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1、實驗室工程標準的PCR實驗室[車城熱線www.sy110.com]實驗室工程標準的PCR實驗室2011年10月24日 車城熱線www.sy110.commendations 在理想情況下,PCR實驗室試劑預備、標本制備、擴增三個區(qū)域可設置緩沖間.在緩沖間內,可設置正壓,使室內空氣不流向室外,室外空氣不流向室內. PCR實驗室平面布置示意圖 一般實驗室間隔材料分:彩鋼板,不銹鋼板,理化板等,價格依次而上, 主要考慮不產塵,不滋菌,輕易清理就行 一般實驗室間隔材料分:彩鋼板,不銹鋼板,理化板等,價格依次而上, 主要考慮不產塵,不滋菌,輕易清理就行 **衛(wèi)生部PCR研究員李金明(衛(wèi)
2、生部臨床檢驗中心臨床免疫室主任,研究員)的PCR建設方案再說吧!國外的資料不一定是最好.個人覺得李金明的實驗室區(qū)正壓(擴增分析區(qū)由于沒有緩沖,所以為負壓),緩沖間負壓的作法可以更好的防止氣體的外泄及防止試劑預備區(qū)、標本制備區(qū)、產物擴增區(qū)、擴增分析區(qū)四區(qū)之間的氣體相互滲漏.PCR實驗室也可以分為三個區(qū),即第三、四區(qū)合為一區(qū),必須設立緩沖間.有條件建設實驗室采用三十萬級的標準來建設.空調系統采用制冷劑各區(qū)獨立循環(huán),可以防止氣流交叉. **疾病預防控制中心實驗室建設之PCR實驗室基本要求: PCR實驗室可以是分散形式,也可以是組合形式.完成一組PCR實驗,通常應經過試劑配制、樣品處理、核酸擴增
3、及產物分析四個實驗過程,若實驗工藝需要,還應增加樣品粉碎過程. 一、分散形式PCR實驗室 所謂分散形式PCR實驗室,是指完成上述實驗過程的實驗用房彼此相距較遠,呈分散布置形式.對于這種布置形式的PCR實驗室,由于各個實驗之間不易相互干擾,因此無需特殊條件要求. 二、組合形式PCR實驗室 所謂組合形式PCR實驗室,是指完成PCR四個實驗過程的實驗用房相鄰布置,組成獨立實驗區(qū)域的形式.對于組合形式PCR實驗室,由于各個實驗間集中布置,輕易造成相互干擾,因此,對總體布局以及屏障系統具有一定的要求.各室在進口處設緩沖間,以減少室內外空氣交換.試劑配制室及樣品處理室宜呈微正壓,以防外界含核酸氣
4、溶膠的空氣進進,造成污染;核酸擴增室及產物分析室應呈微負壓,以防含核酸的氣溶膠擴散出往污染試劑與樣品. 假如使用熒光PCR儀,擴增室和產物分析室可以合并. 若房間進深答應,可設PCR內部專用走廊.需要指出的是在減少室內外空氣交換方面,緩沖間比專用走廊更有意義. **PCR實驗區(qū)的設置,幾個要留意的題目: 1、幾個區(qū)域的大小設置情況,應該是試劑預備區(qū)、產物擴增區(qū)、擴增分析區(qū),要小一些.標本制備區(qū)應大一些.由于,標本制備室要放置一個生物安全柜為一個低溫冰箱. 2、試劑預備區(qū)、標本制備區(qū)就設立緊急洗眼器,以備不時之需. 3、PCR實驗室的潔凈度可以根據用戶的實際使用情況和資金的投進來設
5、計. **臨床基因擴增檢驗實驗室基本設置標準 根據《臨床檢驗擴增檢驗實驗室治理暫行辦法》,制定本標準 一、臨床基因擴增檢驗實驗室區(qū)域設置原則 (一)臨床基因擴增檢驗實驗室區(qū)域設置原則 1、試劑儲存和預備區(qū) 2、標本制備區(qū) 3、擴增反應混合物配制和擴增區(qū) 4、擴增產物分析區(qū) 如使用全自動分析儀,區(qū)域可適當合并. (二)各工作區(qū)域必須有明確的標記,避免不同工作區(qū)域內的設備、物品混用. (三)進進各工作區(qū)域必須嚴格按照單一方向進行,即試劑儲存和預備區(qū)m>標本制備區(qū)m>擴增反應混合物配制和擴增區(qū)m>擴增產物分析區(qū). (四)不同的工作區(qū)域使用不同的工作服(例如不同的顏色).工作
6、職員離開各工作區(qū)域時,不得將工作服帶出. 二、工作區(qū)域儀器設備配置標準 (一)試劑儲存和預備區(qū) 1、2-8C和-15C冰箱 2、混勻器 3、微量加樣器(覆蓋1-1000ul) 4、移動紫外燈(近工作臺面) 5、消耗品:一次性手套、一次性吸水紙、耐高壓處理的離心管和加樣器吸頭(帶濾心) 6、專用工作服和工作鞋 7、專用辦公用品 (二)標本制備區(qū) 1、2-8C冰箱、-20C或-80C冰箱 2、高速臺式冷凍離心機 3、混允器 4、水浴箱或加熱模塊 5、微量加樣器(覆蓋1-1000ul) 6、可移動紫外燈(近工作臺面) 7、超凈工作臺 8、消耗品:一次性手套、一次
7、性吸水紙、耐高壓處理的離心管和加樣器吸頭(帶濾心) 9、專用工作服和工作鞋 10、專用辦公用品 如需處理大分子DNA,應具有超聲波水浴儀. (三)擴增反應混合物配制和擴增區(qū) 1、核酸擴增儀 2、微量加樣器(覆蓋1-1000ul) 3、可移動紫外燈(近工作臺面) 4、消耗品:一次性手套、一次性吸水紙、耐高壓處理的離心管和加樣器吸頭(帶濾心) 5、專用工作服和工作鞋 6、專用辦公用品 (四)
