blast簡介及單機(jī)版

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1、簡介Blast,全稱BasicLocalAlignmentSearchTool,即"基于局部比對(duì)算法的搜索工具",由Altschul等人于1990年發(fā)布。Blast能夠?qū)崿F(xiàn)比較兩段核酸或者蛋白序列之間的同源性的功能,它能夠快速的找到兩段序列之間的同源序列并對(duì)比對(duì)區(qū)域進(jìn)行打分以確定同源性的高低。Blast的運(yùn)行方式是先用目標(biāo)序列建數(shù)據(jù)庫(這種數(shù)據(jù)庫稱為database,里面的每一條序列稱為subject),然后用待查的序列(稱為query)在database中搜索,每一條query與database中的每一條subject都要進(jìn)行雙序列

2、比對(duì),從而得出全部比對(duì)結(jié)果。Blast是一個(gè)集成的程序包,通過調(diào)用不同的比對(duì)模塊,blast實(shí)現(xiàn)了五種可能的序列比對(duì)方式:blastp:蛋白序列與蛋白庫做比對(duì),直接比對(duì)蛋白序列的同源性。blastx:核酸序列對(duì)蛋白庫的比對(duì),先將核酸序列翻譯成蛋白序列(根據(jù)相位可以翻譯為6種可能的蛋白序列),然后再與蛋白庫做比對(duì)。blastn:核酸序列對(duì)核酸庫的比對(duì),直接比較核酸序列的同源性。tblastn:蛋白序列對(duì)核酸庫的比對(duì),將庫中的核酸翻譯成蛋白序列,然后進(jìn)行比對(duì)。tblastx:核酸序列對(duì)核酸庫在蛋白級(jí)別的比對(duì),將庫和待查序列都翻譯成蛋白序列

3、,然后對(duì)蛋白序列進(jìn)行比對(duì)。Blast提供了核酸和蛋白序列之間所有可能的比對(duì)方式,同時(shí)具有較快的比對(duì)速度和較高的比對(duì)精度,因此在常規(guī)雙序列比對(duì)分析中應(yīng)用最為廣泛。可以毫不夸張的說,blast是做比較基因組學(xué)乃至整個(gè)生物信息學(xué)研究所必須掌握的一種比對(duì)工具。下載NCBI提供免費(fèi)下載,網(wǎng)址:ftp://ftp.ncbi.nih.gov/blast/executables/release/,可根據(jù)自己得機(jī)器選擇相應(yīng)操作系統(tǒng)的版本。安裝直接解壓縮包即可。解壓縮命令:zcat*.tar.gz

4、tarxvf-使用Blast的運(yùn)行分為兩個(gè)步驟:第一,建

5、立目標(biāo)序列的數(shù)據(jù)庫;第二,做blast比對(duì)。1.運(yùn)行建庫程序formatdb:建庫的過程是建立目標(biāo)序列的索引文件,所用程序是formatdb。程序允許的輸入格式FASTA或者ASN.1格式,通常我們使用FASTA格式的序列作為輸入。用于建庫的FASTA序列是db.seq,formatdb的基本命令是:formatdb-idb.seq[-options]常用的參數(shù)有以下幾個(gè):-p(T/F):-p參數(shù)的意義是選擇建庫的類型,"T"表示蛋白庫,"F"表示核酸庫。缺省值為"T"。-o(T/F):-o參數(shù)的意義是判斷是否分析序列名并建立序列名索

6、引。"T"表示建立序列名索引,"F"表示不建立序列名索引。缺省值為"F"。程序輸出:如果建立的是核酸庫,輸出為db.seq.nhr、db.seq.nin、db.seq.nsq,如果選擇了參數(shù)"-oT",還會(huì)同時(shí)輸出db.seq.nsd、db.seq.nsi、db.seq.nni、db.seq.nnd。蛋白庫和核酸庫的輸出類似,相應(yīng)的輸出文件為:db.seq.phr、db.seq.pin、db.seq.psq和db.seq.psd、db.seq.psi、db.seq.pni、db.seq.pnd。除了這些結(jié)果,程序還會(huì)輸出LOG文件(默

7、認(rèn)為formatdb.log),里面記錄了運(yùn)行時(shí)間、版本號(hào)、序列數(shù)量等信息。幾點(diǎn)需要注意的問題:1、建庫以后,做blast比對(duì)的輸入文件就是建庫所得的文件db.seq.n**或者db.seq.p**,而不是原始的FASTA序列。也就是說,建庫以后,原始的序列文件是可以刪除的。2、如果命令行中選擇了"-oT",并且目標(biāo)序列中含有g(shù)i號(hào)重復(fù)的的序列名時(shí),程序會(huì)停止建庫并報(bào)錯(cuò)。例如,下列序列文件中出現(xiàn)了重復(fù)的序列名:>gi

8、112385745

9、gb

10、DQ859020.1

11、Oryzasativa(japonicacultivar-group)

12、glutathioneS-transferase2mRNA,completecdsATGGCGGAGGCGGCGGGGGCGGCGGTGGCGCCGGCGAAGCTGGGTCTGTACTCGTACTGGCGGAGCTCGTGCTCGCACCGCGTCCGCATCGCCCTCAACCTCAAAGGATTGGAGTACGAGTACAAGGCGGTGAACCTGCTCAAGGGGGAGCACTCTGATCCAGAATTCATGAAGGTTAATCCTATGAAGTTCGTCCCGGCATTGGTCGAT......CAAGCAGCACTCC

13、CAGACAGACAACCAGATGCCCCTTCCTCTACCTAG>gi

14、112385745

15、gb

16、DQ859020.1

17、Oryzasativa(japonicacultivar-group)glutathioneS

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