高中生物實(shí)驗(yàn)(必考)超詳細(xì).docx

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1、實(shí)驗(yàn)一觀察DNA、RNA在細(xì)胞中的分布（必修一P26）一．實(shí)驗(yàn)?zāi)康模撼醪秸莆沼^察DNA和RNA在細(xì)胞中分布的方法二．實(shí)驗(yàn)原理：1．甲基綠和吡羅紅兩種染色劑對DNA和RNA的親和力不同，甲基綠使DNA呈現(xiàn)綠色，吡羅紅使RNA呈現(xiàn)紅色。利用甲基綠、吡羅紅混合染色劑將細(xì)胞染色，可以顯示DNA和RNA在細(xì)胞中的分布。2．鹽酸能夠改變細(xì)胞膜的通透性，加速染色劑進(jìn)入細(xì)胞，同時使染色休中的DNA和蛋白質(zhì)分離，有利于DNA與染色劑結(jié)合。三．方法步驟：操作步驟注意問題解釋取口腔上皮載玻片要潔凈，滴一滴質(zhì)量分防止污跡干擾觀察效果細(xì)胞制片數(shù)為0.9%的NaCl溶液保持細(xì)胞原有形態(tài)用消毒牙簽在自己

2、漱凈的口腔內(nèi)側(cè)壁上輕刮幾下取細(xì)胞消毒為防止感染，漱口避免取材失敗將載玻片在酒精燈下烘干固定裝片（細(xì)胞已死亡）水解將烘干的載玻片放入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為8%改變細(xì)胞膜的通透性，加速染色劑進(jìn)的鹽酸溶液中，用300C水浴保溫5min入細(xì)胞，促進(jìn)染色體的DNA與蛋白質(zhì)分離而被染色沖冼涂片用蒸餾水的緩水流沖洗載玻片10S洗去殘留在外的鹽酸染色滴2滴吡羅紅甲綠染色劑于載玻片上兩種溶液混合，現(xiàn)配現(xiàn)用染色5min觀察先低倍鏡觀察，選擇染色均勻、色澤使觀察效果最佳淺的區(qū)域，移至視野中央，調(diào)節(jié)清晰后才換用高倍物鏡觀察實(shí)驗(yàn)二檢測生物組織中的糖類、脂肪和蛋白質(zhì)（必修一P18）一．實(shí)驗(yàn)?zāi)康模簢L試用化學(xué)試劑檢測

3、生物組織中糖類、脂肪和蛋白質(zhì)二．實(shí)驗(yàn)原理：某些化學(xué)試劑能使生物組織中的有關(guān)有機(jī)化合物，產(chǎn)生特定的顏色反應(yīng)。1．可溶性還原糖（如葡萄糖、果糖、麥芽糖）與斐林試劑發(fā)生作用，可生成磚紅色的沉淀。如：加熱葡萄糖+Cu(OH)2葡萄糖酸22+CuO↓（磚紅色）+HO，即Cu(OH)成Cu2O，葡萄糖被氧化成葡萄糖酸。Cu2O2被還原2．脂肪可以被蘇丹Ⅲ染液染成橘黃色（或被蘇丹Ⅳ染液染成紅色）。淀粉遇碘變藍(lán)色。3．蛋白質(zhì)與雙縮脲試劑發(fā)生作用，產(chǎn)生紫色反應(yīng)。（蛋白質(zhì)分子中含有很多肽鍵，在堿性NaOH溶液中能與雙縮脲試劑中的Cu2+作用，產(chǎn)生紫色反應(yīng)。）三．實(shí)驗(yàn)材料1．做可溶性還原性糖鑒

4、定實(shí)驗(yàn)，應(yīng)選含糖高，顏色為白色的植物組織，如蘋果、梨。（因?yàn)榻M織的顏色較淺，易于觀察。）2．做脂肪的鑒定實(shí)驗(yàn)。應(yīng)選富含脂肪的種子，以花生種子為最好，實(shí)驗(yàn)前一般要浸泡3~4小時（也可用蓖麻種子）。3．做蛋白質(zhì)的鑒定實(shí)驗(yàn)，可用富含蛋白質(zhì)的黃豆或雞蛋清。四、實(shí)驗(yàn)試劑斐林試劑（包括甲液：質(zhì)量濃度為0.1g/mLNaOH溶液和乙液：質(zhì)量濃度為0.05g/mLCuSO4溶液）、蘇丹Ⅲ或蘇丹Ⅳ染液、雙縮脲試劑（包括A液：質(zhì)量濃度為0.1g/mLNaOH溶液和B液：質(zhì)量濃度為0.01g/mLCuSO4溶液）、體積分?jǐn)?shù)為50%的酒精溶液，碘液、蒸餾水。五、方法步驟：（一）可溶性糖的鑒定操作方

5、法注意問題解釋1.制備組織樣液。蘋果或梨組織液必須臨時制備。因蘋果多酚氧化酶含量高，（去皮、切塊、研磨、過濾）組織液很易被氧化成褐色，將產(chǎn)生的顏色掩蓋。2.取1支試管，向試管內(nèi)注入2mL組織樣液。3.向試管內(nèi)注入1mL新制應(yīng)將組成斐林試劑的甲液、乙液的斐林試劑，振蕩。分別配制、儲存，使用前才將甲、乙液等量混勻成斐林試劑；切勿將甲液、乙液分別加入蘋果組織樣液中進(jìn)行檢測。斐林試劑很不穩(wěn)定，甲、乙液混合保存時，生成的Cu(OH)2在70~900C下分解成黑色CuO和水；甲、乙液分別加入時可能會與組織樣液發(fā)生反應(yīng)，無Cu(OH)2生成。4.試管放在盛有50-650C溫最好用試管夾

6、夾住試管上部，使防止試管內(nèi)的溶液沖出試水的大燒杯中，加熱約2分試管底部不觸及燒杯底部，試管管，造成燙傷；鐘，觀察到溶液顏色：淺藍(lán)口不朝向?qū)嶒?yàn)者。色→棕色→磚紅色（沉淀）模擬尿糖的檢測1、取樣：正常人的尿液和糖尿病患者的尿液2、檢測方法：斐林試劑（水浴加熱）或班氏試劑或尿糖試紙3、結(jié)果：（用斐林試劑檢測）試管內(nèi)發(fā)生出現(xiàn)磚紅色沉淀的是糖尿病患者的尿液，未出現(xiàn)磚紅色沉淀的是正常人的尿液。4、分析：因?yàn)樘悄虿』颊叩哪蛞褐泻羞€原糖，與斐林試劑發(fā)生反應(yīng)產(chǎn)生磚紅色沉淀，而正常人尿液中無還原糖，所以沒有發(fā)生反應(yīng)。（二）脂肪的鑒定操作方法注意問題花生種子浸泡、去皮、切下一些子干種子要浸泡3

7、~4小葉薄片，將薄片放在載玻片的水滴時，新花生的浸泡時中，用吸水紙吸去裝片中的水。間可縮短。解釋因?yàn)榻輹r間短，不易切片，浸泡時間過長，組織較軟，切下的薄片不易成形。切片要盡可能薄些，便于觀察。在子葉薄片上滴2~3滴蘇丹Ⅲ或蘇染色時間不宜過長。丹Ⅳ染液，染色1分鐘。用吸水紙吸去薄片周圍染液，用酒精用于洗去浮色，不洗去浮50%酒精洗去浮色，吸去酒精。色，會影響對橘黃色脂肪滴的觀察。同時，酒精是脂溶性溶劑，可將花生細(xì)胞中的脂肪顆粒溶解成油滴。用吸水紙吸去薄片周圍酒精，滴上滴上清水可防止蓋蓋玻片時產(chǎn)1~2滴蒸餾水，蓋上