11種中藥對(duì)小鼠淋巴細(xì)胞活性及腹腔巨噬細(xì)胞功能的影響

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1、11種中藥對(duì)小鼠淋巴細(xì)胞活性及腹腔巨噬細(xì)胞功能的影響　　關(guān)鍵詞：黃芩；蒺藜；羅布麻；淋巴細(xì)胞；巨噬細(xì)胞　　Effectof11TraditionalChineseHerbsonProliferationofSplenicLymphocyteandFunctionPhagocytosisofPeritonealMacrophage　　Abstract：ObjectiveToinvestigatetheimmunemodulatoryeffectofphocyteandfunctionphagocytosisofperitonealmacr

2、ophage.MethodsThepatternofconcanavalinA(ConA)orlipopolysaccharide(LPS)inducedproliferativeresponseofmurinelymphocyteseasuredbytheXTT(2,3bis［24nitro5sulfophenyl］-2H-tetrazolium5carboxanilideassayinthenormalcellsandthecellstreatedeasuredtheproliferationaftertreatedl).Perit

3、onealmacrophagestainedredacrophageaftertreatedeasuredbythedoseofNeutralRedDyethattheyingested.ResultsTheresultsshoallymphocytes.Thephocytestreatedphocytestreatedl.Thecorrinhibitionratiophocytestreatedl.ThecorrinhibitionratiosacrophagetoingesteNeutralRedDye,itmeantthatthe

4、acrophage.ConclusionTheodulatoryeffectonmurinelympholytes.Themunemodulatoryeffectonfunctionphagoaytosisofperrtonealmacrophage.　　Keyphocyte;Macrophage　　糖尿病、原發(fā)性腎病、呼吸道變應(yīng)性疾病、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等自身免疫性疾病是由自身組織抗原免疫應(yīng)答過(guò)高或Ⅱ，Ⅲ，Ⅳ型超敏反應(yīng)引起的。其中淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、NK細(xì)胞等，參與自身免疫組織損傷。其中T細(xì)胞可以直接或間接地攻擊靶組織而造成組織的損害；而

5、B細(xì)胞功能亢進(jìn)亦可增加組織損傷。另一方面，免疫缺陷病、腫瘤的治療則需要通過(guò)增強(qiáng)機(jī)體免疫功能以獲得較好的治療效果，巨噬細(xì)胞通過(guò)吞噬外來(lái)抗原和體內(nèi)產(chǎn)生的抗原物質(zhì)在免疫系統(tǒng)中發(fā)揮著重要作用。因此研究藥物對(duì)淋巴細(xì)胞增殖效應(yīng)及巨噬細(xì)胞吞噬功能的影響，具有重要的意義。本次實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖翘接戄疝?、黃精、大青葉、女貞子、連翹、何首烏、吳茱萸、紫草、羅布麻、黃芩、姜黃等11種據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道［1～6］具有免疫調(diào)節(jié)作用的中藥對(duì)正常、ConA及LPS誘導(dǎo)的小鼠脾淋巴細(xì)胞增殖作用及其腹腔巨噬細(xì)胞吞噬功能的影響，為進(jìn)一步探討藥物的免疫作用機(jī)理奠定基礎(chǔ)?！　?材料　　1.1

6、動(dòng)物昆明種雄性小鼠，體重18～20g，由吉林大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供，合格證編號(hào)20030001?！　?.2試劑噻唑藍(lán)(XTT)、刀豆蛋白A(ConA)、細(xì)菌脂多糖(LPS)（Sigma公司，美國(guó)）；RPMI1640、青霉素和鏈霉素為美國(guó)GIBCO公司產(chǎn)品；小牛血清為杭州四季青生物工程材料公司生產(chǎn)；PMS（ACROS，美國(guó)）；硫乙醇酸鈉，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司（中國(guó)，上海）；中性紅購(gòu)于上海試劑三廠?！　?.3儀器680酶標(biāo)儀由美國(guó)BIORAD公司生產(chǎn)；DGS溶液，繼續(xù)培養(yǎng)5h后，振蕩5min，用酶標(biāo)儀在450nm(605nm作為參比波長(zhǎng))

7、波長(zhǎng)下測(cè)定OD值。計(jì)算增殖指數(shù)(proliferationindex，PI)=實(shí)驗(yàn)組OD值/對(duì)照組OD值，并計(jì)算受試藥物對(duì)細(xì)胞的抑制率或增殖率，增殖率=（PI－1）×100%（PI＞1），抑制率=（1－PI）×100%（PI＜1）。　　2.2對(duì)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬功能的影響［8］常規(guī)制備小鼠巨噬細(xì)胞懸液，調(diào)整細(xì)胞濃度為2×106個(gè)/ml，接種于96孔培養(yǎng)板(100μl/孔)。37℃，5%CO2培養(yǎng)箱孵育12h。待細(xì)胞貼壁后，移去培養(yǎng)液，向96孔板巨噬細(xì)胞中加入不同濃度藥物（11種受試藥物）及PBS磷酸緩沖液（對(duì)照組）10μl，再加入RP

8、MI1640培養(yǎng)液100μl，于37℃培養(yǎng)24h。棄上清液，每孔加入0.08%中性紅生理鹽水溶液100μl繼續(xù)培養(yǎng)30min。棄上清，用PBS洗滌3次，每孔加入細(xì)胞溶解液酸性乙醇溶液（冰醋酸1ml和100m