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《舒肝健脾補腎方對慢性應激肝郁模型妊娠大鼠、胎鼠宮內(nèi)發(fā)育的干預作用》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在應用文檔-天天文庫。
1、舒肝健脾補腎方對慢性應激肝郁模型妊娠大鼠、胎鼠宮內(nèi)發(fā)育的干預作用：朱姝，王希浩，張愛華，黃保民【摘要】目的研究舒肝健脾補腎中藥對慢性應激肝郁模型孕鼠血清P、IGF-1、IGF-2、子宮蛻膜PR水平及胎鼠、胎盤重量的影響，探討肝郁影響生殖功能的機理及舒肝健脾補腎中藥的作用機理。方法復制孕鼠慢性應激肝郁模型，將60只孕鼠隨機分為5組：正常組、模型組、舒肝健脾補腎高組、舒肝健脾補腎低組、滋腎育胎丸組。孕19d剖宮取胎，放射免疫法測定孕鼠血清P、IGF-1、IGF-2的含量，用免疫組化法檢測子宮蛻膜PR
2、水平。結(jié)果模型組孕鼠血清P、IGF-1、IGF-2、子宮蛻膜PR水平及胎鼠、胎盤重量較正常組明顯降低(P﹤0.01)。舒肝健脾補腎高組血清P、IGF-1、IGF-2、子宮蛻膜PR水平及胎鼠、胎盤重量明顯高于模型組(P﹤0.01)。舒肝健脾補腎低組與與模型組相比無明顯差異(P﹥0.05)。結(jié)論舒肝健脾補腎方能提高慢性應激肝郁模型胎鼠、胎盤的重量。能提高孕鼠血清IGF-1、IGF-2的水平、P水平、子宮蛻膜PR水平。研究結(jié)果為臨床運用舒肝健脾補腎法治療肝郁型胎兒宮內(nèi)發(fā)育遲緩提供了理論依據(jù)。【關(guān)鍵詞】
3、肝郁模型;舒肝健脾補腎方;胎兒宮內(nèi)發(fā)育遲緩 胎兒宮內(nèi)發(fā)育遲緩是指胎兒出生體重低于同孕齡胎兒平均體重的兩個標準差或第10百分位數(shù)，是圍產(chǎn)兒發(fā)病和死亡的主要危險因素之一,還可影響兒童期和青年期發(fā)育，影響人口素質(zhì)[1]。胎兒宮內(nèi)發(fā)育遲緩應屬于祖國醫(yī)學的“胎萎不長”“胎不長”“妊娠胎萎燥”。中醫(yī)學認為，肝主疏泄，調(diào)暢情志。情志不遂，疏泄失職，致肝氣郁結(jié)，而肝氣郁結(jié)可致氣滯、血淤、痰濕，可影響脾腎功能，導致肝脾腎同病，胎失所養(yǎng)，胎萎不長。 本研究通過建立妊娠大鼠慢性應激肝郁動物模型，并以舒肝健脾補腎方藥
4、進行干預。實驗過程中，觀察孕鼠的自主行為，測定P、IGF-1、IGF-2、子宮蛻膜PR水平、胎鼠體重、胎盤重量，從中醫(yī)肝郁角度探討胎兒宮內(nèi)發(fā)育遲緩的機理，研究舒肝健脾補腎中藥對慢性應激肝郁狀態(tài)下妊娠大鼠及胎兒宮內(nèi)發(fā)育的影響，從而揭示肝郁影響生殖功能的機理及舒肝健脾補腎中藥的作用機理?！ ?材料與儀器 1.1實驗動物分組，LIBROR。離心沉淀機：LXJ-II，上海醫(yī)用分析儀器廠。石蠟切片機：Leit2，德國。攤片烤片機：HG3003-3，南京電器三廠制造。微波爐：格蘭仕，800B。雙目顯微鏡(
5、自動照相)：BHA，日本。全自動γ-放射免疫計數(shù)器：FJ-20089，南京?！ ?方法 2.1動物模型的建立按文獻法[2～5]，對模型組及藥物干預組孕鼠進行慢性心理應激實驗。孕鼠接受的應激包括：(1)束縛筒束縛，2h/次，3次/d。(2)程控穿梭箱聲-電刺激，刺激參數(shù)為①聲：強度為65dB，每循環(huán)持續(xù)60s，3循環(huán)/次，9循環(huán)/d;②電：足底電擊電流強度為3mA，每循環(huán)持續(xù)65s，3循環(huán)/次，9循環(huán)/d。連續(xù)刺激至動物處死，應激實驗環(huán)境與飼養(yǎng)環(huán)境分開，正常組孕鼠不給予刺激，孕鼠受刺激后出現(xiàn)尖叫
6、、直立、撓腮、撕咬、蜷縮、飲食減少、大便稀薄、體重下降，提示肝郁模型建立?！ ?.2給藥劑量與方法正常組給予蒸餾水灌胃，10ml/kg，1次/d,連續(xù)18d。模型組造模后給予蒸餾水灌胃，10ml/kg，1次/d，連續(xù)18d。舒肝健脾補腎高劑量組造模后給予舒肝健脾補腎方浸膏稀釋液灌胃，13.12g/kg·d，相當于成人劑量的13.4倍，10ml/kg，1次/d，連續(xù)18天。舒肝健脾補腎低劑量組造模后給與舒肝健脾補腎方浸膏稀釋液灌胃，6.56g/kg·d，相當于成人劑量的6.7倍，10ml/kg，1
7、次/d，連續(xù)18d。滋腎育胎丸組：造模后常規(guī)飼養(yǎng),給予滋腎育胎丸稀釋液灌胃，2.42g/kg·d，相當于成人劑量的13.4倍，10ml/kg，1次/d，連續(xù)18d?！ ?.3檢測指標及方法 2.3.1一般狀態(tài)及自主活動的觀察分組后，開始仔細觀察和記錄各組孕鼠體重及自主活動情況，并作出造模前后孕鼠的體重及自主活動情況變化對比。在心理應激刺激前后，分別進行開放場地實驗(敞箱試驗，Open-fieldtest，OFT):將受試大鼠放在OFT中心區(qū)域，同時開始記錄3min內(nèi)孕鼠穿越格數(shù)(以三足踏入同一
8、格為準)，以及孕鼠直立(雙前肢離地)次數(shù)[6～8]。每只動物僅進行1次測定，3min/次?！ ?.3.2陰道上皮脫落細胞的觀察大鼠合籠后，每天早上8點進行陰道上皮脫落細胞的觀察。將沾有生理鹽水的棉簽輕柔旋人母鼠的陰道(0.5cm)，旋轉(zhuǎn)一圈以后拿出,再將棉簽上沾有的陰道內(nèi)分泌物涂于清潔的玻片上。稍干，用95%水乙醇固定3～5min，HE染色，風干。在200×普通光學顯微鏡下觀察，1次/d，直到見到大量云片狀上皮細胞中夾有大量精子作為妊娠第1天。 2.3.3血清的測定在妊娠第19天時斷頭處死孕鼠
