冬蟲夏草對小鼠淋巴細(xì)胞增殖和il2產(chǎn)生的作用

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1、冬蟲夏草對小鼠淋巴細(xì)胞增殖和IL2產(chǎn)生的作用【Abstract】ObjectiveToresearchtheeffectofcordycepssinensissacc.（CSS)fromtheviemunology.Methods24miceentalgroup)randomly.Filledthestomachesphocyteproliferationandinterleukin2production.Resultsparedphocyteproliferationandinterleukin2productionincreasedsi

2、gnificantlyinexperimentalgroup(P＜0.01).ConclusionTheresultsindicatedthatCSScouldenhanceimmunefunctionobviously.【Keyphocyteproliferation,IL2，mouse冬蟲夏草，始載于《本草綱目拾遺》，因其冬季為蟲，夏季為草，故名；為麥角菌科真菌冬蟲夏草［cordycepssinensis(Berk.)sacc.，CSS］，寄生蝙蝠蛾科昆蟲幼蟲上的子座及幼蟲尸體的復(fù)合體，主要功效為益腎補(bǔ)肺、止血化痰、止嗽定喘［1］。我們對

3、冬蟲夏草進(jìn)行了淋巴細(xì)胞增殖和IL2免疫學(xué)方面的初步研究。1材料與方法1.1試劑和儀器冬蟲夏草購采自濱州醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院。水煎液制備：取冬蟲夏草200g，加2000ml水，浸泡2h，水煎2次，每次煮沸30min，合并水煎液，濃縮成200ml備用。RPMI1640為GIBO公司產(chǎn)品，LPL和ConA為美國Sigma產(chǎn)品，MTT為FLUKA公司產(chǎn)品，二甲基亞砜(DMSO)為蘇州化工研究所產(chǎn)。美國產(chǎn)全自動酶標(biāo)儀（Multiskan)，CO2培養(yǎng)箱，由美國Former公司生產(chǎn)，低速冷凍離心機(jī)(Beckman,USA)，超凈工作臺由蘇州凈化設(shè)備廠生產(chǎn)，1

4、00目不銹鋼網(wǎng)，50ml離心管。1．2動物分組與給藥BALB/C小鼠24只，體重18～22g，雌雄不限，購于北京醫(yī)科大學(xué)實驗動物中心。將動物隨機(jī)分為兩組，每組12只。Ⅰ組為生理鹽水對照組，Ⅱ組為冬蟲夏草實驗組。Ⅰ組用生理鹽水灌胃，0.5ml/（次·只），1次/天；Ⅱ組用冬蟲夏草液灌胃，0.5ml/（次·只），1次/天，共15次。1．3檢測指標(biāo)及方法1．3．1淋巴細(xì)胞增殖反應(yīng)［2］：無菌制備小鼠脾細(xì)胞懸液，用RPMI1640不完全培養(yǎng)液洗滌2次，每次1000r/min，離心10min，然后用完全培養(yǎng)液配成5×106/ml，取100μl加入96孔

5、細(xì)胞培養(yǎng)板（每孔含5×106/ml個細(xì)胞），加入終濃度為5μg/ml的ConA，置37℃，5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48h后,每孔加入10μlMTT溶液（5mg/ml），再繼續(xù)培養(yǎng)12h，然后加入DMSO100μl，充分震蕩后靜止20min，全自動酶標(biāo)儀用560nm波長進(jìn)行比色分析。1.3.2IL2的誘生：取上述已制備的脾細(xì)胞懸液5×106/ml，放入培養(yǎng)瓶，置37℃，5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)40h，離心收集上清液，置-20℃冰箱保存?zhèn)溆?。制備活化的脾淋巴?xì)胞［3，4］：按上法無菌取正常BALB/C小鼠脾臟，制成5×106/ml細(xì)胞懸液，加入Con

6、A使其終濃度為5μg/ml，置37℃，5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48h，收集細(xì)胞，離心洗滌2次，用完全RPMI1640配成5×105/ml細(xì)胞懸液，作為檢測IL2的反應(yīng)細(xì)胞。1．4結(jié)果處理實驗結(jié)果采用組間均數(shù)差異t檢驗的方法進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析。2結(jié)果冬蟲夏草對小鼠淋巴細(xì)胞增殖反應(yīng)和IL2產(chǎn)生的影響見表1。表1冬蟲夏草對小鼠淋巴細(xì)胞增殖反應(yīng)和IL2產(chǎn)生的影響表1顯示實驗組對脾淋巴細(xì)胞增殖反應(yīng)明顯，IL2的產(chǎn)生明顯增強(qiáng)，與對照組相比有非常顯著性差異（P＜0.01）。3討論本實驗研究了冬蟲夏草對小鼠淋巴細(xì)胞增殖和IL2產(chǎn)生的影響，結(jié)果表明冬蟲夏草可

7、使ConA激發(fā)的T淋巴細(xì)胞增殖反應(yīng)明顯增強(qiáng)，表明冬蟲夏草對T淋巴細(xì)胞功能具有增強(qiáng)作用，同時對B淋巴細(xì)胞免疫功能也具有明顯增強(qiáng)作用。已知T細(xì)胞是機(jī)體免疫系統(tǒng)賴以實現(xiàn)免疫調(diào)節(jié)的重要細(xì)胞，在機(jī)體特異性免疫應(yīng)答中起核心作用，T細(xì)胞功能障礙會直接影響機(jī)體的細(xì)胞免疫應(yīng)答和免疫調(diào)節(jié)。本研究還發(fā)現(xiàn)冬蟲夏草對細(xì)胞因子IL2的產(chǎn)生有促進(jìn)作用。IL2主要是由輔助T細(xì)胞產(chǎn)生的非特異性細(xì)胞因子，作用于活化的T細(xì)胞促進(jìn)其增殖，并對B細(xì)胞有調(diào)節(jié)作用。冬蟲夏草可明顯促進(jìn)小鼠脾細(xì)胞產(chǎn)生IL2，間接增強(qiáng)體液免疫應(yīng)答。分析上述免疫指標(biāo)改變的原因可能是冬蟲夏草對T淋巴細(xì)胞的直接

8、促進(jìn)作用，或作用于巨噬細(xì)胞促進(jìn)T淋巴細(xì)胞的產(chǎn)生，從而促進(jìn)了T淋巴細(xì)胞及IL2的產(chǎn)生。以上兩項免疫學(xué)指標(biāo)均明顯增強(qiáng)，組間相比均有非常顯著性差異（P＜0