維藥芹菜籽總黃酮含量測定及提取工藝研究

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1、維藥芹菜籽總黃酮含量測定及提取工藝研究作者：烏莉婭沙衣提耿萍虞慧云【摘要】目的檢測維藥芹菜籽中總黃酮的含量,并優(yōu)選其提取工藝。方法分別采用超聲提取法和索氏提取法，用比色法比較維藥芹菜籽中總黃酮的含量。結(jié)果以蘆丁為對照品時，超聲提取法測得芹菜籽中總黃酮的含量為19.61%；索氏提取法測得芹菜籽中總黃酮的含量為16.32%。結(jié)論超聲提取法更為簡便、穩(wěn)定、可行、重現(xiàn)性好?！娟P(guān)鍵詞】芹菜籽總黃酮提取　　Abstract：ObjectiveTodeterminethecontentoftotalflavonoidsandoptimizetheextra

2、ctingprocessinUygurmedicineCeleryseeds.MethodsThetethods:UltrasonicextractionandSoxhlet'sextracteretry.ResultsiningthecontentoftotalflavonoidsinCeleryseedsextractisconvenient,stable,practicible,andreproducible.　　KeygraveolensL.又名香芹、旱芹，是傘形科一年生或兩年生草本植物，喜肥沃土壤，全國和世界各地均有栽培［1］。維藥

3、芹菜籽是芹菜的干燥成熟果實。維醫(yī)臨床表明，其性二級干熱，具有散氣、消腫、止痛、利尿、降血壓的作用。在維吾爾藥中主要用于治療高血壓病、關(guān)節(jié)炎、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、氣滯性子宮炎、腹水、腎臟等疾?。?］。目前對其揮發(fā)油成分研究的比較多，其揮發(fā)油主要成分為α-芹子烯、檸檬烯、丁基苯酞等［3，4］。并且從其正丁醇部位分離出4個黃酮類化合物［5］，分別為：木犀草素3′O.D葡萄糖苷，木犀草素7O.D葡萄糖苷，香葉木素7O.D葡萄糖苷，柯伊利素。實驗表明，芹菜中含有豐富的黃酮類化合物［6］，具有降壓安神、降血脂、保護(hù)血管和增強免疫力

4、等功能［7］。但對其黃酮含量測定的研究還未見報道。本實驗擬對兩種方法提取物中總黃酮含量進(jìn)行分析測定，旨在為維醫(yī)臨床用藥及對芹菜的綜合開發(fā)利用提供科學(xué)依據(jù)。　　1儀器與材料　　1.1儀器Spectrumlab54紫外分光光度計(上海市棱光有限公司);KQ-400DB型數(shù)控超聲清洗器(昆山市超聲儀器有限公司);電子天平(sartorius德國產(chǎn));DZF-6021型真空干燥箱(上海精密實驗設(shè)備有限公司);DRT-SX型恒溫電熱套（鄭州長城科工貿(mào)有限公司）；RE-52旋轉(zhuǎn)式蒸發(fā)器(上海亞榮生化儀器廠)；SHB-III循環(huán)水式多用真空泵（鄭州長城科工

5、貿(mào)有限公司）?！　?.2材料蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品(中國藥品生物制品檢定所,0080-9705)；芹菜籽（購于新疆和闐維吾爾醫(yī)院，由本校烏莉婭老師鑒定）；所用試劑均為分析純?！　?方法與結(jié)果　　2.1樣品溶液的制備　　2.1.1精密稱取芹菜籽2g，置于干燥的索氏提取器中，用石油醚回流脫脂1h，棄去石油醚提取液。再加入甲醇20ml超聲提取兩次，時間分別為30，20min，超聲溫度為25℃，過濾并合并濾液?；厥占状?，揮干后用甲醇溶解，置于25ml容量瓶中加甲醇定容，搖勻。此為樣品溶液Ⅰ?！　?.1.2稱取芹菜籽細(xì)粉2g，于真空干燥箱中干燥6h，溫度為60℃，

6、精密稱定置于干燥的索氏提取器中,加入乙醚120ml，加熱回流至提取液無色，放冷，棄去乙醚液，再加甲醇90ml，加熱回流至提取液無色，過濾，將濾液回收甲醇，揮干后再用甲醇溶解，移至25ml容量瓶中，用少量甲醇洗滌容器，洗液并入容量瓶中，并定容［8］。此為樣品溶液Ⅱ。　　2.2總黃酮的含量測定［9］　　2.2.1對照品溶液的制備取在120℃減壓干燥至恒重的蘆丁對照品20mg，置于100ml容量瓶中，加甲醇適量置水浴上微熱使之溶解，放冷并稀釋至刻度，搖勻，即得0.2mg/ml蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品。備用?！　?.2.2標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備［10］及線性關(guān)系精密吸取上

7、述對照品液0.0，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0ml分別置于25ml容量瓶中，加蒸餾水至6ml，加5%亞硝酸鈉溶液1ml，使混勻，放置6min，加10%硝酸鋁溶液1ml，搖勻，放置6min，加4%氫氧化鈉溶液10ml，再加水稀釋至刻度，搖勻，放置15min。取出以第1份為空白溶液,在510nm處測吸光度，以濃度為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。結(jié)果見表1?！　”?標(biāo)準(zhǔn)曲線數(shù)據(jù)（略）　　以上表明在0.008～0.040mg·ml-1范圍內(nèi)，濃度和吸光度呈良好的線性關(guān)系。標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為：A=14.925C-0.015，r=0.9996

8、　　2.2.3穩(wěn)定性實驗分別精密吸取樣品溶液Ⅰ，Ⅱ各2ml，置于10ml具塞試管中，同制備標(biāo)準(zhǔn)曲線的操作，在0，15，30，45，60min測得吸光度，結(jié)果見表2。