DB15∕T 2844.2-2022 邊境口岸病媒生物跨境聯(lián)合監(jiān)測及檢測技術(shù)規(guī)程 第2部分：鼠(內(nèi)蒙古自治區(qū)).pdf

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ICS11.020CCSC6215內(nèi)蒙古自治區(qū)地方標(biāo)準(zhǔn)DB15/T2844.2—2022邊境口岸病媒生物跨境聯(lián)合監(jiān)測及檢測技術(shù)規(guī)程第2部分：鼠Technicalregulationofcrossborderjointmonitoringanddetectionofvectorsingroundcrossingpart2：Rodents2022-12-08發(fā)布2023-01-08實(shí)施內(nèi)蒙古自治區(qū)市場監(jiān)督管理局發(fā)布 DB15/T2844.2—2022前言本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。本文件是DB15/T2844《邊境口岸鼠疫檢測實(shí)驗(yàn)室管理規(guī)范》的第2部分。DB15/T2844已經(jīng)發(fā)布了以下部分：——第1部分：總則；——第2部分：鼠；——第3部分：蜱。本文件由中華人民共和國呼和浩特海關(guān)提出并歸口。本文件起草單位：呼和浩特國際旅行衛(wèi)生保健中心（呼和浩特海關(guān)口岸門診部）。本文件主要起草人：靳木子、陳宇飛、劉佳琪、韓丹。I DB15/T2844.2—2022邊境口岸病媒生物跨境聯(lián)合監(jiān)測及檢測技術(shù)規(guī)程第2部分：鼠1范圍本文件規(guī)定了邊境口岸病媒生物鼠跨境聯(lián)合監(jiān)測及檢測技術(shù)的總體要求。本文件適用于邊境口岸病媒生物鼠跨境聯(lián)合監(jiān)測及檢測的管理。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T28940病媒生物感染病原體采樣規(guī)程鼠類SN/T1188國境口岸鼠疫疫情監(jiān)測規(guī)程SN/T1293國境口岸蜱類監(jiān)測規(guī)程SN/T1339國境口岸螨類監(jiān)測規(guī)程SN/T1487輸入性嚙齒類動(dòng)物攜帶鉤端螺旋體的檢測方法SN/T1502國境口岸拉沙熱檢驗(yàn)規(guī)程SN/T2616國境口岸鼠攜帶鼠疫桿菌和漢坦病毒快速檢測方法SN/T4616國境口岸巴爾通體PCR檢測方法WS279鼠疫診斷標(biāo)準(zhǔn)3術(shù)語和定義本文件沒有需要界定的術(shù)語和定義。4總體要求監(jiān)測時(shí)間各口岸根據(jù)當(dāng)?shù)貧夂驐l件、鼠類活動(dòng)高峰和實(shí)際工作情況，確定當(dāng)?shù)乇O(jiān)測時(shí)間，原則上每月均需監(jiān)測，監(jiān)測周期、頻次和器具布放時(shí)間，一經(jīng)確定不應(yīng)更改，如遇特殊天氣可順延。監(jiān)測范圍依據(jù)邊境口岸內(nèi)監(jiān)測區(qū)域及其生態(tài)環(huán)境制定監(jiān)測范圍，監(jiān)測范圍盡可能的覆蓋整個(gè)口岸區(qū)域。監(jiān)測內(nèi)容監(jiān)測內(nèi)容包括以下幾方面：——口岸鼠類的地理分布；1 DB15/T2844.2—2022——口岸鼠類的種類組成；——口岸鼠類季節(jié)消長監(jiān)測；——口岸鼠類攜帶病原體檢測；——生境因素觀測分析：地理、海拔、地貌、植被、天氣、氣溫等。監(jiān)測數(shù)量所捕獲的鼠應(yīng)來自口岸邊境地區(qū)，所需數(shù)量每個(gè)口岸全年在100只以上，需明確記錄并儲(chǔ)存其體表寄生物。所有樣本需詳細(xì)做好記錄，隨樣本一同送檢。個(gè)人防護(hù)著白（淺）色防護(hù)服（連體）、白色長筒防蚤襪、長筒膠靴、無粉手套、口罩、眼罩、驅(qū)避劑等。5監(jiān)測方法夾夜法建議統(tǒng)一選用質(zhì)量可靠穩(wěn)定的中型鋼板夾和鼠籠，以各地便于獲得的材料為誘餌長期使用，晚放晨2收。室內(nèi)沿墻基放置，鼠夾與墻基垂直平放，踏板端緊靠墻基，并布放于隱蔽處。小于15m房間放置1222夾，15m房間放置2夾，大于15m的房間，按每15m為一間折算標(biāo)準(zhǔn)間數(shù)，放夾數(shù)量依此類推。室外布放在鼠類出沒的地方，按5m～10m布1夾，直線布放，行距約20m，日落前放置。次日晨檢查記錄捕獲鼠的數(shù)量，并送實(shí)驗(yàn)室鑒定（見附錄A）。每次監(jiān)測有效夾數(shù)不少于300夾，誘餌以各口岸的實(shí)際情況確定。鼠夾法鼠密度參考控制標(biāo)準(zhǔn)為小于1%。其中，鼠密度等于捕鼠總數(shù)除以有效夾數(shù)后乘以100%。鼠籠法每次監(jiān)測不少于50籠，鼠籠與墻基垂直平放，鼠籠開口朝向墻面，晚放晨收，鼠籠法鼠密度參考控制標(biāo)準(zhǔn)為小于0.5%。其中，鼠密度等于捕鼠總數(shù)除以有效籠數(shù)后乘以100%。鼠體寄生生物監(jiān)測5.3.1鼠體寄生蚤類同鼠類調(diào)查同時(shí)進(jìn)行，將捕獲鼠及器械放入白布袋，扎緊袋口，置于密閉容器內(nèi)，用氯仿或乙醚麻醉處理。處理后的鼠體放在白瓷盤上，用梳子或刷子撿蚤，以濕毛筆沾起放入75%酒精中，每只鼠檢獲的蚤類放入同一試管內(nèi)，做好唯一性標(biāo)識(shí)，在解剖鏡下進(jìn)行分類計(jì)數(shù)。計(jì)數(shù)方法按照SN/T1188執(zhí)行。5.3.2鼠體寄生蜱類同類鼠調(diào)查同時(shí)進(jìn)行，檢蜱方法同蚤類。計(jì)數(shù)方法按照SN/T1293執(zhí)行。5.3.3鼠體寄生螨同鼠類調(diào)查同時(shí)進(jìn)行，檢螨方法同蚤類。見附錄B、C。計(jì)數(shù)方法按照SN/T1339執(zhí)行。6樣本保存、運(yùn)輸及處置活鼠2 DB15/T2844.2—2022將捕獲的活鼠連同鼠籠（鼠夾）裝入有捆扎袋的鼠袋內(nèi)，扎緊袋口，嚴(yán)防跳蚤逃逸，填寫口岸鼠類監(jiān)測記錄表，標(biāo)記好捕獲方法、時(shí)間、地點(diǎn)、狀態(tài)（活體、死亡、是否腐敗等），由專車雙人送檢，運(yùn)輸時(shí)需具有生物安全轉(zhuǎn)運(yùn)證書；監(jiān)測與檢測過程中產(chǎn)生的廢棄物按照相應(yīng)的處理要求進(jìn)行處理。死鼠將捕獲的死鼠從鼠夾上取下，單只裝入有捆扎袋的鼠袋內(nèi)，扎緊袋口，嚴(yán)防跳蚤逃逸，填寫口岸鼠類監(jiān)測記錄表，標(biāo)記好捕獲方法、時(shí)間、地點(diǎn)、狀態(tài)（活體、死亡、是否腐敗等），由專車雙人送檢，運(yùn)輸時(shí)需具有生物安全轉(zhuǎn)運(yùn)證書；監(jiān)測與檢測過程中產(chǎn)生的廢棄物按照相應(yīng)的處理要求進(jìn)行處理。7鑒定與檢測生物安全要求保證實(shí)驗(yàn)流程無菌操作，使用已消毒或一次性無菌器材，血液和組織樣本保存在無菌容器內(nèi)。作好個(gè)人生物安全防護(hù)，如穿防蚤隔離衣、鞋、膠手套、N95口罩等，整個(gè)解剖過程應(yīng)在生物安全柜（二級）或生物安全解刨臺(tái)（二級）中進(jìn)行做到防叮咬、防刺傷、防氣溶膠傳播等。鑒定鼠類鑒定按照《中國口岸常見醫(yī)學(xué)媒介生物鑒定圖譜》要求進(jìn)行，并填寫附表?；钍髽颖镜臋z測7.3.1外觀檢測需檢測鼠體體重（g）、體長（mm）、尾長(mm)、耳高(mm)、后足長(mm)、性別(♀♂)、鑒定鼠種，填寫完整鼠類鑒定檢測記錄表。采血和臟器前，應(yīng)先梳檢鼠體寄生蟲，采用乙醚或者氯仿麻醉致死后采集，每只鼠每種寄生蟲單獨(dú)保存。7.3.2血清樣本采集大鼠可采用股靜脈或股動(dòng)脈采血，小鼠可采用眼眶動(dòng)脈采血或尾靜脈采血，按照GB/T28940的規(guī)定，采血后做好編號(hào)登記，先置放室溫1h，然后3000轉(zhuǎn)/min離心15min，取上清液后滅活。7.3.3組織采集按皮下、腹腔、胸腔的順序解剖，采取膀胱、肝、脾、肺和心臟等，需要時(shí)也可取腦，各臟器采集時(shí)應(yīng)更換無菌剪、鑷。每種臟器存放在單獨(dú)無菌容器中，封口后編號(hào)和登記。7.3.4鼠體寄生蟲采集應(yīng)在活鼠經(jīng)過乙醚或者氯仿麻醉致死后采集，將鼠袋倒入白（淺）色的深搪瓷盆內(nèi)，慢慢翻開隨翻隨撿，放進(jìn)指形管中；然后一只手用大鑷子夾持鼠體，另一手用梳子梳鼠體蚤、螨、蜱，由鼠頭部往后梳，再由尾部向前梳，特別要注意頸部、腋窩和股骨內(nèi)側(cè)。將刷出的鼠體外寄生蟲蚤、螨、蜱，用毛筆沾75%酒精或鑷子分類撿入指形管（內(nèi)裝75%酒精），做好標(biāo)記；死鼠樣本的檢測7.4.1外觀檢測3 DB15/T2844.2—2022同7.3.1，并登記為死鼠。7.4.2血液采集對死鼠采血可采用血紙條方式，應(yīng)做好鼠體消毒，并做好編號(hào)登記、滅活。7.4.3組織采集同7.3.3；若鼠尸殘缺不全或腐敗時(shí)，盡量取可取的臟器，也可采取股骨髓檢查。每個(gè)臟器存放在單獨(dú)無菌容器中，封口后編號(hào)和登記。樣本保存用于細(xì)菌、病毒分離和檢測的組織樣本可直接-80℃冷凍保存，也可用干冰或液氮罐中保存。用于血凝檢測的血清樣本，對于24h內(nèi)不能立即檢測的樣本，一周內(nèi)可保存在-20℃冰箱中低溫保存，一周內(nèi)無法檢測的樣本應(yīng)保存于-70℃及以下的冰箱冷凍保存。鼠體寄生蟲樣本，可用75%酒精保存，-80℃或液氮保存?zhèn)錂z。8鼠類攜帶病原體檢測生物安全要求病原體檢測應(yīng)在衛(wèi)生部《人間傳染病的病原微生物名錄》規(guī)定的相應(yīng)等級的生物安全實(shí)驗(yàn)室內(nèi)進(jìn)行，實(shí)驗(yàn)人員應(yīng)經(jīng)過相關(guān)培訓(xùn)，熟知實(shí)驗(yàn)室管理制度、生物安全要求、技術(shù)操作規(guī)程等，需兩人以上同時(shí)開展實(shí)驗(yàn)工作，填寫完整鼠類鑒定檢測記錄表。檢測要求8.2.1檢測病原體種類鼠疫耶爾森氏菌、漢坦病毒、巴爾通體、鉤端螺旋體、博卡病毒、拉沙熱病毒及新發(fā)、未知病原體的檢測。8.2.2檢測方法8.2.2.1鼠疫耶爾森氏菌鼠疫耶爾森氏菌培養(yǎng)按照WS279的規(guī)定執(zhí)行；鼠疫耶爾森氏菌血清學(xué)檢測按照WS279的規(guī)定執(zhí)行；鼠疫耶爾森氏菌膠體金法檢測按照WS279的規(guī)定執(zhí)行；鼠疫耶爾森氏菌核酸檢測按照WS279的規(guī)定執(zhí)行。8.2.2.2漢坦病毒漢坦病毒酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)雙抗原夾心法按照SN/T2616的規(guī)定執(zhí)行；漢坦病毒核酸檢測按照SN/T2616的規(guī)定執(zhí)行；8.2.2.3巴爾通體巴爾通體核酸檢測按照SN/T4616的規(guī)定執(zhí)行；8.2.2.4鉤端螺旋體4 DB15/T2844.2—2022鉤端螺旋體核酸檢測按照SN/T1487的規(guī)定執(zhí)行；8.2.2.5博卡病毒博卡病毒核酸檢測按《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》的規(guī)定執(zhí)行；8.2.2.6拉沙熱病毒拉沙熱病毒核酸檢測按國境口岸拉沙熱檢驗(yàn)規(guī)程按照SN/T1502的規(guī)定執(zhí)行；8.2.2.7新發(fā)、未知病原體按照《人間傳染的病原微生物生物名錄》的要求，提取核酸，進(jìn)行全基因組測序，尋找未知病原。9統(tǒng)計(jì)根據(jù)監(jiān)測及檢測數(shù)據(jù)進(jìn)行分析統(tǒng)計(jì)，計(jì)算種群構(gòu)成比例、密度，統(tǒng)計(jì)傳染病檢出率及占比情況。見附錄D、E、F、G。10報(bào)告報(bào)告內(nèi)容根據(jù)監(jiān)測結(jié)果分析情況，寫出口岸監(jiān)測總結(jié)報(bào)告，內(nèi)容包括：口岸地區(qū)自然生境概況，地理、氣候、生境種類；口岸鼠類監(jiān)測情況；口岸內(nèi)主要鼠類種群類型及種群分布；口岸鼠體攜帶寄生蟲分類；口岸鼠類攜帶病原體檢測結(jié)果；新種或新紀(jì)錄來源分析、新種形態(tài)描述；通過對口岸病媒生物監(jiān)測情況，進(jìn)行傳染病傳播風(fēng)險(xiǎn)評估，指出口岸鼠類防治的重點(diǎn)部位和薄弱環(huán)節(jié)，提出口岸鼠類防治的綜合措施。報(bào)告上報(bào)檢測結(jié)果按照上機(jī)主管部門要求及時(shí)上報(bào)。5 DB15/T2844.2—2022AA附錄A（資料性）口岸鼠類監(jiān)測現(xiàn)場記錄表口岸鼠類監(jiān)測現(xiàn)場記錄表見表A.1。表A.1口岸鼠類監(jiān)測現(xiàn)場記錄表監(jiān)測方法：監(jiān)測時(shí)間：年月日—年月日編號(hào)生境類型監(jiān)測用器械數(shù)有效器械數(shù)捕獲總數(shù)（只）鼠密度天氣：風(fēng)速：m/s溫度：℃濕度：％海拔高度米監(jiān)測單位：監(jiān)測人：填報(bào)日期：年月日6 DB15/T2844.2—2022BB附錄B（資料性）鼠類鑒定檢測記錄表鼠類鑒定檢測記錄表見表B.1。表B.1鼠類鑒定檢測記錄表采集時(shí)間：采集地點(diǎn)：編生種性年齡體體耳右體表寄生蟲病原體檢測如檢測號(hào)境類別重長高后數(shù)量結(jié)果為gcmcm足陽性，成幼長蜱蚤螨鼠疫漢坦伯氏巴爾應(yīng)注明cm菌病毒疏螺通體檢測方旋體法7 DB15/T2844.2—2022CC附錄C（資料性）新記錄種、新種登記表新記錄種、新種登記表見表C.1。表C.1新記錄種、新種登記表生境及地點(diǎn)日期種名采集方法數(shù)量采集人鑒定人復(fù)核人科屬種拉丁文名稱天氣：風(fēng)速：m/s溫度：℃濕度：％海拔高度米監(jiān)測單位：填報(bào)人：填報(bào)日期：年月日8 DB15/T2844.2—2022DD附錄D（資料性）國境口岸媒介生物攜帶病原體檢測結(jié)果國境口岸媒介生物攜帶病原體檢測結(jié)果見表D.1。表D.1國境口岸媒介生物攜帶病原體檢測結(jié)果媒介類型檢測項(xiàng)目檢測方法樣本總量/陽性數(shù)陽性率（%）樣品來源合計(jì)監(jiān)測單位：填報(bào)人：填報(bào)日期：年月日9 DB15/T2844.2—2022EE附錄E（資料性）國境口岸鼠類監(jiān)測及體表寄生蚤調(diào)查結(jié)果國境口岸鼠類監(jiān)測及體表寄生蚤調(diào)查結(jié)果見表E.1。表E.1國境口岸鼠類監(jiān)測及體表寄生蚤調(diào)查結(jié)果地點(diǎn)布夾數(shù)（次）鼠（只）蚤（匹）蜱（只）監(jiān)測單位：填報(bào)人：填報(bào)日期：年月日10 DB15/T2844.2—2022FF附錄F（規(guī)范性）國境口岸鼠類、蚤類及蜱類種群構(gòu)成國境口岸鼠類、蚤類及蜱類種群構(gòu)成見表F.1。表F.1國境口岸鼠類、蚤類及蜱類種群構(gòu)成鼠種類捕獲數(shù)構(gòu)成比（%）蚤種類捕獲數(shù)構(gòu)成比（%）蜱種類捕獲數(shù)構(gòu)成比（%）（只）（只）（只）監(jiān)測單位：填報(bào)人：填報(bào)日期：年月日11 DB15/T2844.2—2022GG附錄G（資料性）國境口岸地區(qū)鼠類組成國境口岸地區(qū)鼠類組成見表G.1。表G.1國境口岸地區(qū)鼠類組成中方蒙方鼠種捕獲數(shù)（只）構(gòu)成比（%）捕獲數(shù)（只）構(gòu)成比（%）監(jiān)測單位：填報(bào)人：填報(bào)日期：年月日12