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《液泡系的超活染色與觀察PPT課件》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫(kù)。
實(shí)驗(yàn)2液泡系的超活染色與觀察.2022/10/191
1細(xì)胞（Cell）是由膜包圍，并且能進(jìn)行獨(dú)立繁殖的原生質(zhì)團(tuán)，是最基本的結(jié)構(gòu)和功能單位。細(xì)胞器是細(xì)胞質(zhì)內(nèi)具有獨(dú)立的生理功能和一定化學(xué)組成的形態(tài)結(jié)構(gòu)單元。20世紀(jì)以來，隨著細(xì)胞生物學(xué)和分子生物學(xué)研究的不斷深入，科學(xué)工作者將更多的目光集中在細(xì)胞器研究層面上。.2022/10/19
2.2022/10/19
3二、實(shí)驗(yàn)原理活體染色是指對(duì)生活有機(jī)體的細(xì)胞或組織能著色但又無毒害的一種染色方法。目的顯示生活細(xì)胞內(nèi)的某些結(jié)構(gòu)，而不影響細(xì)胞的生命活動(dòng)和產(chǎn)生任何理化變化以致引起細(xì)胞死亡。研究生活狀態(tài)下的細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)和生理、病理狀態(tài)。.2022/10/194
4一般的生物材料不能穿透細(xì)胞膜，只有當(dāng)細(xì)胞被固定后，細(xì)胞膜被破壞，染料才能進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)部。但是，有一些染料(稱"活體染料")卻能進(jìn)入活細(xì)胞，它們是一些無毒或毒性很小的染色劑，能使細(xì)胞中某些特定結(jié)構(gòu)著色?；铙w染料多為堿性染料，如中性紅、健那綠、次甲基藍(lán)、甲苯胺藍(lán)、亮焦油紫及其它熒光物等，它們解離后帶正電，其中有的染料與胞內(nèi)某些結(jié)構(gòu)有專一性接合。例如，中性紅染液泡系，健那綠染線粒體。二、實(shí)驗(yàn)原理.2022/10/19
5.2022/10/19
6轉(zhuǎn)p35S::Naa10-GFP基因擬南芥幼苗的根尖進(jìn)行活體染色.2022/10/19
7二、實(shí)驗(yàn)原理低濃度的中性紅染液是對(duì)植物細(xì)胞液泡進(jìn)行超活染色的最重要也最常用的弱堿性染料。中性紅對(duì)液泡系的染色具有專一性，只能將活細(xì)胞中的液泡系染成紅色。.2022/10/198
8線粒體是細(xì)胞內(nèi)的一個(gè)重要細(xì)胞器，是細(xì)胞進(jìn)行呼吸作用的場(chǎng)所。詹納斯綠B對(duì)線粒體具有專一性的染色，是毒性最小的堿性染料。詹納斯綠B染色是由于線粒體中的細(xì)胞色素氧化酶系的作用，使染料始終保持氧化狀態(tài)，呈藍(lán)綠色，而周圍的細(xì)胞質(zhì)中的染料被還原為無色的色基。.2022/10/19
9三、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?．觀察植物活細(xì)胞內(nèi)液泡系的形態(tài)、發(fā)育和分布；2．掌握細(xì)胞和細(xì)胞器的超活染色技術(shù).2022/10/19
10四、實(shí)驗(yàn)用品1．器材：顯微鏡、恒溫水浴鍋、剪刀、鑷子、解剖刀、載玻片、蓋玻片、吸管、牙簽、吸水紙2．試劑：Ringer液，0.3%中性紅，詹納斯綠B溶液3．材料：洋蔥幼根根尖、小麥種子、口腔上皮細(xì)胞。.2022/10/1911
11植物細(xì)胞液泡的活體染色撕取洋蔥鱗莖內(nèi)表皮，放在加有一滴1/3g.L-'中性紅溶液的載玻片上，染色5~10min。用吸水紙吸去中性紅溶液，換上Ringer溶液,蓋上蓋片，顯微鏡下觀察，可見到被染成紅色的央大液泡。五、實(shí)驗(yàn)步驟.2022/10/19
12五、實(shí)驗(yàn)步驟初生根尖（1~2cm，縱切面切片）置于載玻片上，0.3%中性紅溶液１滴染色10~15min吸去多余染液，滴一滴Ringer液，蓋上蓋玻片，用拇指垂直壓蓋玻片，使根尖壓扁顯微鏡下觀察。.2022/10/1913
13注意觀察液泡的形態(tài)、數(shù)目、體積及染色深淺漸變根尖分生區(qū)細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中散步很多大小不等的圓形小泡，即初生的幼小液泡伸長(zhǎng)區(qū)的液泡染色較淺，體積增大，數(shù)目變少成熟區(qū)細(xì)胞中央一般可見一個(gè)淡紅色的大液泡.2022/10/1914
14六、討論與思考題繪制洋蔥根尖示意圖，示細(xì)胞中液泡系的動(dòng)態(tài)變化（每個(gè)區(qū)繪3個(gè)以上細(xì)胞）。簡(jiǎn)述從根尖的生長(zhǎng)點(diǎn)到成熟區(qū)，根尖細(xì)胞中的液泡發(fā)生了哪些變化？.2022/10/1915
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