豬弓形蟲病的elisa診斷與防治

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1、·８８·《上海畜牧獸醫(yī)通訊》２０１４年第６期豬弓形蟲病的ＥＬＩＳＡ診斷與防治吳玙彤余波徐景峨肖芳萍＊（貴州省畜牧獸醫(yī)研究所貴州貴陽５５０００５）DOI:10.14170/j.cnki.cn31-1278/s.2014.06.037弓形蟲又稱弓形體病，病原是剛地弓形蟲，是面附著一層膠凍樣物，其內(nèi)充滿半透明膠凍樣滲出一種可寄生于人和多種動物體內(nèi)、能引起多種人畜物；切面流出多量稍帶氣泡的液體；氣管和支氣管〔１～２〕共患的原蟲病，常為地方性流行，感染率很高。內(nèi)有大量黏液和泡沫，有的并發(fā)肺炎。全身淋巴結(jié)事實上，絕大部分的豬感染弓形蟲后終身帶蟲但并腫大，有小點壞死灶。腸系膜淋巴結(jié)呈紫紅色串珠〔３〕不表現(xiàn)

2、臨床癥狀。該病近年來在豬場廣泛流行，狀腫大，腹股溝淋巴結(jié)、下頜淋巴結(jié)、肺門淋巴結(jié)腫給生豬和畜牧獸醫(yī)工作人員帶來潛在威脅。２０１４大、充血、岀血，呈紫紅色，切面外翻呈大理石樣變。年，貴陽市南明區(qū)永樂鄉(xiāng)白楊村某商品豬場飼養(yǎng)胃底部有大面積潰瘍，潰瘍面有纖維蛋白附著；脾３００頭豬，在１周內(nèi)豬群發(fā)病共死亡１０多頭，發(fā)病臟腫大、棕紅色，有岀血斑點；肝臟呈灰紅色，有散和死亡的豬體重以１００ｋｇ左右為主，經(jīng)肌肉注射清在針尖大小灰黃色病灶；膀胱黏膜有岀血點。熱解毒、抗病毒、抗生素、血蟲凈等藥物治療無效。３實驗室診斷１月上旬，筆者根據(jù)臨床癥狀、剖檢變化、ＥＬＩＳＡ方３．１病料采集法診斷對該場病豬死因進行了確診，

3、結(jié)果為豬弓形無菌采集１９頭病豬的耳靜脈血，分離血清，涂蟲病感染。血片３５張；解剖１頭病死豬，采集淋巴結(jié)５份，心１臨床癥狀臟、肝臟、脾臟、肺臟、腎臟組織各１份；取腹腔積液２０１４年１月，貴陽市南明區(qū)永樂鄉(xiāng)白楊村某商１００ｍＬ。品豬場豬發(fā)病，短短１周就死亡１０多頭，病死豬６３．２診斷試劑月齡、體重１００ｋｇ左右；另有５０多頭豬臨床癥狀明弓形蟲ＥＬＩＳＡ診斷試劑盒，購自中國農(nóng)業(yè)科學(xué)顯，精神不振，食欲減退或廢絕，咳嗽，流漿液性鼻院蘭州獸醫(yī)研究所，其陽性血清、陰性血清批號為液，呼吸困難，嚴重者呈犬坐姿勢。體溫４０～４２℃，１３０３０５，抗原、稀釋液批號為１３０６１５。快速鏡檢診斷眼結(jié)膜充血潮紅，有眼屎

4、，多數(shù)排干硬、呈栗狀附有試劑，由貴州省畜牧獸醫(yī)研究所研制。弓形蟲ＥＬＩＳＡ黏液的糞便。嚴重者皮膚有岀血斑點，尤以腹下明抗原、包被液、稀釋液、洗滌液、陽性對照血清、陰性對顯，觸診腹股溝淋巴結(jié)腫大呈棒狀。經(jīng)肌肉注射清照血清，均購自蘭州獸醫(yī)研究所。滅菌純水。熱解毒、抗病毒、抗生素、血蟲凈等藥物治療無效。３．３試驗儀器尿液呈黃色，發(fā)病的末期病豬的鼻鏡、耳翼、四肢下豬弓形蟲體檢測反應(yīng)試劑盒（蘭州獸醫(yī)研究部及腹下部均有紫紅色的斑點出現(xiàn)，最后極難進行所），移液器（芬蘭雷勃）０．５～１０μＬ、５～５０μＬ、２０～呼吸，臥地不起或即使能起也是后軀搖晃，體溫快２００μＬ、１００～１０００μＬ，２０～２００μＬ１

5、８道移液器速下降，最后死亡。有的病豬耳殼上有痂皮形成，（德國普蘭德），移液頭，１．５、１０ｍＬＥＰ管，加樣槽，甚至耳尖有干性壞死發(fā)生。發(fā)病豬的體表淋巴，尤ＤＴ５－１Ｂ離心機（北京時代北利離心機有限公司），其腹股溝的淋巴結(jié)明顯出現(xiàn)腫大。ＴＨＺ－９８Ａ型恒溫震蕩器（上海一恒科學(xué)儀器有限２病理變化公司），ＢｉｏＴｅｋ－ＥＬｘ８００酶標儀等。對１頭瀕臨死亡的仔豬進行病理剖檢，仔豬膘３．４診斷方法情良好，鼻端、耳朵、眼結(jié)膜發(fā)紺，腹下有大片岀血３．４．１鏡檢：肺門、腸系膜淋巴結(jié)切面觸片，自然干斑點。腹腔、胸腔、心包腔積有多量的黃色液體。燥后，瑞氏染色，用油鏡觀察多個視野，用一次性注射肺臟體積增大，嚴重水

6、腫，小葉間質(zhì)明顯增寬，肺表器采集３０ｍＬ胸腔積液，經(jīng)１５００～２０００ｒ／ｍｉｎ離心５ｍｉｎ后，棄去上清液，取沉淀物少許涂片、瑞氏染色，　　＊為通訊作者置油鏡下觀察?；痦椖浚菏〖夀r(nóng)業(yè)科技示范園區(qū)項目（筑科合同〔２０１３１０２〕１－２－２號）３．４．２弓形蟲ＥＬＩＳＡ試劑盒檢測法：（１）在反應(yīng)板《上海畜牧獸醫(yī)通訊》２０１４年第６期·８９·孔內(nèi)加入稀釋液稀釋好的被檢血清，陽性血清、陰動物是中間宿主，貓（以及其他貓科動物）是唯一的性血清各０．２ｍＬ，置濕盒內(nèi)于３７℃溫箱感作２ｈ，終末宿主。貓食入含包囊形蟲體的動物組織或發(fā)甩去血清，洗滌５次拍干后，加入稀釋好的酶標記物育成熟的卵囊，在腸內(nèi)進行繁殖后

7、，形成卵囊，隨糞０．２ｍＬ置于３７℃溫箱感作２ｈ，棄去液體，洗滌５便排出體外，污染飼料、飲水等。患弓形蟲病的貓〔５〕次后拍干加顯色劑，振蕩混勻，避光反應(yīng)后加入終最高峰每日可排１０～１００萬個卵囊。此次本豬場止液振蕩充分混勻，用酶標儀測定其在波長４９０ｎｍ暴發(fā)豬弓形蟲病與毒鼠藥的禁用和農(nóng)村養(yǎng)貓增多下的ＯＤ值，操作步驟按豬弓形蟲抗體檢測試劑盒密切相關(guān)。為了有效預(yù)防豬弓形蟲病，必須限制貓法（ＥＬＩＳＡ）說明進行。（