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1、《我喜歡》PPT課件聽音樂自由朗讀課文,讀出作者“我喜歡”的心情。草莓殷勤炫耀山巒遂心清澈幼稚鳳凰寧靜淡遠(yuǎn)稻香翻騰你喜歡什么?試著仿照課文寫一寫。提示:你喜歡什么?它在哪?什么樣子?你看到它時是在什么時候,什么心情(比如:聯(lián)想到了什么?)我喜歡月夜的朦朧。朦朧是夜色的主題,是大自然的靈氣,是造物主的杰作。大自然需要朦朧來裝點畫屏。我喜歡冬天,冬天里,拿著糖葫蘆去打雪仗,沒人說你是貪玩的饞鬼。冬天的被窩最暖和,你可以整天不疊被子,隨時躲進(jìn)去,聽不見媽媽說你懶。當(dāng)世界變成白色時,你“詩性大發(fā)”,胡亂吟詠一通,哥哥不會
2、罵你歪才。我喜歡在夕陽西下時,依在樹旁,看云兒在晚霞里翩翩起舞,看斜陽被云海吞沒,想象著世界另一面的黎明,任憑思緒穿過云層追逐落日。我喜歡做夢,喜歡夢里歡樂的享受。我會夢見一個大大的月亮,橘紅色的晚霞簇?fù)碇饺降厣v。這時我會急跑著跟著它,伸出雙手奔向它。我喜歡在下雨時不撐傘,不穿雨鞋,褲管卷得高高的,任憑雨點落在我的頭上,這是大自然送給我的無言的禮物。但是最好雨不大不小,不然會有人罵你是神經(jīng)病。我喜歡看書,在書籍里,我更喜歡那些泛黃的線裝書,那陳舊的紙里蘊含著一種古典的美,好像一脈優(yōu)秀的傳統(tǒng)。歷史的興亡,人物
3、的虛幻,惟有思想的智慧長存。我喜歡生活中的酸甜苦辣,它是我的一份surprise!也是我的人生新的一頁!第十一章生物素-親合素放大技術(shù)第二節(jié)親合素、鏈霉親合素的理化性質(zhì)與標(biāo)記一、理化特性二、親合素(或鏈酶親合素)的標(biāo)記第一節(jié)生物素的理化性質(zhì)與標(biāo)記一、活化生物素二、活化生物素標(biāo)記蛋白質(zhì)第三節(jié)生物素-親合素系統(tǒng)的特點一、靈敏度 二、特異性三、穩(wěn)定性 四、適用性五、其他思考題小結(jié)第四節(jié)生物素-親合素系統(tǒng)的應(yīng)用一、生物素-親合素系統(tǒng)基本類型及原理二、生物素-親合素系統(tǒng)在酶免疫測定中的應(yīng)用三、生物素-親合素
4、系統(tǒng)在熒光免疫技術(shù)中的應(yīng)用四、生物素-親合素系統(tǒng)在放射免疫測定中的應(yīng)用五、生物素-親合素系統(tǒng)在分子生物學(xué)中的應(yīng)用維生素H動、植物組織中廣泛分布,卵黃和肝含量高M(jìn)W244.31kD.I環(huán)為咪唑酮環(huán),可與親合素結(jié)合Ⅱ環(huán)為噻吩環(huán),C2上戊酸側(cè)鏈的未端羧基是結(jié)合生物大分子的唯一結(jié)構(gòu)I咪唑酮環(huán)Ⅱ噻吩環(huán)羧基第一節(jié)生物素理化性質(zhì)與標(biāo)記一、活化生物素生物素側(cè)鏈的末端羧基經(jīng)化學(xué)修飾后制成帶各種活性基團(tuán)的衍生物-活化生物素(生物素化衍生物)生物素活化活化生物素易與抗原、抗體酶及核酸分子中相應(yīng)基團(tuán)偶聯(lián)形成生物素化標(biāo)記物標(biāo)記蛋白質(zhì)氨
5、基的活化生物素標(biāo)記蛋白質(zhì)醛基的活化生物素標(biāo)記蛋白質(zhì)巰基的活化生物素標(biāo)記核酸的活化生物素活化生物素標(biāo)記蛋白質(zhì)氨基的活化生物素BNHS分子可與蛋白質(zhì)賴氨酸的氨基形成肽鍵BNHS適用標(biāo)記抗體和中性或偏堿性的蛋白質(zhì)生物素N-羥基丁二酰胺碳二亞胺生物素羥基琥珀酰亞胺酯(BNHS)如何減小空間位阻?長臂活化生物素(BCNHS):生物素和N-羥基丁二酰亞胺之間添加了兩個6-氨基已糖分子基團(tuán),形成連結(jié)臂,生物素與大分子基團(tuán)的距離標(biāo)記蛋白質(zhì)醛基的活化生物素生物素酰肼(BHZ):水合肼與生物素的合成物主要用于標(biāo)記偏酸性糖蛋白肼化生物
6、胞素(BCHZ):生物素與賴氨酸連接后,再與無水肼反應(yīng)而成。除醛基外,BCHZ還可標(biāo)記氨基標(biāo)記蛋白質(zhì)巰基的活化生物素馬來酰亞胺-丙酰-生物胞素(MPB)能特異地與蛋白質(zhì)巰基結(jié)合的活化生物素標(biāo)記核酸的活化生物素光生物素(photobiotin)側(cè)鏈上連接的芳香基疊氮物基團(tuán),經(jīng)光照后,變?yōu)榉枷慊趸?,可直接與腺嘌呤氨基結(jié)合,形成B-核酸探針生物素脫氧核苷三磷酸(Bio-dUTP)作為TTP的結(jié)構(gòu)類似物,可采用缺口移位法摻入到雙鏈DNA中。BNHS和BHZ可直接標(biāo)記核酸,但對堿基配對有影響?;罨锼赝ㄟ^側(cè)鏈與蛋白分
7、子連接;一個蛋白分子可被多個生物素標(biāo)記-多價性;對BNHS多標(biāo)記抗體,BHZ則多標(biāo)記微酸性抗原;抗原、抗體標(biāo)記后活性不變;可對標(biāo)記材料(如酶)標(biāo)記:堿性磷酸酶標(biāo)記后活性將降低;二、生物素標(biāo)記蛋白質(zhì)選擇活化生物素:依抗原或抗體分子所帶可標(biāo)記基團(tuán)的種類(氨基、醛基或巰基)以及分子的酸堿性;控制生物素:蛋白質(zhì)比例生物素:IgG用量比(mg/mg)宜為2:1,IgG應(yīng)用濃度0.5~5μg/ml;生物素1~3個/Ag,3~5個/Ab;使用交聯(lián)臂減少空間阻力第二節(jié)親合素、鏈霉親合素的理化性質(zhì)與標(biāo)記親合素(avidin,AV)
8、和鏈霉親合素(streptavidin,SA)是生物素的天然特異性結(jié)合物。而且,二者均為大分子蛋白,因此幾乎所有用于標(biāo)記的物質(zhì)均可以同親合素(AV)或鏈酶親合素(SA)結(jié)合。結(jié)構(gòu)四亞基糖蛋白四肽鏈蛋白無糖基PI10.56結(jié)合位色氨酸色氨酸生物素44Ka10151015活性13~1515~18親合素(A)鏈霉親合素(SA)一、理化特性二、親合素/鏈霉親合素標(biāo)記標(biāo)記物:酶、膠