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《不同培養(yǎng)條件對(duì)產(chǎn)毒銅綠微囊藻和不產(chǎn)毒銅綠微囊藻生長(zhǎng)競(jìng)爭(zhēng)的影響》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫(kù)。
1、浙江大學(xué)研究生學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過(guò)的研究成果，也不包含為獲得浙婆太堂或其他教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過(guò)的材料。與我一同工作的同志對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說(shuō)明并表示謝意。學(xué)位論文作者簽名：桀復(fù)車簽字日期：凹心年；月岔日學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學(xué)位論文作者完全了解浙江太堂有權(quán)保留并向國(guó)家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交本論文的復(fù)印件和磁盤，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)盤婆太堂可以將學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行檢索和傳播，可
2、以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文。(保密的學(xué)位論文在解密后適用本授權(quán)書)學(xué)位論文作者簽名：棠主糸導(dǎo)師簽名：幽，0簽字日期：2JIz年歲月g日簽字日期：加fy年；月y日指導(dǎo)師嚴(yán)年半予我感謝許振蘭師姐、吳海云師姐、夏云峰師兄、李曉娟師姐、周俊、孟慧娟、閏書海師弟、朱賽嫦師妹、張明美師妹、成衛(wèi)孝師弟、李佳楠師弟在實(shí)驗(yàn)和生活中給予的幫助和支持。感謝25舍室友徐濤、孔寶、李清峰，藍(lán)田44室友虞波、丁騰達(dá)、龍志峰，感謝你們的相伴和給予我的熱情幫助。衷心感謝每一位關(guān)心、支持、幫助過(guò)我的老師和同學(xué)!最后，特別要感謝我的父母，謝謝你們多年來(lái)對(duì)我的鼓勵(lì)和支持，感謝你們對(duì)我最無(wú)私的愛(ài)
3、!謝謝!朱金余2012．03浙大紫金港課題來(lái)源本課題來(lái)源于水體污染控制與治理科技重大專項(xiàng)“太湖流域苕溪農(nóng)業(yè)面源污染河流綜合整治技術(shù)集成與示范工程”．污水處理廠尾水“穩(wěn)定塘．濕地”生態(tài)凈化技術(shù)與示范”(No．2008ZX07101—006．B)。研究意義水體富營(yíng)養(yǎng)化導(dǎo)致的藍(lán)藻爆發(fā)，影響水體景觀和產(chǎn)生惡臭，并導(dǎo)致水中其他生物死亡，更嚴(yán)重的是部分藍(lán)藻會(huì)產(chǎn)生毒素，給生態(tài)系統(tǒng)和公共飲用水安全帶來(lái)極其嚴(yán)重的威脅。近幾十年來(lái)，隨著經(jīng)濟(jì)的飛速發(fā)展，大量的工業(yè)廢水和農(nóng)業(yè)面源污染導(dǎo)致水體中N、P等營(yíng)養(yǎng)元素濃度很高，水華問(wèn)題日益引起人們關(guān)注。銅綠微囊藻是水華時(shí)的優(yōu)勢(shì)藻種，銅綠微囊藻可分為產(chǎn)毒銅綠微囊藻
4、和不產(chǎn)毒銅綠微囊藻，不同的環(huán)境條件可以影響產(chǎn)毒銅綠微囊藻和不產(chǎn)毒銅綠微囊藻的競(jìng)爭(zhēng)關(guān)系，從而使這兩種藻的比例發(fā)生變化。本課題建立一套測(cè)定水中銅綠微囊藻濃度的實(shí)時(shí)熒光定量PCR方法。應(yīng)用實(shí)時(shí)熒光定量PCR分別檢測(cè)混合培養(yǎng)液中產(chǎn)毒銅綠微囊藻和不產(chǎn)毒銅綠微囊藻的量，通過(guò)PB設(shè)計(jì)在光照、溫度、pH、硝態(tài)氮離子濃度、P離子濃度這五個(gè)因素中篩選出三個(gè)顯著的影響因子并應(yīng)用中心組合實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)法設(shè)計(jì)并考察這三個(gè)因素對(duì)產(chǎn)毒／不產(chǎn)毒銅綠微囊藻生長(zhǎng)競(jìng)爭(zhēng)的綜合影響，為進(jìn)一步研究藍(lán)藻水華暴發(fā)機(jī)理提供了參考依據(jù)。n浙江大學(xué)碩士學(xué)位論文摘要銅綠微囊藻是水華時(shí)的優(yōu)勢(shì)藻種，銅綠微囊藻可分為產(chǎn)毒銅綠微囊藻和不產(chǎn)毒銅綠微囊
5、藻，不同的環(huán)境條件可以影響這兩種藻的競(jìng)爭(zhēng)關(guān)系。本文對(duì)比并選擇了一種最佳的銅綠微囊藻DNA提取方法并據(jù)此建立一套測(cè)定水中產(chǎn)毒和不產(chǎn)毒銅綠微囊藻濃度的實(shí)時(shí)熒光定量PCR方法，應(yīng)用該方法檢測(cè)混合培養(yǎng)液中兩張?jiān)辶?，通過(guò)PB設(shè)計(jì)和CCD設(shè)計(jì)考察了光照、溫度、pH、硝態(tài)氮離子濃度、P離子濃度這五個(gè)因素對(duì)產(chǎn)毒／不產(chǎn)毒銅綠微囊藻生長(zhǎng)競(jìng)爭(zhēng)的綜合影響。全文研究?jī)?nèi)容和實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下：(1)分別對(duì)比了SDS裂解法、DNeasyBlood＆TissueKit試劑盒、CTAB提取法提取銅綠微囊藻DNA的效果，結(jié)果表明采用DNeasyBlood&TissueKit試劑盒提取DNA具有很好的重復(fù)性，提取效率穩(wěn)定；
6、SDS裂解法也能有效提取銅綠微囊藻的DNA，但是重復(fù)性略差；CTAB法在提取樣品DNA時(shí)發(fā)生了降解。(2)分別用SDS裂解法和DNeasyBlood&TissueKit試劑盒提取不產(chǎn)毒銅綠微囊藻標(biāo)準(zhǔn)品的DNA并建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。結(jié)果表明采用DNeasyBlood&TissueKit試劑盒提取的標(biāo)準(zhǔn)品DNA具有很好的重復(fù)性，采用該方法提取的標(biāo)準(zhǔn)品DNA經(jīng)PCR擴(kuò)增后可以建立相關(guān)性很好的標(biāo)準(zhǔn)曲線用于產(chǎn)毒和不產(chǎn)毒銅綠微囊藻濃度的定量檢測(cè)。(3)應(yīng)用實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)混合培養(yǎng)液中的產(chǎn)毒銅綠微囊藻和不產(chǎn)毒銅綠微囊藻的細(xì)胞濃度，通過(guò)PB設(shè)計(jì)在光照、溫度、pH、硝態(tài)氮離子濃度、P離子濃度這五個(gè)
7、因素中根據(jù)影響顯著性分析篩選出光照、硝態(tài)氮離子濃度、溫度這三個(gè)影響因子，然后采用中心組合實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)法對(duì)這三個(gè)影響因子進(jìn)行3因素5水平的組合實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果經(jīng)RSM擬合，顯示在混合培養(yǎng)初期，不產(chǎn)毒銅綠微囊藻很快能占據(jù)優(yōu)勢(shì)，而較強(qiáng)的光照強(qiáng)度和較高的硝態(tài)N離子濃度促進(jìn)產(chǎn)毒銅綠微囊藻在混合培養(yǎng)中的競(jìng)爭(zhēng)生長(zhǎng)能力。關(guān)鍵詞：DNA提取；實(shí)時(shí)熒光定量PCR；競(jìng)爭(zhēng)培養(yǎng)；產(chǎn)毒銅綠微囊藻；不產(chǎn)毒銅綠微囊藻III浙江大學(xué)碩士學(xué)位論文AbstractMicrocystisaeruginosaisthema
