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1、《磁性物理學》課程.參考書1、《鐵磁性物理》近角聰信2、《現(xiàn)代磁性材料原理和應用》R.C.O’Handley(奧漢德利)3、《鐵磁學》郭貽誠4、《鐵磁學》戴道生,鐘文定(北京大學)考核方法1、每一部分結(jié)束出3-5個練習題。(50%)2、課程結(jié)束出考題。(50%)真菌常用的體外藥敏試驗方法比較真菌藥敏試驗臨床難以開展的原因1.按照NCCLS推薦的稀釋法,操作繁瑣2.有些藥只能用于某種菌的抗菌活性測定3.紙片法試驗未得到NCCLS認可4.E試驗價錢太貴5.藥敏孵育時間因菌種而不同體外敏感試驗與臨床治療相
2、關(guān)性真菌體外藥敏試驗結(jié)果與口咽部真菌感染結(jié)果相關(guān)性好對于深部的真菌感染,抗真菌藥物敏感性試驗同臨床治療的相關(guān)性還有待進一步證實體外敏感試驗沒有考慮到真菌對抗真菌藥物在體內(nèi)的動力學和復雜的生物學作用真菌體外藥物敏感試驗方法NCCLSM27-A:常量肉湯稀釋法,微量肉湯稀釋法E-test法NCCLSM44-P紙片擴散法(僅限氟康唑)丹麥Rosco紙片擴散法(NCCLS未認可)真菌體外藥敏用培養(yǎng)基常量肉湯和微量肉湯法RPMI1640液制備:RPMI10.4gMOPS(三氮嗎啡啉丙磺酸)34.53g蒸餾水9
3、00ml溶解后,用1MNaOH調(diào)節(jié)PH至7.0(25℃),用蒸餾水溶至1000ml,高壓滅菌后,冷卻至50℃加入RPMI1640用0.22μm濾膜抽濾除菌,4℃保存。真菌體外藥敏用培養(yǎng)基E-test法:在RPMI液體培養(yǎng)基中補充葡萄糖,使其終濃度為2%。NCCLS紙片擴散法:Mueller-Hinton瓊脂補充2%葡萄糖和0.5μg/ml美藍丹麥ROSCO紙片擴散法:改良的SHADOMY(PH7.0)培養(yǎng)基主要成分:酵母粉,葡萄糖,天冬氨酸,磷酸緩沖液等。菌液制備將受試菌在沙保羅培養(yǎng)基上轉(zhuǎn)種,以保證
4、其純度和活性。用0.85%的鹽水制成酵母菌懸液,調(diào)整其濁度達到0.5麥氏比濁標準(約為1~5×106CFU/ml)。常量稀釋法:用RPMI1640液體稀釋2000倍接種濃度約為0.5~2.5×103CFU/ml微量稀釋法:用RPMI1640液體稀釋1000倍接種濃度約為1~5×103CFU/mlE-test法和NCCLS紙片擴散法:用菌液濁度為0.5麥氏單位。Rosco紙片擴散法:1.念珠菌:0.5麥氏濁度,生理鹽水1:10稀(1~5×105CFU/ml)2.隱球菌屬:1.0麥氏濁度3.其它酵母菌:
5、0.5麥氏濁度,生理鹽水1:1稀釋常量肉湯法(M27-A)先將氟康唑粉末溶于蒸餾水,然后用配制好的RPMI1640液倍比稀釋,使其起始濃度為640μg/ml,終末濃度為1.25μg/ml,分裝無菌潔凈的12mm×75mm試管:64321684210.5.25.125+-前10管:0.2ml氟康唑+1.8ml菌液念珠菌屬35℃孵育48小時新型隱球菌72小時讀取MIC結(jié)果2ml菌液1.8ml1640常量稀釋法藥敏結(jié)果判定氟康唑,伊曲康唑,兩性霉素為100%抑制其他唑類藥物為80%抑制(取0.2ml的生長
6、對照菌液加入0.8mlRPMI液體培養(yǎng)基的菌液濃度)質(zhì)控株克柔念珠菌ATCC6258近平滑念珠菌ATCC22019白念珠菌ATCC90028白念珠菌ATCC24433微量肉湯法氟康唑的稀釋方法同常量法,但起始濃度為2×常量法的濃度(即128μg/ml),終濃度為0.25μg/ml。。37℃。37℃6432168421.5.25.125+-氟康唑:1-10孔分別為100ul菌懸液:1-10孔分別為100ul200ulRPMI湯200ul菌懸液35℃新型隱球菌72小時,其余菌株48小時讀取MIC結(jié)果酵母
7、菌的NCCLSM27-A各藥物折點粘膜及系統(tǒng)性感染:氟康唑(除克柔念珠菌)敏感:≤8μg/ml中介:-耐藥:≥64μg/ml粘膜感染:伊曲康唑敏感:≤0.125μg/ml中介:-耐藥:≥1μg/ml粘膜及系統(tǒng)性感染:5-氟嘧啶敏感:≤4μg/ml中介:8~16μg/ml耐藥:≥32μg/ml酵母菌E-test法瑞典ABBiodisk優(yōu)點:有較好的重復性和穩(wěn)定性MICE-test法0.5麥氏比濁液(約為1~5×106CFU/ml)。菌懸液均勻涂布于藥敏板上35℃培養(yǎng)24小時讀取結(jié)果光滑念珠菌新型隱球菌
8、等生長較慢的菌種需適當延長培養(yǎng)時間。E-test法評價準確性高,且操作簡便E-test法得到的MIC值在某些菌種中要低于NCCLS推薦的常量肉湯稀釋法測得的MIC20%濃度CO2的環(huán)境中,可使此方法的結(jié)果更真實反映藥物對致病菌的敏感性缺點:1.價格太高每片40-50元2.吡咯類MIC終點不好確定酵母菌紙片擴散法敏感試驗NCCLSM44-P.2003培養(yǎng)基:Mueller-Hinton瓊脂補充2%Glucose0.5ug/mlMethylenebluedyePH7.2-