，界限不明顯，伴有不同顏色的孢子接種后3－10天才能發(fā)現(xiàn)。主要是霉菌污染。二、污染原因正常苗污染苗1、外植體帶菌2、培養(yǎng)基及接種器具滅菌不徹底3、接種操作時帶入4、環(huán)境不清潔三、污染途徑四、污染的預(yù)防措施（一）防止外植體帶菌（二）保證培養(yǎng)基及接種器具徹底滅菌（三）操作人員嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作規(guī)程（四）保證接種與培養(yǎng)環(huán)境清潔（一）防止外植體帶菌1、選
4、擇好外植體采集時期和采集部位外植體采集以春秋為宜優(yōu)先選擇地上部分作為外植體陰雨天勿采，晴天下午采采前噴殺蟲劑、殺菌劑或套塑料袋2、室內(nèi)或無菌條件下進(jìn)行預(yù)培養(yǎng)（一）防止外植體帶菌3、外植體嚴(yán)格滅菌滅菌效果試驗多次滅菌和交替滅菌（一）防止外植體帶菌（二）保證培養(yǎng)基及接種器具徹底滅菌1、分裝時，注射器勿與瓶接觸，培養(yǎng)基勿粘瓶口2、檢查封口膜是否有破損看錄像培養(yǎng)基的制備并思考制備的過程要注意些什么？（二）保證培養(yǎng)基及接種器具徹底滅菌3、扎瓶口要位置適當(dāng)、松緊適宜4、保證滅菌時間和高壓鍋內(nèi)溫度5、接種工具用前徹底滅菌6、工作服、口罩、帽子等布質(zhì)品定期進(jìn)行濕熱滅菌試評價
5、下列操作正確與否（四）、保證環(huán)境的清潔1、污染瓶經(jīng)高壓滅菌后再清潔2、接種環(huán)境定期熏蒸消毒、紫外燈照射或用臭氧滅菌和消毒3、定期對培養(yǎng)室消毒、防止高溫植物組織培養(yǎng)特點①培養(yǎng)條件可以人為控制組織培養(yǎng)采用的植物材料完全是在人為提供的培養(yǎng)基質(zhì)和小氣候環(huán)境條件下進(jìn)行生長，擺脫了大自然中四季、晝夜的變化以及災(zāi)害性氣候的不利影響，且條件均一，對植物生長極為有利，便于穩(wěn)定地進(jìn)行周年培養(yǎng)生產(chǎn)。②生長周期短，繁殖率高植物組織培養(yǎng)是由于人為控制培養(yǎng)條件，根據(jù)不同植物不同部位的不同要求而提供不同的培養(yǎng)條件，因此生長較快。另外，植株也比較小，往往20—30d為一個周期。所以，雖然植
6、物組織培養(yǎng)需要一定設(shè)備及能源消耗，但由于植物材料能按幾何級數(shù)繁殖生產(chǎn)，故總體來說成本低廉，且能及時提供規(guī)格一致的優(yōu)質(zhì)種苗或脫病毒種苗。③管理方便，利于工廠化生產(chǎn)和自動化控制植物組織培養(yǎng)是在一定的場所和環(huán)境下，人為提供一定的溫度、光照、濕度、營養(yǎng)、激素等條件，既利于高度集約化和高密度工廠化生產(chǎn)，也利于自動化控制生產(chǎn)。它是未來農(nóng)業(yè)工廠化育苗的發(fā)展方向。它與盆栽、田間栽培等相比省去了中耕除草、澆水施肥、防治病蟲害等一系列繁雜勞動，可以大大節(jié)省人力、物力及田間種植所需要的土地。思考：以下培養(yǎng)基出現(xiàn)的現(xiàn)象反應(yīng)了什么問題？激素配比模式生長素與細(xì)胞分裂素的比例決定著發(fā)育的
7、方向，是愈傷組織、長根還是長芽。如為了促進(jìn)芽器官的分化，應(yīng)除去或降低生長素的濃度，或者調(diào)整培養(yǎng)基中生長素與細(xì)胞分裂素的比例。高利于根和愈傷組織的形成生長素/細(xì)胞分裂素適中有利于根芽的分化低有利于芽的形成生長調(diào)節(jié)物質(zhì)的使用甚微，一般用mg／L表示濃度。在組織培養(yǎng)中生長調(diào)節(jié)物質(zhì)的使用濃度，因植物的種類、部位、時期、內(nèi)源激素等的不同而異，一般生長素濃度的使用為0.05-5mg／L，細(xì)胞分裂素0.05—10mg／L?；钚蕴康膽?yīng)用在培養(yǎng)基中加入0.3%活性炭，還可降低玻璃苗的產(chǎn)生頻率，對防止產(chǎn)生玻璃苗有良好作用。活性炭在胚胎培養(yǎng)中也有一定作用，如在葡萄胚珠培養(yǎng)時向培養(yǎng)
8、基加入0.1%的活性炭，可減少組織變褐和培養(yǎng)基變色，
