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1、延胡索的鎮(zhèn)痛作用延胡索的鎮(zhèn)痛實驗實驗目的:掌握鎮(zhèn)痛藥的實驗法觀察延胡索的鎮(zhèn)痛作用掌握實驗操作手法掌握常用動物疼痛模型的制備方法實驗原理:1.延胡索能行氣活血止痛,其鎮(zhèn)痛有效成分是延胡索乙素。熱板法是篩選鎮(zhèn)痛藥的經(jīng)典方法:小白鼠的足部受熱板刺激而產(chǎn)生疼痛時,就發(fā)生舔后足的特殊反應。從接觸熱板到舔后足所需要的時間作為痛閾值,以此為觀察指標。2.腹膜有廣泛的感覺神經(jīng)分布,把醋酸等化學刺激物注入腹腔,可使小鼠很快產(chǎn)生疼痛反應,表現(xiàn)為腹部兩側(cè)內(nèi)凹、軀體扭曲和后肢伸展,成為扭體反應。實驗材料實驗動物:雌性小白鼠20只實驗器材:1ml灌胃器、電子秤、鼠籠、溫控熱板儀、鑷子、手
2、套實驗藥品:延胡索水煎液(0.2ml/10g)、生理鹽水(0.2ml/10g)、醋酸、苦味酸實驗方法:A:熱板法B:化學刺激法熱板法:1.將溫控熱板儀調(diào)至55℃2.篩選并測定正常痛閾:將小鼠放入熱板儀內(nèi),密切觀察小鼠反應,以舔后足為痛覺指標。記錄痛閾時間值(從小鼠放入熱板鎮(zhèn)痛儀到出現(xiàn)舔后足)。每只小鼠測痛閾2次(間隔5min),取其平均值為正常痛閾值(即藥前痛閾),記下時間t1。凡在30s內(nèi)不舔后足或痛閾小于5s的小鼠舍棄,每實驗小組篩選合格小鼠20只,并將其隨機分成2組,每組都標記好編號1-10.3.給藥:第一組中給給藥組1-5號用延胡索水煎液(0.2ml/1
3、0g)進行灌胃,對照組6—10號用生理鹽水(0.2ml/10g)進行灌胃,并記錄給藥時間。4.測痛閾變化值:給藥后15min、30min各測一次痛閾,對60s內(nèi)不出現(xiàn)舔足的小鼠應立即取出,痛閾按60s計算。(記錄下痛覺時間t2)數(shù)據(jù)的記錄與處理組別給藥前平均痛閾值t1t2⊿t給藥后平均痛閾值鎮(zhèn)痛百分率t1t2⊿t(%)12345678910數(shù)據(jù)的記錄與處理注意事項:室溫以15~20℃為宜,過低則小鼠反應遲鈍,過高則過于敏感,而引起跳躍,影響實驗的準確性。正常小鼠一般放在燒杯后10~15s內(nèi)出現(xiàn)不安,舉前肢,舔后足,踢后肢,跳躍等現(xiàn)象。這些動作均不作為疼痛指標,只
4、有舔后足才作為疼痛的指標。一般不選用雄鼠,因為雄鼠陰囊可觸及燒杯底部,易呈現(xiàn)敏感反應,影響結(jié)果。化學刺激法1.另一組1—5號小白鼠用延胡索水煎液(0.2ml/10g)進行灌胃,對照組6—10號用生理鹽水(0.2ml/10g)進行灌胃,記錄給藥時間。2.給藥20min,各小鼠均腹腔注射醋酸0.2ml溶液,觀察20min內(nèi)各組出現(xiàn)扭體鼠數(shù)和扭體次數(shù)。數(shù)據(jù)的記錄與處理組別藥物劑量(ml)扭體鼠數(shù)鎮(zhèn)痛百分率(次)(%)12345678910數(shù)據(jù)的記錄與處理注意事項:1.醋酸溶液宜新鮮配制。2.室溫不能低于10攝氏度,否則不易發(fā)生扭體反應。3.給藥組比對照組減少扭體發(fā)生率
5、50%以上才能認為有鎮(zhèn)痛效力。4.小鼠體重輕,扭體反應發(fā)生率低。謝謝觀賞延胡索罌粟科植物延胡索(Corydalisyanhusuo)的干燥塊莖.味辛、苦,性溫。歸心、肝、肺經(jīng)。功效活血、行氣、止痛。臨床用名有延胡、延胡索、元胡、玄胡索、醋延胡索。原植物生于低海拔曠野草地、丘地林緣。喜溫暖濕潤氣候,耐旱、怕旱、怕澇、怕強光射,以地勢高燥、向陽、排水良好、富含腐殖質(zhì)的中性或微酸性砂質(zhì)壤土或壤土最宜生長延胡索的鎮(zhèn)痛延胡索是臨床最常用的止痛中藥?,F(xiàn)已將其制成各種劑型,廣泛用于各種病癥,尤其是以疼痛為主的病癥。延胡索的醇制浸膏、醋制浸膏、散劑等均有明顯鎮(zhèn)痛作用。延胡索乙素
6、鎮(zhèn)痛作用最強,丑素次之,甲素較弱。延胡索乙素為鎮(zhèn)痛主要有效成分,其鎮(zhèn)痛作用較嗎啡弱低但優(yōu)于復方阿司匹林,其效價為阿片的1/10,作用持續(xù)2小時。對鈍痛的作用優(yōu)于銳痛。與嗎啡等麻醉性鎮(zhèn)痛藥相比副作用少而安全,沒有成癮性。鎮(zhèn)痛時對呼吸沒有明顯抑制,也無便秘等副作用。醋制后,使游離的生物堿與醋酸結(jié)合生成醋酸鹽而易溶于水。使得醋制延胡索飲片煎液中有效成分的溶出率顯著提高,從而增強了止痛效果。因此,延胡索治療諸痛證,當以醋制為宜