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《附“移液器操作”操作考核步驟與操作規(guī)范》由會員上傳分享,免費(fèi)在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、“移液器使用和養(yǎng)護(hù)”操作考核說明移液器的考核旨在規(guī)范移液器的使用,利用葡萄糖試劑盒(Glucosekit)檢測血清標(biāo)準(zhǔn)品的吸光值,主要考察移液器的操作規(guī)范和加樣的準(zhǔn)確性。1考核標(biāo)準(zhǔn):21.1檢測結(jié)果(CV值、R值)參考標(biāo)準(zhǔn)::1.1.1CV值:CV≤3.0為及格,CV值越小,表示每次加樣越均一、誤差越??;2221.1.2R值:R≥0.9960為及格,R值越接近1,3點(diǎn)稀釋越接近同一條直線,表示稀釋越精準(zhǔn)。1.2、成績計(jì)算1.2.1.考生考核成績由酶標(biāo)儀測定成績和考生操作成績兩部分組成;酶標(biāo)儀測定成績(即結(jié)果成績)占60%,;考生操作成績占40%;1.2.2.考生最終成績以百
2、分制計(jì)算(結(jié)果成績滿分為60分,操作成績滿分為40分),結(jié)果成績折算方法:結(jié)果成績=108/CV值(即CV值小于1.8者,結(jié)果成績?yōu)闈M分);1.2.3第一次通過,最終成績不作減分處理;第二次才通過,最終成績=60+(第二次成績-60)x80%。2材料和試劑的準(zhǔn)備:2.1100μL、20μL、10ul、2.5μL四種規(guī)格的移液器各1把。2.2200μL、10μL兩種規(guī)格的吸頭各一盒。2.3工作液、標(biāo)準(zhǔn)品、滅菌超純水(ddH2O)。3操作步驟:3.1、吸取適量工作液(不少于2400μL)。3.2、準(zhǔn)備好①標(biāo)準(zhǔn)品原液②稀釋液A(1/2原液濃度)③稀釋液B(1/4原液濃度)。稀釋液
3、A和稀釋液B的配制方法如下:稀釋液A:28μL=14μL標(biāo)準(zhǔn)品原液+14μL超純水稀釋液B:18μL=9μL稀釋液A+9μL超純水3.3、將工作液加入酶標(biāo)板孔中,每孔加100μL,共8(孔)×3(排)=24個(gè)孔;13.4、向裝有工作液的3行8孔酶標(biāo)板中分別加入①標(biāo)準(zhǔn)品原液(第一行)②稀釋液A(第二行)③稀釋液B(第三行)各一行,每孔加入2.0μL(注意:每孔須換槍頭);3.5、加樣完成,將酶標(biāo)板輕輕搖勻后,放入PE手套內(nèi),并做好標(biāo)記(姓名),然后放入37℃恒溫箱內(nèi)溫浴15min。此間考生可以在考核室外等待。待溫浴時(shí)間到,取出酶標(biāo)板至酶標(biāo)儀檢測。3.6、檢測結(jié)束,監(jiān)考人員登記
4、考試結(jié)果后,考生離開考場。附:1考試時(shí)間安排1.1考試時(shí)間:考生需按照安排時(shí)間提前10min至考核室簽到,如有事無法進(jìn)行考核,應(yīng)安排替換人,并盡量于前一天郵件通知培訓(xùn)部負(fù)責(zé)教務(wù)的同事,或至少提前30min電話通知,如開考尚未簽到,視為缺考。1.2考試時(shí)間為30min(其中操作時(shí)間為20min),從考生進(jìn)入考場開始計(jì)時(shí),考生必須在規(guī)定時(shí)間內(nèi)完成所有實(shí)驗(yàn)操作,考試時(shí)間結(jié)束,考生應(yīng)立即停止操作,將裝入手套的酶標(biāo)板放入烘箱,收拾好臺面,離開考場。若超出時(shí)間在5min以內(nèi),每分鐘扣除1分,若考生超出5min以上,則此次考試作不通過處理。2考場紀(jì)律2.1考生應(yīng)按時(shí)進(jìn)入考場,考核期間保持
5、安靜??荚囃戤叺目忌鷳?yīng)盡快離開考場,等溫浴時(shí)間到時(shí)再返回考場取出酶標(biāo)板進(jìn)行測試,測試完畢后應(yīng)迅速離開考場,不得在考場圍觀。違反者取消當(dāng)天考試資格。2移液器考核操作規(guī)范考點(diǎn)說明考生考核前,須仔細(xì)閱讀本考核規(guī)范,進(jìn)入考場時(shí),監(jiān)考老師不再對考核原理及流程進(jìn)行說明。1實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備:1.1在進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室前,自覺穿上實(shí)驗(yàn)服,實(shí)驗(yàn)前帶好手套,必要時(shí)戴上口罩,用酒精擦拭桌面。1.2物品擺放規(guī)范:準(zhǔn)備所需的物品,以“規(guī)范操作,防止污染”為原則——通常為“左凈右臟”,合理擺放。1.2.1操作人正前方為操作區(qū),試劑放于操作區(qū)左方,將槍頭盒放在操作區(qū)的右方,將垃圾桶放于操作區(qū)的右方較遠(yuǎn)處,并盡量遠(yuǎn)離操作
6、區(qū)和槍頭盒。1.2.2附圖:實(shí)驗(yàn)物品擺放圖移液架試劑槍頭盒垃圾桶操作區(qū)2加樣2.1握槍姿勢規(guī)范2.1.1考生在吸排液體時(shí),握移液槍姿勢正確,垂直吸排液。若操作需要,無法0保持垂直,移液器傾斜度不允許超過45;2.1.2手不能接觸槍套筒下端作為支撐,防止污染,若手抖難以控制,只可扶住移液器套筒的上端部分支撐;2.2裝配槍頭:將移液器吸嘴垂直插入吸頭,向下輕壓,順時(shí)鐘微微旋動,上緊即可;不允許采用上下反復(fù)撞擊的方式上槍頭;2.3吸液:2.3.1吸頭進(jìn)入液面深度控制好;參考深度:10ul吸頭——1~2mm3200ul吸頭——2~3mm1000ul吸頭——3~5mm2.3.2慢吸慢
7、打,不允許出現(xiàn)液體倒吸至移液器內(nèi)部;2.3.3吸液完成,吸頭需在液面下停頓1s左右,再離開液面。2.4排液:2.4.1勻速按下控制按鈕排液,第一檔打完,停頓1s左右后,再打第二檔;2.4.2吸頭離開液面后,才可放開控制按鈕;2.5按彈射鍵將吸頭丟棄。3實(shí)驗(yàn)素質(zhì)操作規(guī)范:以“保護(hù)試劑,防止污染”為原則3.1在實(shí)驗(yàn)操作過程中,酶標(biāo)板底不可直接接觸桌面,中間鋪上塑料手套;3.2移液槍放置:加樣期間不用移液器時(shí)需放置槍架上,不可水平放置在桌面;更不允許在移液器吸頭內(nèi)有液體時(shí)將其橫放;3.3EP管的使用:3.3.1考生從盒子