北運(yùn)河沉積物中好氧反硝化菌的分離鑒定及脫氮效率研究

北運(yùn)河沉積物中好氧反硝化菌的分離鑒定及脫氮效率研究

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1、第4卷第3期供水技術(shù)Vo1.4No.32010年6月WATERTECHN0L0GYJun.2010孔強(qiáng)一,任宗明,付榮恕(1.中國科學(xué)院煙臺海岸帶研究所,山東煙臺264000;2.山東師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,山東濟(jì)南250014)摘要:從北運(yùn)河沉積物中分離得到1株好氧反硝化細(xì)菌AD1。通過對該菌株的形態(tài)觀察、生理生化實(shí)驗(yàn)以及16SrDNA序列分析,確定菌株AD1為假單胞菌(Pseudomonassp,),分析了其在系統(tǒng)發(fā)育中的分類地位。對菌株AD1反硝化能力進(jìn)行的研究結(jié)果表明,菌株AD1表現(xiàn)出較高的降解效率。菌株AD1

2、在24h內(nèi)對馴化培養(yǎng)基中TN和NO;~N的降解率分別為63.82%和84.83%,60h內(nèi)對TN和NO;一N的降解率分別為68.2l%和92.28%。關(guān)鍵詞:河流沉積物;好氧反硝化菌;16SrDNA;脫氮中圖分類號:X172文獻(xiàn)標(biāo)志碼:A文章編號:1673—9353(2010)03~0001—04doi:10.3969/i.issn.1673—9353.2010.03.001IdentificationofaerobicdenitrifierisolatedfromBeiyunheRiversedimentandde

3、nitrificationKongQiang一,RenZongming,F(xiàn)uRongshu(1.YantaiInstituteofCoastalZoneResearch,ChineseAcademyofSciences,Yantai264000,China;2.CollegeofLifeScience,ShandongNormalUniversity,Jinan250014,China)Abstract:AbacterialstrainAD1thathadthecapabilityofaerobicdenitrifi

4、cationwasscreenedfromBeiyunheRiversediment.Accordingtothemorphologicalobservation,physiologicalandbiochemicaltestandsequenceanalysisofthe16SrDNA,thestrainAD1wasidentifiedasPseudomonassp.Thephylogenticpositionofthestrainwasperformedbasedonthephylogenetictree.The

5、denitrifyingcapabilityofthestrainwasinvestigatedinbatchcultureunderaerobiccondition.TheresultsshowedthatthenitrateinthecontainercouldbeefficientlyremovedbystrainAD1andtheremovalratesofTNandNO;一Nwere63.82%and84.83%for24hand68.21%and92.28%for60h.respectively.Keyw

6、ords:riversediment;aerobicdenitrifier;16SrDNA;denitrification傳統(tǒng)生物脫氮理論認(rèn)為,反硝化是一個嚴(yán)格厭化還原酶。直到20世紀(jì)80年代,Robertson和氧的過程川,反硝化菌作為兼性厭氧菌優(yōu)先使用溶Kuenen首次發(fā)現(xiàn)在有氧條件下的反硝化現(xiàn)象,分解氧進(jìn)行呼吸作用,這樣就阻止了使用硝酸鹽和亞離出好氧反硝化菌Thiosphaerapantotropha、Pseud—硝酸鹽作為最終電子受體,O:被認(rèn)為可以抑制反硝monassp.和Alcaligenesfaecal

7、is等,并發(fā)現(xiàn)了好氧反基金項(xiàng)目:國家水體污染控制與治理科技重大專項(xiàng)(2008ZX07209—006)第4卷第3期供水技術(shù)2010年6月硝化酶系在有氧條件下依次催化還原NO/、NO2、養(yǎng)箱28c【=下培養(yǎng)。篩選出菌落長勢較好的菌株,并NO、N20生成N2。進(jìn)行編號,斜面保存,用于進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)。好氧反硝化菌的發(fā)現(xiàn)和好氧反硝化理論的逐步1.2菌株形態(tài)特征觀察和生理生化試驗(yàn)形成,使硝化與反硝化能在有氧條件下的同一容器菌株鑒定的形態(tài)學(xué)特征和部分生理生化試驗(yàn)參中完成,實(shí)現(xiàn)同步硝化與反硝化。硝化菌代謝氨氮照文獻(xiàn)[8]進(jìn)行。生成的亞硝

8、氮和硝酸氮,正好作為好氧反硝化菌的1.3菌株分子生物學(xué)鑒定代謝底物,從而可以避免硝化反應(yīng)受到亞硝酸和硝1.3.1細(xì)菌16SrDNA和真菌ITS區(qū)序列的擴(kuò)增和酸積累的抑制作用。同時反硝化產(chǎn)生的OH一能補(bǔ)測序償硝化反應(yīng)所消耗的堿,維持系統(tǒng)的pH值的穩(wěn)定。采用TIANampbacteriaDNAKit細(xì)菌基因組提好氧反硝化菌的發(fā)現(xiàn)為生物脫氮技術(shù)開辟了

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