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1、豬繁殖與呼吸綜合征病毒畢業(yè)論文1PRRSV病原學(xué)1.1基因組結(jié)構(gòu)PRRSV屬于尼多病毒目、動(dòng)脈炎病毒科、動(dòng)脈炎病毒屬，為一種有囊膜的單股正鏈RNA病毒，長(zhǎng)度大概為15.0kb，其中包括9個(gè)開放讀碼框(openreadingframes,ORFs)。PRRSV的結(jié)構(gòu)蛋白由ORF2~7編碼，這些序列編碼6個(gè)具有帽子結(jié)構(gòu)和poly尾的亞基因mRNA，并且這些mRNA有共同的3’端的亞基因組，形成嵌套式結(jié)構(gòu)，同時(shí)它們均獲得來自PRRSV基因組5’端非編碼區(qū)的引導(dǎo)序列[8]（圖1-1）。根據(jù)基因的差異，PRRSV大致分為北美
2、型和歐洲型。這兩種基因型在全世界廣泛傳播，它們的基因組序列同源性約為40%，兩者的血清型明顯不同[9]，并且每個(gè)基因型的不同分離株同時(shí)存在約20%的異源性[10、11]。PRRSV能通過隨機(jī)突變和基因重組不斷演化[12]，其中由ORF5編碼的GP5蛋白是變異性最強(qiáng)的結(jié)構(gòu)蛋白，美洲型和歐洲型之間的氨基酸同源性只有50%~55%[13]。1.2PRRSV蛋白ORF1a和ORF1b編碼病毒的復(fù)制酶蛋白，而結(jié)構(gòu)蛋白由GP2a，GP2b，GP3，GP4，GP5，M和N蛋白組成。其中GP2a，GP3，和GP4是通過二硫鍵連接形
3、成異源三聚體并且糖基化的小囊膜蛋白[14]。GP5，M和N蛋白為主要結(jié)構(gòu)蛋白，GP5為糖基化蛋白，它在病毒感染上起到了重要的作用；M和N蛋白為非糖基化蛋白，其中M蛋白在病毒的裝配和增殖方面起著重要的作用[15]。1.3PRRSV的理化特性5圖1-1PRRSV的基因組結(jié)構(gòu)及亞基因組表達(dá)模式示意圖Fig.1-1SchematicdiagramofthegenomeorganizationandexpressionofPRRSV注：圖中標(biāo)明了復(fù)制酶基因（ORFs1a和1b），結(jié)構(gòu)蛋白基因（ORFs2a，2b，3，4，5，
4、6和7）和前導(dǎo)序列(L)。Note:Thereplicasegene(ORFs1aand1b),thestructuralproteingenes(2a,2b,3,4,5,6,and7),andtheleader(L)areindicated.PRRSV對(duì)氯仿、乙醚等有機(jī)溶劑較敏感。pH高于7或低于5時(shí)感染力迅速降低，在pH6.5~7.5之間相對(duì)穩(wěn)定[16]。PRRSV對(duì)溫度同樣表現(xiàn)敏感，經(jīng)20℃6d,37℃10~24h或者56℃15~20min處理后病毒滴度下降10倍；在37℃48h或56℃45min均能將病毒滅
5、活，因此PRRSV在室溫環(huán)境中存活時(shí)間較短，所以用于分離病毒的血清和組織樣品應(yīng)保存在-20℃或者4℃條件下，以保護(hù)病毒的感染性（在4℃存放時(shí)間不能超過7d）。2PRRSV致病機(jī)制2.1PRRSV的感染巨噬細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞是PRRSV感染的主要靶細(xì)胞。Halbur等[17]認(rèn)為只要存在巨噬細(xì)胞的器官和組織，都有可能導(dǎo)致PRRSV感染的發(fā)生。Li等[18]報(bào)道高致病性的PRRSV分離株JXwn06有可能向上皮細(xì)胞擴(kuò)散的趨勢(shì)。已有資料表明，PRRSV首先和豬肺泡巨噬細(xì)胞上的受體結(jié)合，通過硫酸乙酰肝素(Heparinsulp
6、hate,HS)吸附PRRSV到PAMs,通過唾液酸粘附素(Sialoadhesin,Sn)介導(dǎo)PRRSV的內(nèi)吞,CD163可能協(xié)助Sn內(nèi)吞、病毒脫衣殼和將基因組RNA釋放到細(xì)胞質(zhì)中[19-22]。PRRSV感染后巨噬細(xì)胞的大量破壞，以致大為降低其對(duì)異物的非特異性吞噬清除功能，同時(shí)PAMs依賴于超氧負(fù)離子殺菌的功能也隨之下降，進(jìn)而易繼發(fā)其它細(xì)菌和病毒感染機(jī)體而加重疾病的癥狀。研究發(fā)病機(jī)理的另一個(gè)領(lǐng)域是PRRSV和胎兒的相互作用，大約在經(jīng)過90d5妊娠期后病毒可以穿過胎盤感染胎兒。到目前為止,只有有限的細(xì)胞類型能夠在
7、體外使PRRSV生長(zhǎng)，包括豬原代肺泡巨噬細(xì)胞(PAM)、PIMs、MA-104(非洲綠猴腎細(xì)胞)和其衍生物(Marc-145和CL-2621細(xì)胞系)、CRL-1171細(xì)胞系、公豬的睪丸細(xì)胞、豬脾巨噬細(xì)胞、血液源單核細(xì)胞和腦小膠質(zhì)細(xì)胞[23]。PRRSV的分離株不同，使其適合生長(zhǎng)的細(xì)胞也不同。有些毒株僅生長(zhǎng)在一種細(xì)胞上,有些則可以生長(zhǎng)在多種細(xì)胞上。病毒經(jīng)過5~7代的傳代培養(yǎng)后，感染滴度一般為105~107TCID50/mL。PRRSV在細(xì)胞中呈殺細(xì)胞性復(fù)制，引起典型的細(xì)胞病理變化(CPE),但也有極個(gè)別毒株在細(xì)胞上不
8、出現(xiàn)CPE。2.2PRRSV的持續(xù)性感染PRRSV的持續(xù)性感染是造成嚴(yán)重危害的一個(gè)重要特征。有研究結(jié)果證明，PRRSV引起的病毒血癥在豬群中可持續(xù)6~7周，甚至長(zhǎng)達(dá)16個(gè)月。另有研究表明，PRRSV在感染后63~132d都能在扁桃體、淋巴結(jié)（肺和非淋巴器官除外）檢測(cè)到病毒，并且病毒在易感豬群中容易傳播，直到260d血清才成為陰性[24]。形成持續(xù)性感染的原因
