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1、卵巢癌組織中uPA與PAI1mRNA表達(dá)及意義【摘要】目的探討尿激酶型纖溶酶原激活劑(uPA)和纖溶酶原激活劑抑制物?1（PAI?1）mRNA在卵巢癌組織中的表達(dá)及其臨床意義。方法采用逆轉(zhuǎn)錄?聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù),檢測38例卵巢癌、21例卵巢良性上皮性腫瘤及17例正常卵巢組織中uPA及PAI?1mRNA的表達(dá)，并分析其與病理分化程度的相關(guān)性。結(jié)果uPA及PAI?1mRNA在卵巢癌中的表達(dá)水平均較卵巢良性上皮性腫瘤、正常卵巢組織顯著升高(F=184.51、51.00，q=11.34～26.69,P<0.05)。在不同分化程度的卵巢癌組織中uPA及PAI?1mRNA的
2、表達(dá)量隨腫瘤分化程度的降低而增加(F=110.62、38.43,q=3.10～6.86，P<0.05)。結(jié)論卵巢癌組織中uPA及PAI?1mRNA呈高表達(dá),且與卵巢癌的病理分化程度相關(guān)?！娟P(guān)鍵詞】卵巢腫瘤尿纖溶酶原激活物纖溶酶原滅活劑基因表達(dá)［ABSTRACT］ObjectiveToexploretheexpressionsandtheirsignificanceofurokinase?typeplasminogenactivator(uPA)andplasminogenactivatorinhibitor?1(PAI?1)inovariancancer.Me
3、thodsTheexpressionsofuPAmRNAandPAI?1mRNAor(n=21)andnormalovary(n=17).ResultsTheexpressionsofuPAmRNAandPAI?1mRNAinthecancertissueorandnormalovariantissue(F=184.51,51.00;q=11.34-26.69;P<0.05).AnegativecorrelationexistedbetRNAandPAI?1mRNAandthedifferentiationofthecancer,thehigherofexpr
4、essionsofuPAmRNAandPAI?1mRNA,theloRNAandPAI?1mRNAs;urinaryplasminogenactivator;plasminogeninactivators；geneexpression腫瘤細(xì)胞的浸潤和轉(zhuǎn)移能力與其降解細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)有關(guān)。細(xì)胞外基質(zhì)降解和基膜破壞是腫瘤浸潤、轉(zhuǎn)移的必要條件,其中尿激酶型纖溶酶原激活劑（uPA）系統(tǒng)介導(dǎo)的細(xì)胞外基質(zhì)水解起著重要作用［1］。本研究采用逆轉(zhuǎn)錄?聚合酶鏈反應(yīng)(RT?PCR)測定uPA及纖溶酶原激活劑抑制物?1（PAI?1）mRNA在卵巢癌中的表達(dá),探討其與臨床病理分化程度的
5、關(guān)系。1資料與方法1.1一般資料2005年1月～2006年5月，收集青島大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院婦科治療的病人的標(biāo)本共76例，其中17例為因子宮肌瘤行手術(shù)治療病人的正常卵巢組織，病人年齡27～52歲，平均為46.4歲。21例為卵巢良性上皮性腫瘤組織，病人年齡21～63歲，平均50.2歲；其中漿液性乳頭狀囊腺瘤13例，黏液性乳頭狀囊腺瘤8例。卵巢惡性腫瘤組織38例，病人年齡27～67歲，平均59.6歲；其中漿液性乳頭狀囊腺癌26例,黏液性乳頭狀囊腺癌12例；依據(jù)病理分化程度,分為高分化組8例,中分化組11例和低分化組19例。從術(shù)中直接取得新鮮組織標(biāo)本后,立即保存在-70℃低
6、溫冰箱。每份標(biāo)本都經(jīng)病理檢查證實(shí)。1.2方法1.2.1總RNA抽提每份冷凍標(biāo)本取100mg，剪碎,加入Trizol溶液1mL裂解，按Trizol一步法抽提得到總RNA，紫外線分光光度計(jì)檢測RNA濃度和純度,放置-70℃冰箱保存。1.2.2RT?PCR反應(yīng)取0.18μg總RNA,在50μL體系中擴(kuò)增，引物由上海生工生物工程公司合成［2］。uPA引物序列Primer1:5′?ACTACTACGGCTCTGAAGTCACCA?3′，Primer2:5′?GAAGTGTGAGACTCTCGTGTAGAC?3′。RT?PCR產(chǎn)物長度為200bp。uPART?PCR條件為：50
7、℃反轉(zhuǎn)錄30min，95℃預(yù)變性15min；然后94℃變性1min，62℃退火1min，72℃延伸1min,30個(gè)循環(huán)；最后72℃延伸10min。PAI?1引物序列Primer1:5′?TG?CTGGTGAATGCCCTCTACT?3′，Primer2:5′?CGGTCATTCCCAGGTTCTCTA?3′。RT?PCR產(chǎn)物長度398bp。PAI?1RT?PCR條件為：50℃反轉(zhuǎn)錄30min，95℃預(yù)變性15min；然后94℃變性1min，60℃退火1min，72℃延伸1min,32個(gè)循環(huán)；最后72℃延伸10min。內(nèi)對(duì)照看家基因GAPDH引物序列Primer1
